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公开(公告)号:CN1884552A
公开(公告)日:2006-12-27
申请号:CN200610028022.4
申请日:2006-06-22
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明涉及基因工程领域和结核疫苗领域。近十几年来由于结核耐药株增多和结核分枝杆菌与HIV的共感染,导致结核病发病率增高,成为继HIV之后人类的第二大杀手。目前全球广泛使用的唯一的结核病疫苗是BCG。本发明将结核分枝杆菌最重要的保护性抗原基因和BCG中缺失的结核分枝杆菌基因插入大肠杆菌—结核分枝杆菌穿梭质粒的多克隆位点形成重组质粒,并将其转化入BCG中形成重组结核疫苗。实验结果表明,和BCG疫苗相比,保护性抗原得到了更高效的表达,原来缺失的Rv3425抗原也得到了表达,并且所诱导的小鼠脾细胞IFN-γ表达也有显著的增高。这说明本发明的重组结核疫苗可以诱导较BCG高的细胞免疫水平。
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公开(公告)号:CN1274835C
公开(公告)日:2006-09-13
申请号:CN200410067343.6
申请日:2004-10-21
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生物技术领域,具体为一种结核分枝杆菌ESAT-6蛋白在毕赤氏酵母中的融合表达方法。它将esat-6基因和人α-2a干扰素基因串联起来,两者间的linker为人肠激酶识别序列,将重组融合基因的DNA片段插入表达载体p PIC9K,电击导入毕赤氏酵母菌株SMD1168中,实现ESAT-6融合蛋白的高效分泌表达。经疏水层析和离子交换获得纯的ESAT-6蛋白。
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公开(公告)号:CN1737152A
公开(公告)日:2006-02-22
申请号:CN200510027966.5
申请日:2005-07-21
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明涉及基因工程领域和结核疫苗领域。近十几年来由于结核耐药株增多和HIV/AIDS的蔓延,结核病发病率增高,成为继HIV之后人类的第二大杀手。目前全球广泛使用的唯一的结核病疫苗是BCG。本发明将结核分枝杆菌最重要的保护性抗原基因插入大肠杆菌-结核分枝杆菌穿梭质粒的多克隆位点形成重组质粒,并将其转化入BCG中形成重组结核疫苗。实验结果表明,和BCG组相比,该保护性抗原得到了更高效的表达,并且所诱导的脾细胞IFN-γ表达也有显著的增高。这说明本发明的重组结核疫苗可以诱导较BCG高的体液和细胞免疫水平。
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公开(公告)号:CN103589676A
公开(公告)日:2014-02-19
申请号:CN201310564900.4
申请日:2013-11-14
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于基因工程和卡介苗技术领域,具体为一种结核杆菌的重组卡介苗。目前全球广泛使用的唯一的结核病疫苗是BCG。本发明的重组卡介苗,是将结核杆菌rv3425基因重组表达于卡介苗BCG中而构建获得,记为rBCG::Rv3425。这种新的重组卡介苗免疫小鼠后,小鼠外周血中CD4+,CD8+T淋巴细胞的比例均比BCG组明显增加,CD4+,CD8+T淋巴细胞在抗结核免疫中有重要作用。因此,重组卡介苗rBCG::Rv3425可以用于结核分枝杆菌的预防。
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公开(公告)号:CN102154492A
公开(公告)日:2011-08-17
申请号:CN201110055475.7
申请日:2011-03-09
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体为一种检测结核分枝杆菌北京基因型的方法。本发明通过基因扩增和序列比对分析,检测Rv2629基因191位核苷酸A/C和Rv0444c基因242位核苷酸G/C突变,如果Rv2629和Rv0444c基因同时发生单碱基置换突变,则判定待检菌株为结核分枝杆菌北京基因型菌株。与其它区分北京基因型的方法相比,本方法具有操作简便,费用低廉,检测时间短,适于在临床或者科学研究中对结核杆菌菌株的快速分型。
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公开(公告)号:CN100457912C
公开(公告)日:2009-02-04
申请号:CN200510027966.5
申请日:2005-07-21
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明涉及基因工程领域和结核疫苗领域。近十几年来由于结核耐药株增多和HIV/AIDS的蔓延,结核病发病率增高,成为继HIV之后人类的第二大杀手。目前全球广泛使用的唯一的结核病疫苗是BCG。本发明将结核分枝杆菌最重要的保护性抗原基因插入大肠杆菌—结核分枝杆菌穿梭质粒的多克隆位点形成重组质粒,并将其转化入BCG中形成重组结核疫苗。实验结果表明,和BCG组相比,该保护性抗原得到了更高效的表达,并且所诱导的脾细胞IFN-γ表达也有显著的增高。这说明本发明的重组结核疫苗可以诱导较BCG高的体液和细胞免疫水平。
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公开(公告)号:CN100395342C
公开(公告)日:2008-06-18
申请号:CN200610028022.4
申请日:2006-06-22
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明涉及基因工程领域和结核疫苗领域。近十几年来由于结核耐药株增多和结核分枝杆菌与HIV的共感染,导致结核病发病率增高,成为继HIV之后人类的第二大杀手。目前全球广泛使用的唯一的结核病疫苗是BCG。本发明将结核分枝杆菌最重要的保护性抗原基因和BCG中缺失的结核分枝杆菌基因插入大肠杆菌—结核分枝杆菌穿梭质粒的多克隆位点形成重组质粒,并将其转化入BCG中形成重组结核疫苗。实验结果表明,和BCG疫苗相比,保护性抗原得到了更高效的表达,原来缺失的Rv3425抗原也得到了表达,并且所诱导的小鼠脾细胞IFN-γ表达也有显著的增高。这说明本发明的重组结核疫苗可以诱导较BCG高的细胞免疫水平。
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公开(公告)号:CN1952168A
公开(公告)日:2007-04-25
申请号:CN200610117754.0
申请日:2006-10-30
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于分子生物学筛选新型抗结核药靶、疫苗抗原和检测新标志物领域,具体的说,本发明提供了一种筛选结核杆菌耐利福平药物的蛋白的方法:首先,培养耐多药菌株;其次,分别分离耐多药菌株和敏感菌株中的蛋白;再次,将耐多药菌株和敏感菌株中的蛋白进行对比,确定耐多药蛋白;最后,分离鉴定耐多药蛋白。本发明提供的方法可以准确分离鉴定结核杆菌耐多药蛋白,为深入了解结核杆菌的耐多药机理、临床耐多药株的快速检测及疫苗、药靶的开发提供新的途径。
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公开(公告)号:CN1888069A
公开(公告)日:2007-01-03
申请号:CN200610028904.0
申请日:2006-07-13
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于基因工程和诊断试剂的领域。目前,结核病诊断广泛使用皮肤检测试剂一结核分支杆菌纯蛋白衍生物。然而,结核分支杆菌纯蛋白衍生物存在与环境分支杆菌以及M.novis BCG疫苗株的交叉反应,所以其诊断价值受到减弱。而且,由于BCG是一株活疫苗,可能使患者免疫系统受到损伤,因此,用结核分支杆菌纯蛋白衍生物检测,可能使免疫力低下的受检测者感染其他疾病。本发明的Rv3425特异性抗原不论在检测肺结核还是肺外结核,敏感性都比较高,是一个免疫显性的B-细胞目标抗原,用于制备结核病检测试剂盒,敏感性高效并且安全可靠。
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公开(公告)号:CN1603415A
公开(公告)日:2005-04-06
申请号:CN200410067343.6
申请日:2004-10-21
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生物技术领域,具体为一种结核分枝杆菌ESAT-6蛋白在毕赤氏酵母中的融合表达方法。它将esat-6基因和人α-2a干扰素基因串联起来,两者间的linker为人肠激酶识别序列,将重组融合基因的DNA片段插入表达载体p PIC9K,电击导入毕赤氏酵母菌株SMD1168中,实现ESAT-6融合蛋白的高效分泌表达。经疏水层析和离子交换获得纯的ESAT-6蛋白。
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