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公开(公告)号：CN112375143A
公开(公告)日：2021-02-19
申请号：CN202110020699.8
申请日：2021-01-08
Applicant: 中国农业科学院生物技术研究所
IPC: C07K16/14 , G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种毕赤酵母UGGT1的多克隆抗体。本发明将毕赤酵母UGGT1基因片段克隆至大肠杆菌中，经过IPTG诱导表达，得到毕赤酵母UGGT1重组蛋白，以该重组蛋白为抗原，进行动物免疫，获得含有UGGT1抗体的抗血清，该抗血清能够特异性的与酵母中的UGGT1蛋白结合。本发明提供的抗体可以应用于定性或定量测定毕赤酵母的UGGT1蛋白。本发明制备的抗体效价高，专一性强，支持ELISA、Western‑blot等多种类型的实验操作。
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公开(公告)号：CN117965334B
公开(公告)日：2024-06-25
申请号：CN202410362886.8
申请日：2024-03-28
Applicant: 中国农业科学院生物技术研究所
Abstract: 本发明公开了表达虾青素的重组毕赤酵母菌株及其构建方法和应用。本发明发现，相比于单独表达虾青素合成途径的关键编码基因的重组酵母菌株，将毕赤酵母内质网压力响应转录因子HAC1p编码基因在表达虾青素的重组酵母菌株中与虾青素合成途径的5个关键编码基因进行共表达，使虾青素产量进一步提高65%，在摇瓶条件下达到48mg/L，在含有无机盐培养基的3.7L自动控制发酵罐培养条件下，虾青素产量达到380mg/L，本发明提供的表达虾青素的重组毕赤酵母工程菌株在制备或生产虾青素上具有一定的产业化潜力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113462713A
公开(公告)日：2021-10-01
申请号：CN202111035939.8
申请日：2021-09-06
Applicant: 中国农业科学院生物技术研究所
Abstract: 本发明公开了提高胰高血糖素样肽六连体在毕赤酵母中表达水平的方法。本发明基于转录组测序分析毕赤酵母低水平表达菌株和高水平表达菌株的差异基因，筛选出一个转录水平差异显著的新基因GESE。本发明利用毕赤酵母CRISPR/Cas9基因敲除技术敲除毕赤酵母宿主中GESE基因后发现6×mGLP‑1在毕赤酵母菌株中的表达水平得到显著提高。由此，本发明提供了一种提高胰高血糖素样肽六连体在毕赤酵母中表达水平的方法，包括将宿主毕赤酵母菌株中的GESE基因敲除或进行突变。本发明还进一步提供了胰高血糖素样肽六连体酵母表达载体以及GESE基因编辑载体。本发明为提高外源蛋白基因在毕赤酵母中的表达水平提供基础研究和新途径。
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公开(公告)号：CN116144633A
公开(公告)日：2023-05-23
申请号：CN202111401582.0
申请日：2021-11-19
Applicant: 中国农业科学院生物技术研究所
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种改构鸡蛋清溶菌酶及其应用。本发明针对鸡蛋清溶菌酶进行改造，替换其中98～112位序列为如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。改构后的蛋白已不具胞壁水解酶活性，但却比改构前的鸡蛋清溶菌酶具有更强的抑菌活性，尤其是针对棉花黄萎病菌。本发明还提供了相应的制备转基因植物的方法，将改构鸡蛋清溶菌酶的编码序列转导至棉花中进行表达，可以显著提高棉花对于黄萎病菌的抗性，而且与传统的、依赖于组织培养的方法相比，棉花活体茎尖遗传转化棉花方法转化方法操作简便、经济、不受棉花基因型限制，可快速获得T0代转基因种子。
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公开(公告)号：CN113801867B
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN202111365704.5
申请日：2021-11-18
Applicant: 中国农业科学院生物技术研究所
Abstract: 本发明公开了骆驼凝乳酶原突变蛋白及其编码基因和应用。所述骆驼凝乳酶原突变蛋白的氨基酸序列为SEQ ID No.1‑4所示，其编码基因的核苷酸序列分别为SEQ ID No.5‑8所示。本发明在骆驼凝乳酶原的自切割前导肽区域设计并分别突变四个氨基酸位点产生四个N‑糖基化保守序列，分别将其进行分泌表达时，突变点的区域分别形成一个N‑糖基化保守位点，使重组骆驼凝乳酶原的分泌表达水平显著提高，同时这些位点突变并不影响前导肽的自切割活性，且突变位点不在成熟蛋白上，因此不影响凝乳酶的凝乳活性。本发明骆驼凝乳酶原突变蛋白编码基因在毕赤酵母菌株中的表达量显著提升，在无需改变发酵生产工艺的条件下有效降低生产成本。
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公开(公告)号：CN113801867A
公开(公告)日：2021-12-17
申请号：CN202111365704.5
申请日：2021-11-18
Applicant: 中国农业科学院生物技术研究所
Abstract: 本发明公开了骆驼凝乳酶原突变蛋白及其编码基因和应用。所述骆驼凝乳酶原突变蛋白的氨基酸序列为SEQ ID No.1‑4所示，其编码基因的核苷酸序列分别为SEQ ID No.5‑8所示。本发明在骆驼凝乳酶原的自切割前导肽区域设计并分别突变四个氨基酸位点产生四个N‑糖基化保守序列，分别将其进行分泌表达时，突变点的区域分别形成一个N‑糖基化保守位点，使重组骆驼凝乳酶原的分泌表达水平显著提高，同时这些位点突变并不影响前导肽的自切割活性，且突变位点不在成熟蛋白上，因此不影响凝乳酶的凝乳活性。本发明骆驼凝乳酶原突变蛋白编码基因在毕赤酵母菌株中的表达量显著提升，在无需改变发酵生产工艺的条件下有效降低生产成本。
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公开(公告)号：CN113462713B
公开(公告)日：2021-12-07
申请号：CN202111035939.8
申请日：2021-09-06
Applicant: 中国农业科学院生物技术研究所
Abstract: 本发明公开了提高胰高血糖素样肽六连体在毕赤酵母中表达水平的方法。本发明基于转录组测序分析毕赤酵母低水平表达菌株和高水平表达菌株的差异基因，筛选出一个转录水平差异显著的新基因GESE。本发明利用毕赤酵母CRISPR/Cas9基因敲除技术敲除毕赤酵母宿主中GESE基因后发现6×mGLP‑1在毕赤酵母菌株中的表达水平得到显著提高。由此，本发明提供了一种提高胰高血糖素样肽六连体在毕赤酵母中表达水平的方法，包括将宿主毕赤酵母菌株中的GESE基因敲除或进行突变。本发明还进一步提供了胰高血糖素样肽六连体酵母表达载体以及GESE基因编辑载体。本发明为提高外源蛋白基因在毕赤酵母中的表达水平提供基础研究和新途径。
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