一种同时富集磷酸化肽段和糖基化肽段并质谱分析的方法

    公开(公告)号:CN103940894A

    公开(公告)日:2014-07-23

    申请号:CN201310025887.5

    申请日:2013-01-23

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属蛋白质分析领域,涉及富集磷酸化肽和糖基化肽的方法,具体涉及一种利用氨基修饰的磁性纳米材料同时选择性富集磷酸化肽和糖基化肽的新方法。本发明通过一锅法合成了氨基修饰的磁性纳米材料Fe3O4@NH2,利用磁性材料Fe3O4和磷酸化肽之间的螯合作用以及材料表面带正电的氨基和带负电的磷酸肽之间的静电作用,实现磷酸化肽段的选择性富集;利用磁性纳米材料表面氨基的亲水性实现糖肽的选择性富集;进一步实现磷酸化肽段和糖基化肽段的同时富集和质谱分析。本发明方法步骤简单、操作方便、快速高效,可以实现磷酸化肽和糖基化肽的同时高灵敏质谱分析。

    一种对血清糖肽组高选择性富集的方法

    公开(公告)号:CN103364494A

    公开(公告)日:2013-10-23

    申请号:CN201210096008.3

    申请日:2012-03-31

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属生化分析领域,涉及一种血清糖肽组高选择性富集的新方法。尤其是利用功能化有序介孔纳米材料对血清糖肽组高选择性富集的方法。本发明选用具有合适孔径大小的功能化介孔纳米材料作为样品吸附剂,利用结合功能基团的糖肽捕获和介孔的尺寸排阻双重能力对血清中内源性糖基化多肽进行富集,PNGase F糖苷酶切除糖链后进行纳升级液相色谱串联质谱分析,数据库搜索鉴定氨基酸序列和相应的糖基化位点,成功实现了对血清糖肽组学的揭示。本发明提供了一种步骤简单、操作方便、快速高效,适应糖肽组学研究要求,高灵敏度检测和鉴定内源性糖基化多肽进而揭示血清糖肽组学的高选择性富集的新方法。

    一种用于样品富集的微流控液滴浓缩装置

    公开(公告)号:CN102527454A

    公开(公告)日:2012-07-04

    申请号:CN201210021464.1

    申请日:2012-01-31

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于微流控芯片技术领域,具体为一种用于样品富集的微流控液滴浓缩装置。该装置包括微流控芯片,简单样品进样装置或复杂样品分离装置,在线或离线检测装置;微流控芯片的样品溶液进样口连接简单样品进样装置或复杂样品分离装置,在微流控芯片中,分离的样品溶液被与样品溶液的溶剂微溶的另一相间隔和包裹,从而在微流控芯片通道中形成油包水或水包油的液滴,在微通道中连续相不断吸收样品溶液中的溶剂直至饱和,实现样品的收集和浓缩,浓缩后的样品通过微通道出口进入在线或离线检测装置进行在线或离线分析与鉴定。该装置结构简单,为低浓度物质的检测提供了一种有效的浓缩富集手段。

    一种红外线辅助蛋白快速酶解方法

    公开(公告)号:CN101323874B

    公开(公告)日:2011-11-02

    申请号:CN200810036916.7

    申请日:2008-04-30

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属蛋白质组学技术领域,具体为一种红外线辅助蛋白快速酶解方法。本发明将红外线灯泡安装在一有通气孔的箱子中,在箱的侧壁安装风扇以调节箱内温度,风扇的启动和关闭通过连有热电偶的温度控制仪控制,热电偶探头置于箱中以探测其中的温度,从而构成可控温的红外线辅助蛋白酶解装置。将蛋白质与蛋白水解酶如胰蛋白酶溶解于缓冲溶液中,于上述酶解装置中进行红外线辅助酶解,酶解时间缩短为5到10分钟,而酶解结果与传统的溶液酶解相当。本发明用红外线代替传统蛋白溶液酶解技术中使用的水浴,显著提高了酶解效率,设备简单,可用于批量蛋白样品的高通量酶解和鉴定。本发明提出在蛋白质研究、生物医学研究以及食品药品分析等领域有良好的应用前景。

    聚甲基丙烯酸甲酯微流控芯片溶剂辅助热压封装方法

    公开(公告)号:CN100503222C

    公开(公告)日:2009-06-24

    申请号:CN200510023645.8

    申请日:2005-01-27

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明涉及一种聚甲基丙烯酸甲酯微流控芯片溶剂辅助热压封装方法。选择对聚甲基丙烯酸甲酯溶解度较小且沸点较高的有机溶剂如环戊酮和冰乙酸等为粘合剂,使用硅阳模原位聚合制作的含微流通道的聚甲基丙烯酸甲酯微流控芯片基片,将上述有机溶剂均匀滴涂在聚甲基丙烯酸甲酯盖膜上并与基片合上,置于75-85℃的烘箱中,通过两块玻璃板施加1-2牛顿/平方厘米的压力10-15分钟,冷却到室温,即得聚甲基丙烯酸甲酯微流控芯片成品。本发明方法封装成功率和封装强度均大幅提高,而且操作简便,成本较低,可用于聚甲基丙烯酸甲酯微流控芯片的大规模生产。

    一种纳升喷雾装置
    106.
    发明授权

    公开(公告)号:CN100340856C

    公开(公告)日:2007-10-03

    申请号:CN200410016100.X

    申请日:2004-02-03

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明是一种质谱分析用的纳升喷雾装置。它由一个三通、喷雾头、注射针头和钼丝组成,喷雾头与三通的一端口密封连接,钼丝焊接固定于针头的尖端,针头由三通的一端口插入,穿过三通的另一端,钼丝前端伸入喷雾头的尖端部;三通的第三端口为气体通路。其中钼丝提供电接触,由气体通路提供辅助气体,帮助喷雾。本装置制作方便,操作简单,喷雾稳定性好,具有广阔应用前景。

    可用质谱现场检测产物的氨基酸、肽季铵化方法

    公开(公告)号:CN1280631C

    公开(公告)日:2006-10-18

    申请号:CN200410016734.5

    申请日:2004-03-04

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明为一种可用质谱现场检测产物的氨基酸、肽的季铵化方法。它是在原来的氨基酸、肽季铵化方法中采用的催化剂碳酸氢钾改为碳酸银,反应在室温下进行。本发明产物单一(以氨基酸季铵化、酯化产物为主),反应过程产生的碘化银有更小的溶度积。因此,本方法可与质谱联用进行产物的现场分析。本发明在蛋白质组学研究中有广泛的应用。

    本体修饰聚甲基丙烯酸甲酯微流控芯片的制备方法

    公开(公告)号:CN1632547A

    公开(公告)日:2005-06-29

    申请号:CN200410093483.0

    申请日:2004-12-23

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属生物检测技术领域,具体为一种本体修饰聚甲基丙烯酸甲酯微流控芯片的制备方法。将甲基丙烯酸甲酯与修饰剂混合,将少量热引发剂和光引发剂溶解在该混合溶液中,于水浴中加热使单体溶液预聚,将预聚溶液注入芯片模具中,用紫外光照射,引发本体聚合,制作得微流控芯片基片,然后用盖膜封装得微流控芯片。本发明将功能性修饰剂如甲基丙烯酸或对乙烯基吡啶等引入聚甲基丙烯酸甲酯的主链,对单体表面的荷电性进行调控,从芯片材料的分子水平控制电渗流,从而改善分离、提高芯片性能和拓宽芯片的用途。该芯片制作技术简便、成本低,可进行大规模生产,在环境监测、临床诊断、生命科学研究、食品分析和工业在线分析等领域中有良好的应用前景。

    纳米沸石分子筛组装材料作为亲和色谱填料分离功能蛋白质分子的方法

    公开(公告)号:CN1431497A

    公开(公告)日:2003-07-23

    申请号:CN03115232.5

    申请日:2003-01-28

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明是一种以纳米沸石分子筛组装体为新型的亲和色谱填充物,进行特定结构的功能蛋白分子分离的方法。目前尚无满意的分离功能蛋白分子的色谱分离方法。本发明以大孔-微孔多级有序的沸石结构通过离子交换过程固定过渡金属离子后,其作为亲和活性位点可同结构中具有连续组氨酸结构的功能生物大分子发生特异结合,然后通过缓冲溶液梯度洗脱,从而达到富集分离目的。该种载体具有孔道均匀,机械化学稳定性好,表面易改性,可以有效减小分离过程中的传质阻力,容易再生等优点。其中选择以硅藻土为模板,表面修饰纳米Beta沸石的分子筛材料为亲和色谱填充物,装柱后,利用不同的淋洗体系,分离功能蛋白分子得到满意的效果。

    便携式智能电子鼻及其制备方法

    公开(公告)号:CN1381721A

    公开(公告)日:2002-11-27

    申请号:CN02111963.5

    申请日:2002-06-04

    Applicant: 复旦大学

    CPC classification number: G06K9/00

    Abstract: 本发明是一种便携式智能电子鼻及其制备方法。现有技术的该类电子鼻抗干扰性能差,体积大,价格昂贵。本发明的智能电子鼻运用4-8组传感器阵列嗅觉,将测量的信号接入调理电路,经过模式识别,电脑处理后即能识别气体并警示。本发明的定性定量运用了神经元网络的模式识别和非线性拟合方法,并运用了前向传递的人工神经网络模型和误差反向传递的训练算法。利用本发明的方法通过训练智能电子鼻可以在所选相应的传感器气体敏感范围内无干扰地检测一种或几种气体,并且除了定性识别外还具有定量分析功能。

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