一种基于荧光dUTP的自动检测SSR分子标记的方法

    公开(公告)号:CN101899520B

    公开(公告)日:2013-01-02

    申请号:CN201010239919.8

    申请日:2010-07-28

    Abstract: 本发明提供了一种基于荧光dUTP的自动检测SSR分子标记的方法,包括以下步骤:(1)配制PCR反应体系:取1.0μL 10×buffer、dNTP 25~50μM、MgCl22.0mM、前向引物0.5μM、后向引物0.5μM、Taq酶1个单位、荧光dUTP10pmol和基因组DNA 5ng混合,加超纯水补至10μL;(2)进行降落PCR:94℃4min;20个循环:94℃30s、70~60℃或者66~56℃30s且每个循环降低0.5℃、72℃1min;再26个循环:94℃30s、60或者56℃30s、72℃1min;最后72℃10min,得PCR产物;(3)取PCR产物1.0μL加入9.34μL超纯甲酰胺、0.16μL分子量内标,95℃5min后放置冰上快速冷却,在测序仪上进行标记检测。

    一种建立巨桉四倍体植株的诱导及培育体系的方法

    公开(公告)号:CN101869052B

    公开(公告)日:2012-12-05

    申请号:CN201010171354.4

    申请日:2010-05-05

    Abstract: 本发明公开了一种建立巨桉四倍体植株的诱导及培育体系的方法。该方法的步骤包括:(1)将巨桉无菌组培苗的带有腋芽或顶芽的茎段置于装有处理液的容器中,所述处理液中含有秋水仙素和助剂SD;将容器密闭后置于摇床上振荡,在35~40℃条件下加倍处理12~18小时;然后使用无菌水冲洗茎段,除去秋水仙素残留液,得到经过加倍处理的茎段;(2)将经过加倍处理的茎段接种到增殖培养基中进行培养,每隔15~20天即转接到新配制的增殖培养基中,转接3~5次后再进行生根培养。本发明创新之处是将助剂SD用到诱导过程,既可使用较低的秋水仙素浓度,节省用量,降低成本,又能显著提高诱导率,由现有的20%~30%提高到60~65%。

    正红菇菌根型食用菌的分离培养保存方法

    公开(公告)号:CN102715016A

    公开(公告)日:2012-10-10

    申请号:CN201210238171.9

    申请日:2012-07-10

    Abstract: 本发明公开了一种正红菇菌根型食用菌的分离培养保存方法,包括以下步骤:摘采正开伞的成熟正红菇子实体;取正红菇子实体菌柄与菌盖交接处的菌褶部分的组织块,放入含乳糖、维生素B1和叶酸的改良PDA固体培养基中,室温、避光培养3~5天,萌发得到菌丝体;将菌丝体放入含乳糖的改良MN固体培养基中,室温、避光培养5~7天,纯化菌丝体;将纯化的菌丝体转接入具胶盖的试管中,室温、避光培养5~7天;将无污染的试管置于10~15℃保存。这种正红菇菌根型食用菌的分离培养保存方法,组织块菌丝体的萌发率高达50%以上,菌种保存时间一次分转可达1年,菌种活性持续3年不退化。

    一种提高子京嫁接成活率的繁殖方法

    公开(公告)号:CN102138443B

    公开(公告)日:2012-05-30

    申请号:CN201110076583.2

    申请日:2011-03-29

    Abstract: 本发明公开了一种提高子京嫁接成活率的繁殖方法,该方法包括以下步骤:3~4月份,从子京母树上剪取半木质化或木质化的向阳的直立枝作为接穗,除去叶片,每段接穗保留2~4个芽眼,将接穗摊开,放置2~3天,让树汁自然液流出;用1~2年生子京实生小苗做砧木,离基部10cm高处截干,放置2~3天,让树汁液自然流出,直到切口汁液凝固;采用接穗、砧木双面枝接法嫁接。本发明对子京接穗和砧木做了前期处理,解决了子京汁液过多,导致操作困难且容易造成嫁接植物接口感染的难题;本发明还改良嫁接方法,采用接穗、砧木双面枝接法嫁接;采用本方法嫁接后,8~12天后伤口开始愈合,20~25天接穗可萌出新芽,成活率提高了22%,达到96%。

    一种木麻黄无菌试管苗的生根方法

    公开(公告)号:CN101953301B

    公开(公告)日:2011-12-07

    申请号:CN201010272648.6

    申请日:2010-09-01

    Abstract: 本发明公开了一种木麻黄无菌试管苗的生根方法,包括无菌操作条件下,在无菌试管苗的基部切出一个新鲜伤口,然后将无菌试管苗的基部插入灭菌冷却后含20-30μM萘乙酸和15-25g/L蔗糖的MSC液体培养基中,于温度27±3℃,每天光照12-20小时,光照强度45-60μmol/m2/s的条件下培养2-3天;随之将无菌试管苗取出,用灭菌去离子水清洗无菌试管苗的基部2-5次;将无菌试管苗转入灭菌冷却后含蔗糖30-50g/L的MSC液体培养基中,于温度27±3℃,每天光照12-20小时,光照强度45-60μmol/m2/s的条件下培养1-2周。本发明的木麻黄无菌试管苗的生根方法能够快速高效,培养10天就能生根,生根率高,培养两周生根率可以达到100%,生根数多,且根伸长生长明显。

    一种建立巨桉四倍体植株的诱导及培育体系的方法

    公开(公告)号:CN101869052A

    公开(公告)日:2010-10-27

    申请号:CN201010171354.4

    申请日:2010-05-05

    Abstract: 本发明公开了一种建立巨桉四倍体植株的诱导及培育体系的方法。该方法的步骤包括:(1)将巨桉无菌组培苗的带有腋芽或顶芽的茎段置于装有处理液的容器中,所述处理液中含有秋水仙素和助剂SD;将容器密闭后置于摇床上振荡,在35~40℃条件下加倍处理12~18小时;然后使用无菌水冲洗茎段,除去秋水仙素残留液,得到经过加倍处理的茎段;(2)将经过加倍处理的茎段接种到增殖培养基中进行培养,每隔15~20天即转接到新配制的增殖培养基中,转接3~5次后再进行生根培养。本发明创新之处是将助剂SD用到诱导过程,既可使用较低的秋水仙素浓度,节省用量,降低成本,又能显著提高诱导率,由现有的20%~30%提高到60~65%。

    根瘤菌与解磷芽孢杆菌共培养发酵方法

    公开(公告)号:CN1757716A

    公开(公告)日:2006-04-12

    申请号:CN200510036105.3

    申请日:2005-07-25

    Abstract: 本发明涉及一种根瘤菌与有解磷作用的巨大芽孢杆菌共培养发酵方法,其特征是首先将根瘤菌接种于共培养发酵培养基中,置于恒温旋转摇床,培养24~36小时;然后在上述步骤得到的含根瘤菌的共培养发酵培养基中接种有解磷作用的巨大芽孢杆菌,置于恒温旋转摇床,共培养48~60小时。本发明克服了根瘤菌较芽孢杆菌生长慢的问题,并利用共培养技术的混合增效和互补作用增强了发酵菌剂在生产应用中的增产节肥效果,使接种了这种发酵液的相思苗木高生长,根瘤数量,根瘤重量和生物量等均大大提高,而且发酵菌剂在田间的应用不会对土壤造成重金属污染,因此本发明有望用于生产新一代多功能多菌株的菌肥,在绿色农林业生产上具有广泛的应用前景。

    一种降香黄檀的组织快繁方法

    公开(公告)号:CN117178886B

    公开(公告)日:2025-02-07

    申请号:CN202310992829.3

    申请日:2023-08-08

    Abstract: 本发明公开了一种降香黄檀的组织快繁方法,该方法为:把降香黄檀茎段插入降香黄檀生芽生根培养基中进行生芽生根培养,得到长有丛生芽和根的降香黄檀植株,该降香黄檀生芽生根培养基包括MS基础培养基,4‑8g/L琼脂、25‑35g/L蔗糖、1.0‑2.0mg/L活性炭、15‑25ml/L椰汁、0.12‑0.18mg/L6‑BA和0.08‑0.12mg/L KT,PH为5.5‑6.0,培养温度为20‑28℃,培养光照时间为每日14‑18小时,培养光照强度为1500‑3000lx,培养时间为15‑20天。经过该方法能够高效得到降香黄檀的再生苗,能够用于林业生产。

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