一种N‑糖链固相富集并质谱分析的方法

    公开(公告)号:CN105372356B

    公开(公告)日:2017-10-10

    申请号:CN201410428810.7

    申请日:2014-08-27

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属糖蛋白质组学和糖组学分析领域,涉及一种用氨基磷酸盐衍生N‑糖链并用Ti4+修饰磁性纳米材料富集衍生后的N‑糖链的方法,其包括:首先通过对N‑糖链的还原端进行氨基磷酸盐的衍生在N‑糖链上引入磷酸根,再将Ti4+修饰的磁性纳米材料Fe3O4@Ti4+置于衍生后的糖链溶液中,通过Ti4+和糖链中的磷酸根之间的螯合反应,将糖链固定在磁性纳米材料上,随后将未和纳米材料结合的非糖链分子(如蛋白质、多肽、无机盐等)清洗除去,最后再在碱性条件下将捕获的糖链从材料上解离下来,送入质谱分析糖链。本发明方法步骤简单、操作方便、快速高效,能实现N‑糖链的高灵敏、高选择性质谱分析。

    叠环离子淌度飘移管均匀给气装置

    公开(公告)号:CN106356275A

    公开(公告)日:2017-01-25

    申请号:CN201610641192.3

    申请日:2016-08-08

    Applicant: 复旦大学

    CPC classification number: H01J49/0422

    Abstract: 本发明属于叠环离子淌度给气技术领域,具体为一种叠环离子淌度飘移管给气装置。本发明包括进气口、储气腔、给气口、密封板、极板连接口;进气口包括进气嘴及外部导管;密封板包括密封圈凹槽、密封圈;外部给气通过进气口与内部储气腔连通;整个储气腔体内除给气口外,其他位置保持密闭状态,所有给气口均匀分布于储气腔与离子漂移区间,用以保证给气的均匀性。给气装置通过极板连接口与叠环极板相连接,此接口可根据需要调整。整个给气装置可以根据需要配合叠环极板结构,调整尺寸、极板连接口及给气量,且始终确保给气的均匀性。

    人结肠癌蛋白Spondin-2在制备结肠癌诊断制剂中的应用

    公开(公告)号:CN105807062A

    公开(公告)日:2016-07-27

    申请号:CN201410840023.3

    申请日:2014-12-28

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于分子生物学和医学领域,涉及一种人结肠癌蛋白Spondin-2的新用途,即其在制备结肠癌诊断制剂中的应用,本发明还提供了相应的试剂盒及其用途。具体而言,本发明提供了一种人结肠癌蛋白质标志物Spondin-2的应用方法,用于制备诊断、预测、检测或筛查结肠癌的制剂;还可以用于制备诊断、预测、检测或筛查结肠癌细胞的增殖、转移、结肠癌临床分期、结肠癌病人预后的制剂。本发明为有效判断结肠癌癌变进程提供科学依据。

    一种二/三甲基化肽段富集和质谱分析的方法

    公开(公告)号:CN105693816A

    公开(公告)日:2016-06-22

    申请号:CN201610151772.4

    申请日:2016-03-17

    Applicant: 复旦大学

    CPC classification number: C07K1/22 G01N33/6848

    Abstract: 本发明属蛋白质分析技术领域,具体为一种二/三甲基化(Kme2/3)修饰肽段富集和质谱分析的方法。本发明方法包括:对蛋白上未修饰(Kme0)或者单甲基化(Kme1)修饰的赖氨酸进行衍生化使其带上生物素标记,再将蛋白酶解成肽段后,再加入亲和素偶联的琼脂糖微球,通过生物素和亲和素之间的高特异和高亲和作用,除去Kme0/1肽段,在上清中保留Kme2/3修饰肽段,最后利用除盐柱捕获上清中的肽段,送入质谱分析质谱分析Kme2/3修饰肽段。本发明方法首次实现对Kme2/3修饰肽段的化学富集,能显著地提高Kme2/3修饰肽段的分析质谱选择性,并且具有特异性强、重现性好、步骤简单、操作方便等特点。

    体内终端氨基酸标记的定量蛋白质组学方法

    公开(公告)号:CN102243218B

    公开(公告)日:2013-11-27

    申请号:CN201110123885.0

    申请日:2011-05-13

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 一种基于细胞培养和串级质谱的蛋白质组学相对定量方法。在细胞培养过程中加入相同质量增加的重同位素标记的精氨酸或赖氨酸,细胞蛋白提取液按不同比例混合,经过特异性内切酶Lys-N和Arg-C酶解后,直接2D-LC-MS/MS分析,提取串级质谱中具有固定质量增加的b,y碎片离子对的峰强度,做比值后确定相应肽段和蛋白的相对量,该方法克服了一级质谱定量的复杂度增加的问题和同重同位素标签串级质谱定量的低质量端抑制效应,提高了一级质谱信号的灵敏度,同时由于在串级质谱中采用多对b,y碎片离子对进行定量,从而保证了该定量方法的准确性和可靠性。为定量蛋白质组学的研究和发展,提供了一个新的方法和技术平台。

    表面修饰氨基苯硼酸的纳米碳材料及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN103043647A

    公开(公告)日:2013-04-17

    申请号:CN201210573541.4

    申请日:2012-12-26

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于无机材料和生物分析技术领域,具体为一种表面修饰氨基苯硼酸的纳米碳材料及其制备方法和应用。本发明是在原有纳米碳材料经酸化处理的基础上,通过碳化二亚胺反应,首先将其表面进行多聚赖氨酸以及聚乙二醇二甘醇酸修饰后,再与氨基苯硼酸反应进行纳米碳材料表面功能化修饰。本发明的合成方法简单有效,制备的氨基苯硼酸功能化纳米碳材料作为纳米吸附剂,比表面积大,选择特异性强,在水溶液中具有较好的分散性和稳定性,可快速实现糖肽/糖蛋白的特异性分离富集。该材料在糖蛋白质组学等领域中具有良好的实用价值和应用前景。

    一种分离富集和鉴定大分子量蛋白质的方法

    公开(公告)号:CN101788541B

    公开(公告)日:2012-10-24

    申请号:CN200910045881.8

    申请日:2009-01-24

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属生化分析领域,涉及一种分离富集和鉴定大分子量蛋白质的方法。本发明利用低熔点琼脂糖和聚丙烯酰胺混合凝胶作为电泳支持介质,联和应用凝胶垂直电泳结合高效液相色谱分离-电喷雾质谱鉴定的分析路线和固相梯度pH干胶条等电聚焦结合所述凝胶垂直电泳分离-基质辅助激光解吸电离质谱鉴定的分析路线,分离鉴定大分子量蛋白质。所提供的凝胶孔径大、机械强度大、分辨率高、重现性好、及质谱兼容性好,可同时根据组分的不同比例调整合适的大分子量分离范围。能选择性地分离100kDa以上分子量区间的蛋白质,重现性达RSD 7.6%,明显提高鉴定率。本方法为分离大分子量蛋白质提供有效工具,可应于蛋白质组学研究领域。

    一种原位无损分析的质谱进样方法及其装置

    公开(公告)号:CN102192948A

    公开(公告)日:2011-09-21

    申请号:CN201010129119.0

    申请日:2010-03-18

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属样品分析领域,涉及一种原位无损分析的质谱进样方法及其装置。本发明使用电加热使有机物挥发,不伤害样品,利用惰性气体将挥发物带入到质谱中。本发明装置由金属制成质谱探头,在探头上装有加热器与温度传感器作为加热装置和温度反馈装置,在探头上开有两个孔,加有两路管路,通过电线与电源和温度控制模块相连,通过计算机设定探头的温度,可以精确的控制温度。本发明装置简单,便于携带安装。

    一种分离富集和鉴定大分子量蛋白质的方法

    公开(公告)号:CN101788541A

    公开(公告)日:2010-07-28

    申请号:CN200910045881.8

    申请日:2009-01-24

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属生化分析领域,涉及一种分离富集和鉴定大分子量蛋白质的方法。本发明利用低熔点琼脂糖和聚丙烯酰胺混合凝胶作为电泳支持介质,联和应用凝胶垂直电泳结合高效液相色谱分离-电喷雾质谱鉴定的分析路线和固相梯度pH干胶条等电聚焦结合所述凝胶垂直电泳分离-基质辅助激光解吸电离质谱鉴定的分析路线,分离鉴定大分子量蛋白质。所提供的凝胶孔径大、机械强度大、分辨率高、重现性好、及质谱兼容性好,可同时根据组分的不同比例调整合适的大分子量分离范围。能选择性地分离100kDa以上分子量区间的蛋白质,重现性达RSD 7.6%,明显提高鉴定率。本方法为分离大分子量蛋白质提供有效工具,可应于蛋白质组学研究领域。

    聚二甲基硅氧烷阳模原位聚合制备有机玻璃微流控芯片的方法

    公开(公告)号:CN100577391C

    公开(公告)日:2010-01-06

    申请号:CN200510024053.8

    申请日:2005-02-25

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明涉及一种聚二甲基硅氧烷阳模原位聚合制备有机玻璃微流控芯片的方法。采用光刻和微复制技术制作含有微流控芯片微流通道结构的聚二甲基硅氧烷阳模。将甲基丙烯酸甲酯与少量热引发剂和光引发剂混合、加热,使单体溶液预聚成甘油状清亮溶液。将一中间镂空为芯片尺寸的矩形的聚二甲基硅氧烷片放在聚二甲基硅氧烷阳模上,构成芯片模具,将上述预聚溶液注满模具空腔,再将一有机玻璃片盖在模具空腔上,用紫外光照射预聚溶液引发本体聚合,制得含微流通道的微流控芯片基片。基片与相同材料的盖片或盖膜通过溶剂辅助热压封装后,得有机玻璃微流控芯片。本发明方法操作简便、价格低廉,可进行批量生产。该芯片在环境监测、临床诊断和食品分析等领域中有良好的应用前景。

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