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公开(公告)号:CN112358544B
公开(公告)日:2022-09-09
申请号:CN202011285447.X
申请日:2020-11-17
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/58
Abstract: 本发明提供了FMDV A型牛源广谱中和单抗W145及其制备的中和抗体竞争ELISA检测试剂盒,属于病毒抗体检测技术领域。FMDV A型牛源广谱中和单克隆抗体W145,包括氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的重链可变区和氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示轻链可变区。单克隆抗体W145在制备中和FMDV A型病毒的试剂中的应用。FMDV A型牛源广谱中和单克隆抗体组合物,包括单克隆抗体W145和单克隆抗体E32,在制备基于直接竞争法检测FMDV A型中和抗体的免疫试剂盒中的应用。该试剂盒的检测结果与病毒微量中和试验结果显著相关,说明该试剂盒可用于血清中和抗体的检测。
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公开(公告)号:CN114675024A
公开(公告)日:2022-06-28
申请号:CN202210205821.3
申请日:2022-03-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明提供了一种猪A型塞内卡病毒中和性抗体,利用上述抗体制备的SVA竞争ELISA检测试剂盒及相应检测方法,所述检测试剂盒包括:包被有猪A型塞内卡病毒中和性单克隆抗体1M5并捕获抗原的反应板,生物素标记的猪A型塞内卡病毒中和性单克隆抗体1M25,阳性对照血清,阴性对照血清,血清稀释液,底物溶液,终止液,洗涤液。本发明利用SVA中和性抗体用于ELISA检测,相比SVA特异性抗体,中和性抗体更能准确反应SVA感染或者疫苗免疫水平;且本发明试剂盒和检测方法具有良好的特异性、敏感性、重复性和稳定性;检测操作简便,检测周期短,单次检测时间约为90min。
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公开(公告)号:CN114315984A
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN202111638189.3
申请日:2021-12-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一种用于制备PRRSV基因II型表位缺失疫苗毒株的N蛋白表位突变标记及其应用,属于生物制品技术领域。所述突变标记在PRRSV基因II型N蛋白C端92~103位表位序列的基础上突变一个或多个氨基酸,所述表位突变标记的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,其中X1可以为T、P或A,X2为V或A。本发明通过鉴定PRRSV基因II型病毒N蛋白中优势抗原表位,证明将此表位缺失后可以有效区分自然感染动物与表位缺失全病毒灭活疫苗或弱毒疫苗免疫动物,为PRRSV免疫净化防控产品的制备提供了依据。
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公开(公告)号:CN113265006B
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN202110598098.5
申请日:2021-05-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K19/00 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 本发明提供了一种用于捕获PRRSV核衣壳蛋白抗体的融合蛋白3AN及其应用,属于病毒检测技术领域。本发明提供了一种用于捕获猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白抗体的融合蛋白3AN,氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。试验表明以FMDV的3A表位单抗3A24作为包被抗体,捕获3AN融合蛋白后形成包被酶标板,以C8单抗作为检测抗体,采用竞争ELISA反应模式检测猪血清PRRSV抗体,制备的PRRSV抗体检测试剂盒,具有很好的敏感性和特异性,为PRRSV血清流行病学调查提供了一种新工具。
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公开(公告)号:CN114085842A
公开(公告)日:2022-02-25
申请号:CN202010855054.1
申请日:2020-08-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/13 , C12N15/85 , C07K16/10 , C07K1/14 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供了一种塞内卡病毒猪源单克隆基因工程抗体及其制备方法和应用,属于单克隆抗体制备技术领域。本发明提供的塞内卡病毒猪源单克隆基因工程抗体的制备方法,从感染和免疫SVA抗原的猪外周血中,利用单个B细胞抗体技术,获得SVA抗体IgG基因序列,并在真核细胞中表达和组装,获得SVA特异性猪源单克隆基因工程抗体,然后利用ELISA、病毒中和实验和免疫荧光实验验证筛选出SVA高亲和力的特异性猪源单克隆基因工程抗体,对研究SVA宿主特异性抗原位点的鉴定提供了重要方法,也为该病毒的新型疫苗设计和诊断方法的建立提供了关键技术材料。
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公开(公告)号:CN110642945B
公开(公告)日:2021-02-12
申请号:CN201911022083.3
申请日:2019-10-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/10 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供了通用型的口蹄疫病毒结构蛋白抗体及其阻断ELISA检测试剂盒,属于病毒检测技术领域。通用型口蹄疫病毒结构蛋白阻断ELISA抗体检测试剂盒,包括以下组成:包被抗原的酶标板、浓缩生物素标记单抗;浓缩生物素标记单抗中的单抗为单克隆抗体E32;包被抗原的酶标板为通过单克隆抗体F104间接包被FMDV抗原。E32和F104抗体特异性结合在FMDV结构蛋白VP2蛋白中的型间保守抗原表位,灵敏度和特异性均高,适用于O、A与Asia1型FMDV感染或灭活疫苗免疫后结构蛋白抗体的检测,是一种FMD非免疫动物群体感染状况监测的新方法,为FMDV结构蛋白VP2表位缺失的标记疫苗提供配套鉴别诊断方法。
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公开(公告)号:CN109810954A
公开(公告)日:2019-05-28
申请号:CN201910147243.0
申请日:2019-02-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/66 , C12N15/86 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种热稳定口蹄疫O型重组病毒及其制备方法和应用,属于兽药生物制品技术领域。所述病毒以O/rV病毒株为基本病毒株,包括结构蛋白VP2第98位突变为苯丙氨酸。所述重组病毒的制备方法,在VP2中同时引入了两个点突变S93F和Y98F,但在病毒传代过程中稳定保留了Y98F。所述含VP2 Y98F的FMDV O/rV-3具有良好的热稳定性,且具有良好的免疫效果。本发明构建的含VP2 Y98F耐热突变株O/rV-3可作为优质灭活疫苗生产种毒,显著提高灭活疫苗中的有效抗原含量,增加灭活疫苗的免疫效力,用于我国口蹄疫的有效防控。
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公开(公告)号:CN107881153A
公开(公告)日:2018-04-06
申请号:CN201711191274.3
申请日:2017-11-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
CPC classification number: C12N7/00 , C07K14/005 , C12N15/85 , C12N2770/32121 , C12N2770/32122 , C12N2770/32152
Abstract: 本发明提供了一种O型口蹄疫耐酸疫苗毒株及其构建方法,属于兽药生物制品技术领域。所述O型口蹄疫耐酸疫苗毒株rD86H,包括病毒结构蛋白VP2第86位天冬氨酸(D)突变为组氨酸(H)。所述耐酸毒株rD86H的结构蛋白VP2D86H具有如序列表中SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。本发明通过突变结构蛋白VP2中第86位D为H,从而使O型口蹄疫疫苗毒株具有极高的酸稳定性。所述毒株在提高酸稳定性的同时,还提高了所述毒株的热稳定性,而且VP2第86位氨基酸的变化对亲本毒株的免疫原性、生长特性和复制能力几乎没有影响,因此本发明构建的耐酸突变株可作为优质疫苗种毒,提升FMDV灭活疫苗的免疫效力。
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公开(公告)号:CN107201346A
公开(公告)日:2017-09-26
申请号:CN201710175378.9
申请日:2017-03-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/42 , C07K14/09 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供一种3B蛋白优势表位缺失的口蹄疫标记疫苗株及其构建方法和应用,该标记疫苗株3B1和3B2非结构蛋白编码的氨基酸序列如序列表SEQ ID No.8所示。本发明构建的疫苗株具有3B1和3B2非结构蛋白氨基酸的突变修饰(4AGP6‑4TAA6),其中3B1和3B2蛋白氨基酸的突变导致重组病毒完全丧失了与识别3B1和3B2优势表位PYxGP单克隆抗体3B4B1的结合能力,并且经标记的病毒具有与亲本病毒相似的复制能力。因而本发明构建的口蹄疫标记疫苗株可以用来发展具有区分自然感染与疫苗免疫的口蹄疫标记疫苗,为我国口蹄疫的控制、净化和无疫区的建设提供一种可靠的技术支撑。
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公开(公告)号:CN105399802A
公开(公告)日:2016-03-16
申请号:CN201510897656.2
申请日:2015-12-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/09 , C12N15/42 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种A型口蹄疫基因工程复合表位蛋白,其特征在于:所述复合表位蛋白的氨基酸序列为序列表中SEQ ID No.2。本发明还提供含有上述A型口蹄疫基因工程复合表位蛋白的疫苗。应用本发明的疫苗免疫动物,一周后就可检测到A型口蹄疫病毒特异性抗体,抗体效价不断升高,免疫四周时抗体效价最高。用A型口蹄疫流行毒攻毒后,疫苗免疫组猪均可完全抵抗强毒攻击,能够作为一种新型A型口蹄疫基因工程疫苗使用。
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