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公开(公告)号:CN116769021A
公开(公告)日:2023-09-19
申请号:CN202310969810.7
申请日:2023-08-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于免疫学和体外诊断技术领域,具体涉及一种针对非洲马瘟病毒VP7蛋白的单克隆抗体及制备方法。本发明通过将重组表达的非洲马瘟病毒VP7蛋白免疫BALB/c小鼠,筛选获得一种针对非洲马瘟病毒VP7蛋白的单克隆抗体,并通过反转录PCR技术成功获得了编码该株抗体重链及轻链可变区的核苷酸序列。所述单克隆抗体与重组表达的VP7蛋白具有良好的亲和反应能力。利用该单克隆抗体建立了非洲马瘟病毒竞争ELISA抗体检测方法,为有效防控非洲马瘟传入我国提供了技术基础。
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公开(公告)号:CN119912558A
公开(公告)日:2025-05-02
申请号:CN202510283617.7
申请日:2025-03-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于免疫学和体外诊断技术领域,涉及一株针对牛结节性皮肤病病毒(LSDV)L1R蛋白的单克隆抗体。本发明表达获得了缺失跨膜区(182‑204aa)的LSDV重组L1R蛋白;将所述蛋白免疫小鼠后筛选出了一株反应性和特异性良好的针对LSDV L1R蛋白的单克隆抗体8D5;并获得编码单克隆抗体8D5的重链及轻链可变区序列;所述单克隆抗体8D5能够与LSDV L1R蛋白发生特异性反应,且所述重组蛋白L1R能被牛LSDV阳性血清特异识别,同时单克隆抗体8D5可用于建立LSDV ELISA抗体检测方法,这为LSDV的诊断技术和疫苗研发奠定了基础。
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公开(公告)号:CN119039428B
公开(公告)日:2025-03-11
申请号:CN202411156911.3
申请日:2024-08-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于体外诊断技术领域,具体涉及一种抗非洲马瘟病毒VP7蛋白的鼠源重组抗体及其制备方法。本发明利用杂交瘤细胞技术筛选得到的针对非洲马瘟病毒VP7蛋白的杂交瘤细胞株2B8,将所述杂交瘤细胞株2B8用Trizol裂解后提取总RNA,利用巢式PCR方法扩增得到重链及轻链可变区序列;并将所述重链及轻链可变区序列构建到含有鼠源恒定区的载体上,成功表达获得了抗非洲马瘟病毒VP7蛋白的重组抗体;所述重组抗体能够识别大肠杆菌表达的重组VP7蛋白,且与在BHK21细胞内表达的重组VP7蛋白发生特异性反应;可利用该重组抗体建立非洲马瘟病毒竞争ELISA抗体检测方法,为有效防控非洲马瘟传入我国提供了技术基础。
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公开(公告)号:CN118930644A
公开(公告)日:2024-11-12
申请号:CN202411181972.5
申请日:2024-08-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/68 , C12N15/85
Abstract: 本发明利用杂交瘤细胞技术筛选得到识别蓝舌病毒VP7蛋白的杂交瘤细胞株2B2,将所述杂交瘤细胞株2B2用Trizol裂解后提取细胞总RNA,反转录后利用巢式PCR方法扩增得到抗体分子重链及轻链可变区序列;并将所述重链及轻链可变区序列构建到含有鼠源IgG恒定区的表达载体上,成功表达获得了识别蓝舌病毒VP7蛋白的基因工程抗体;所述基因工程抗体能够与蓝舌病毒的重组VP7蛋白发生反应,且能识别蓝舌病毒感染BHK‑21细胞和KC细胞中的天然VP7蛋白;可利用该基因工程抗体建立蓝舌病毒竞争ELISA、夹心ELISA及胶体金试纸条等检测方法,为有效防控蓝舌病提供了技术基础。
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公开(公告)号:CN116769021B
公开(公告)日:2024-04-19
申请号:CN202310969810.7
申请日:2023-08-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于免疫学和体外诊断技术领域,具体涉及一种针对非洲马瘟病毒VP7蛋白的单克隆抗体及制备方法。本发明通过将重组表达的非洲马瘟病毒VP7蛋白免疫BALB/c小鼠,筛选获得一种针对非洲马瘟病毒VP7蛋白的单克隆抗体,并通过反转录PCR技术成功获得了编码该株抗体重链及轻链可变区的核苷酸序列。所述单克隆抗体与重组表达的VP7蛋白具有良好的亲和反应能力。利用该单克隆抗体建立了非洲马瘟病毒竞争ELISA抗体检测方法,为有效防控非洲马瘟传入我国提供了技术基础。
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公开(公告)号:CN116836270B
公开(公告)日:2024-03-26
申请号:CN202310968943.2
申请日:2023-08-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种抗蓝舌病毒VP7蛋白的单克隆抗体、制备方法及应用。本发明筛选获得一株高效分泌抗蓝舌病毒VP7蛋白单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系,并通过RT‑PCR技术成功获得了该株抗体的重链及轻链可变区核苷酸序列。所述单克隆抗体不仅与重组表达的VP7蛋白具有良好的亲和反应能力,而且能够与蓝舌病毒感染细胞中天然的VP7蛋白发生特异性反应;以该单克隆抗体为竞争抗体建立了蓝舌病毒竞争ELISA抗体检测方法,为蓝舌病的检测诊断以及流行病学调查提供了工具。
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公开(公告)号:CN116836270A
公开(公告)日:2023-10-03
申请号:CN202310968943.2
申请日:2023-08-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种抗蓝舌病毒VP7蛋白的单克隆抗体、制备方法及应用。本发明筛选获得一株高效分泌抗蓝舌病毒VP7蛋白单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系,并通过RT‑PCR技术成功获得了该株抗体的重链及轻链可变区核苷酸序列。所述单克隆抗体不仅与重组表达的VP7蛋白具有良好的亲和反应能力,而且能够与蓝舌病毒感染细胞中天然的VP7蛋白发生特异性反应;以该单克隆抗体为竞争抗体建立了蓝舌病毒竞争ELISA抗体检测方法,为蓝舌病的检测诊断以及流行病学调查提供了工具。
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