小麦TaDEP1基因转录增强顺式作用元件的鉴定及其分子标记和应用

    公开(公告)号:CN111560452B

    公开(公告)日:2023-05-12

    申请号:CN202010190191.8

    申请日:2020-03-18

    IPC分类号: C12Q1/6895 C12N15/11

    摘要: 本发明公开了一种小麦TaDEP1基因转录增强顺式作用元件的鉴定及其分子标记和应用,本发明提供了如SEQ ID No.2所示的小麦TaDEP1基因转录增强顺式作用元件,以及用于鉴定TaDEP1基因转录水平的分子标记,用于特异性PCR扩增该标记的引物序列如SEQ ID No.5‑6所示。利用该转录增强元件能够提高小麦基因转录水平,可用于基因工程遗传改良目的基因转录水平;利用该标记能够方便、快速、准确地鉴定小麦TaDEP1基因转录水平,可用于分子标记辅助育种。

    一种植物中磺胺类抗生素提取与测定的方法

    公开(公告)号:CN108760935A

    公开(公告)日:2018-11-06

    申请号:CN201810783313.7

    申请日:2018-07-17

    IPC分类号: G01N30/02 G01N30/06

    摘要: 本发明公开了一种植物中磺胺类抗生素提取与测定的方法,具体步骤为:将预处理后的植物样品加入甲醇/盐酸混合提取液,依次经过超声、震荡和离心过程后,收集上清液,待用;然后在残渣中继续加入丙酮,依次经过超声、涡旋和离心过程后,收集上清液;将上述收集的上清液通过固相萃取柱分离,洗脱液为甲醇,收集的洗脱液经氮气吹干后用甲醇溶解;利用高效液相色谱测定甲醇溶解液中的磺胺类抗生素含量。本发明克服了现有植物中磺胺类抗生素残留的研究存在回收率低、试验过程繁琐、检出限较低的问题,提供了一种快捷、精确、高效的植物中磺胺类抗生素提取与检测的方法。

    成熟油菜次生休眠种子RNA的提取方法

    公开(公告)号:CN102634511B

    公开(公告)日:2013-03-13

    申请号:CN201210135479.0

    申请日:2012-05-04

    IPC分类号: C12N15/10

    摘要: 本发明属于植物生物技术领域,具体涉及成熟油菜次生休眠种子高质量RNA的快速提取方法。所述的方法选用RNAplantplusreagent植物总RNA提取试剂,通过β-巯基乙醇抑制RNA酶活性、防止酚类物质氧化,应用醋酸钠去除多糖类物质对RNA的影响,并减少抽提次数。使用本发明方法完成油菜次生休眠种子RNA的提取仅需30分钟,且RNA质量好、纯度高,并具有试剂用量少、经济节约等优点,已成功应用于后续的mRNA分离、纯化、建库以及高通量转录组测序。本发明为探明油菜种子次生休眠的分子机制提供了重要的技术保障,同时也可为其他多糖、多酚类植物的成熟休眠种子RNA提取提供技术参考。

    一种水稻核雄性不育基因OsNP1基因型的特异性分子标记及其应用

    公开(公告)号:CN113151540B

    公开(公告)日:2023-08-11

    申请号:CN202110274488.7

    申请日:2021-03-15

    摘要: 本发明公开了一种水稻核雄性不育基因OsNP1基因型的特异性分子标记及其应用,所述应用是通过特异性分子标记OsNP1‑SCAR实现,OsNP1‑SCAR分子标记是通过特异性引物对从水稻DNA中扩增出的核苷酸序列,扩增产物经过AvaII内切酶酶切后,相关带型能够有效区分群体内基因型,从而明确其表型。本发明是第一个针对OsNP1基因内部序列所开发的特异性SCAR标记。本发明所提供的鉴定方法,能够高通量的一次进行大量样品的鉴定,区分不育单株、杂合株,具有操作简便、低成本、特异性好以及高通量等特点,能快速应用于雄性不育材料在水稻育种中的研究,并降低育种成本。

    TGS1基因在调控水稻籽粒大小和产量中的应用

    公开(公告)号:CN113862283A

    公开(公告)日:2021-12-31

    申请号:CN202111139974.4

    申请日:2021-09-27

    摘要: 本发明公开了TGS1基因在调控水稻籽粒大小和产量中的应用,属于分子生物学及基因工程技术领域。本发明通过设计基因TGS1编码区敲除靶标位点,利用CRISPR/Cas9技术构建基因敲除突变体,敲除水稻中的TGS1基因。通过后代分离和检测,获得了无转基因插入的纯合突变体。不同突变体籽粒的粒长、粒宽、粒厚和单株产量与对照相比均显著增加。此外,突变体籽粒的长宽比显著大于对照,因而具有更好的外观品质。因此,本发明提供的TGS1基因在调控水稻籽粒大小和产量中的应用,具有重要的应用价值,能产生良好的经济效益。

    簇毛麦2VL染色体特异性RFLP-STS分子标记及其应用

    公开(公告)号:CN113528695A

    公开(公告)日:2021-10-22

    申请号:CN202110702111.7

    申请日:2021-06-23

    摘要: 本发明公开了一种簇毛麦2VL染色体特异性RFLP‑STS分子标记及其引物和用途,属于分子生物学和遗传育种科学技术领域。本申请通过对簇毛麦2VL染色体长臂RFLP探针BCD512的核苷酸序列进行分析,获得BCD512序列探针的SSR位点并在该位点两侧设计引物对,利用引物对从小麦及簇毛麦DNA中扩增出呈现簇毛麦特异性带型,并且与2VL长臂紧密连锁的核苷酸序列。该分子标记同时具有RFLP标记的染色体位点唯一性和确定性,以及SSR标记的高多态性和操作简便性,有利于加快簇毛麦2V染色体,尤其是小麦‑簇毛麦易位染色体材料所携带的优良性状向受体品种的转移与利用,提高新品种选育的效率,降低育种成本。

    小麦TaDEP1基因转录增强顺式作用元件的鉴定及其分子标记和应用

    公开(公告)号:CN111560452A

    公开(公告)日:2020-08-21

    申请号:CN202010190191.8

    申请日:2020-03-18

    IPC分类号: C12Q1/6895 C12N15/11

    摘要: 本发明公开了一种小麦TaDEP1基因转录增强顺式作用元件的鉴定及其分子标记和应用,本发明提供了如SEQ ID No.2所示的小麦TaDEP1基因转录增强顺式作用元件,以及用于鉴定TaDEP1基因转录水平的分子标记,用于特异性PCR扩增该标记的引物序列如SEQ ID No.5-6所示。利用该转录增强元件能够提高小麦基因转录水平,可用于基因工程遗传改良目的基因转录水平;利用该标记能够方便、快速、准确地鉴定小麦TaDEP1基因转录水平,可用于分子标记辅助育种。

    一种敲除水稻分蘖数调控基因OsFWL4以增加水稻分蘖数和产量的方法

    公开(公告)号:CN110791525A

    公开(公告)日:2020-02-14

    申请号:CN201911264946.8

    申请日:2019-12-10

    IPC分类号: C12N15/84 A01H5/00 A01H6/46

    摘要: 本发明公开了一种敲除水稻分蘖数调控基因OsFWL4以增加水稻分蘖数和产量的方法,属于分子生物学及基因工程技术领域。本发明通过设计水稻分蘖数调控基因OsFWL4编码区基因敲除靶标位点,利用CRISPR/Cas9技术构建基因敲除突变体,敲除水稻中的基因OsFWL4。通过后代分离和检测,获得了无转基因插入、无可检测脱靶效应的纯合突变体。不同突变体的分蘖数和单株产量与对照相比均显著增加。因此,本发明提供的敲除水稻分蘖数调控基因OsFWL4以增加水稻分蘖数和产量的方法,具有重要的应用价值,能产生良好的经济效益。

    油菜花总黄酮的提取方法

    公开(公告)号:CN105769967B

    公开(公告)日:2019-12-20

    申请号:CN201610194946.5

    申请日:2016-03-31

    IPC分类号: A61K36/31 A61K8/49 A23L33/105

    摘要: 本发明公开了油菜花总黄酮的提取方法,它包括以下具体操作步骤:(1)将新鲜油菜花置于50℃~60℃鼓风干燥箱中干燥至恒重,粉碎机粉碎至60~100目;(2)称取油菜花粉末,加入体积比60~80%的乙醇溶液,以1:10~1:20g/mL的料液比制成样品液,在60~80℃的温度回流提取50~90min;(3)将提取液冷却、抽滤,旋转蒸发仪减压浓缩去除溶剂,冷冻干燥后得油菜花总黄酮产品。本发明的方法简单,易于操作,提取成本低,终产品总黄酮含量高,安全。

    转基因油菜蜂花粉DNA的提取方法

    公开(公告)号:CN106754877A

    公开(公告)日:2017-05-31

    申请号:CN201611145606.X

    申请日:2016-12-13

    IPC分类号: C12N15/10

    CPC分类号: C12N15/1003

    摘要: 本发明公开了一种转基因油菜蜂花粉DNA的提取方法,首先将微量蜂花粉氮研磨破壁;其次加入高盐提取缓冲液、SDS和蛋白酶K;接着65℃水浴2 h,再加入适量NaCl溶液,10000 rpm离心30 min,取上清液;然后上清液中加入一定体积的‑20℃预冷的异丙醇,‑20℃放置2 h;最后10000 rpm离心10 min弃上清,沉淀物用质量浓度为75%的乙醇洗涤2~3次,去乙醇自然风干,即得油菜蜂花粉核酸。本发明的转基因油菜蜂花粉DNA提取方法的有益效果是:从转基因油菜蜂花粉中提取到高质量的适宜于PCR检测的DNA,操作简单、低毒、耗时短、利于快速检测。