一种海洋微藻叶绿体表达载体及其应用

    公开(公告)号:CN101948871A

    公开(公告)日:2011-01-19

    申请号:CN201010285197.X

    申请日:2010-09-17

    申请人: 暨南大学

    IPC分类号: C12N15/82 C12N1/13 C12R1/89

    摘要: 本发明公开了一种海洋微藻叶绿体表达载体及其应用。该海洋微藻叶绿体表达载体包含同源重组序列I、目的基因表达盒和同源重组序列II;目的基因表达盒位于同源重组序列I和同源重组序列II之间;同源重组序列I的第1~972bp是rns的3’部分,第973~1097bp是trnI的5’部分;同源序列II的第1~196bp是trnA基因的3’部分,第197~1483bp是rnl的5’部分。该同源重组序列使得通过电击法即可将表达载体导入海洋微藻叶绿体基因组中,方便了载体导入叶绿体基因组的途径并大大降低了转化成本,为实现利用海洋微藻叶绿体为生物反应器生产高附加值产品提供了技术支撑。

    细胞核插入诱变选育高产光合制氢莱茵衣藻的方法

    公开(公告)号:CN101864365A

    公开(公告)日:2010-10-20

    申请号:CN201010183660.X

    申请日:2010-05-24

    摘要: 本发明涉及生物制氢技术,细胞核插入诱变选育高产光合制氢莱茵衣藻的方法。现有的莱茵衣藻产氢率低,限制了生物光合制氢技术的应用和发展。本发明对莱茵衣藻细胞核进行随机插入诱变而获得高产氢突变株方法如下:莱茵衣藻培养;莱茵衣藻细胞核转化载体和玻璃珠的准备;莱茵衣藻细胞核转化和转化子筛选;分析莱茵衣藻转化子产氢培养的产氢量和耗氧量;分析莱茵衣藻突变株中ble基因的整合及其表达;分析重组豆血红蛋白hemH-1ba基因对莱茵衣藻生长的影响。本发明的优点是方法是:获得的高产氢莱茵衣藻生物制氢产量是原有的7倍;为深入研究莱茵衣藻产氢代谢机理提供了良好的实验材料和良好的基础条件。

    大豆血红蛋白基因提高莱茵衣藻生物制氢产量的方法

    公开(公告)号:CN101845461A

    公开(公告)日:2010-09-29

    申请号:CN201010107922.4

    申请日:2010-02-09

    摘要: 本发明属于生物制氢技术,一种大豆血红蛋白基因提高莱茵衣藻生物制氢产量的方法。现有莱茵衣藻制氢的缺点是:莱茵衣藻氢酶对氧气敏感,容易受氧气的抑制而失去活性;限制了衣藻的产氢效果。本发明公开了一个豆血红蛋白球蛋白亚基基因在莱茵衣藻产氢中的应用,将豆血红蛋白球蛋白亚基基因lba构建在莱茵衣藻叶绿体表达载体中,并将该表达载体转入莱茵衣藻叶绿体中,使lba基因在莱茵衣藻叶绿体中表达。转化的莱茵衣藻的密闭培养体系中氧气含量下降明显比未转基因莱茵衣藻快,并且氧气含量能维持较低水平,产氢量明显增加;本发明方法适用于所有产氢的微藻。

    基因工程改造的蓝细菌及其生产乙醇的用途

    公开(公告)号:CN101372669A

    公开(公告)日:2009-02-25

    申请号:CN200710142781.8

    申请日:2007-08-23

    申请人: 黄娟

    发明人: 黄娟

    IPC分类号: C12N1/13 C12N15/60 C12P7/06

    CPC分类号: Y02E50/17

    摘要: 本发明涉及生物能源技术领域,具体涉及一种蓝细菌集胞藻突变株、筛选这种集胞藻突变株的方法、导入了编码丙酮酸脱羧酶多核苷酸和/或硝酸盐诱导的启动子序列的质粒表达载体、导入了编码丙酮酸脱羧酶多核苷酸和/或硝酸盐诱导的启动子序列的上述集胞藻突变株、以及上述突变株在制备乙醇中的应用。

    一种转基因莱茵衣藻生物反应器的构建方法

    公开(公告)号:CN1827769A

    公开(公告)日:2006-09-06

    申请号:CN200610018307.X

    申请日:2006-01-26

    申请人: 深圳大学

    摘要: 本发明涉及一种转基因莱茵衣藻生物反应器的构建方法。利用莱茵衣藻作为转基因受体生物,通过构建含有筛选标记基因表达框架的外源基因高效表达载体构建,利用“珠磨法”、基因抢法、或电击穿孔等方法,将来源于不同生物体(包括动物、植物和微生物等)的目的基因导入莱茵衣藻体内,并根据需要整合到细胞核基因组、或叶绿体基因组中,采用一系列基因表达调控技术,构建转基因莱茵衣藻高效生物反应器。该方法构建的转基因莱茵衣藻生物反应器生长速度快、繁殖周期短、产物易分离、光合自养和可集约化大规模培养等特性,实现快速、廉价生产各种药用蛋白质、工业原料、可食性疫苗、具有生物学活性的次生代谢产物等。

    蓝藻转基因表达系统及其用于表达胸腺素α1的方法

    公开(公告)号:CN1128880C

    公开(公告)日:2003-11-26

    申请号:CN00124699.2

    申请日:2000-09-29

    申请人: 厦门大学

    摘要: 涉及一种蓝藻转基因表达系统及表达外源基因的方法,构建了包含蓝藻热休克基因groESL强启动区、目的基因UBTα1、rbcS终止区和Km标记基因的完整的可高效表达的蓝藻基因表达系统,并运用基因整合平台系统和穿梭质粒系统进行转基因表达胸腺素α1,由于利用热休克基因groESL的强启动子,易调控,经热诱导后能几十上百倍地加快转录,同时利用泛素融合技术,使目的基因Tα1得到高效表达,转化藻的藻株中UBTα1的表达量分别达到17.6%和10%,且工艺简单、成本低。

    运用基因整合平台系统进行蓝藻转基因及表达胸腺素a1的方法

    公开(公告)号:CN1116416C

    公开(公告)日:2003-07-30

    申请号:CN00124700.X

    申请日:2000-09-29

    申请人: 厦门大学

    摘要: 涉及一种基因工程,从蓝藻Calothrix 7601染色体DNA上PCR扩增出cpc2启动区、整合平台同源片段L和R,组装了含cpc2启动区、UBTα1目的基因、rbcS终止子、Kmr报告基因和基因整合平台同源序列等元件的供体质粒pUTK,建立了Calothrix 7601新的基因整合平台系统,获得转UBTα1基因的藻株,并从中检测到Tα1基因的表达产物。本发明以蓝藻作为新型基因工程受体和生物反应器,使人的Tα1基因在其中高效表达,以大量生产Tα1,具有很大的开发前景。