利用FAD依赖型D-2-羟基戊二酸脱氢酶和刃天青检测D-2-羟基戊二酸的方法

    公开(公告)号:CN112592958A

    公开(公告)日:2021-04-02

    申请号:CN202011431947.X

    申请日:2020-12-07

    发明人: 张文

    摘要: 本发明公开了利用FAD依赖型D‑2‑羟基戊二酸脱氢酶和刃天青检测D‑2‑羟基戊二酸的方法,涉及酶法检测技术领域,该方法利用FAD依赖型D‑2‑羟基戊二酸脱氢酶、刃天青和PBS缓冲液,实现D‑2‑羟基戊二酸的检测;所述FAD依赖型D‑2‑羟基戊二酸脱氢酶为AX‑F‑D2HGDH蛋白或P‑D2HGDH蛋白;本发明的检测方法组成成分更加简单,成本更低,操作更为简便;由于无需添加辅因子、辅酶或心肌黄酶,因此引入的干扰少,灵敏度更高,并且仅需制备一种酶,无需添加外源辅因子NAD等,同时缓冲液可采用成本更低且易于获取的PBS缓冲液,因此成本更加低廉。

    一种酶法检测氧化三甲胺TMAO的方法及其应用

    公开(公告)号:CN108507984B

    公开(公告)日:2021-01-29

    申请号:CN201810166678.5

    申请日:2018-02-28

    IPC分类号: G01N21/64

    摘要: 本发明公开了一种酶法检测氧化三甲胺TMAO的方法及其应用,该检测方法利用TMAO脱甲基酶tdm、甲醛脱氢酶fadh、甲酸脱氢酶fdh和黄递酶的多酶组合体系,实现TMAO的荧光测定,该方法可用于开发TMAO检测试剂盒;本发明的酶法检测氧化三甲胺TMAO的方法克服了TMAO代谢途径中没有NAD依赖性脱氢酶参与,无法直接基于脱氢酶‑黄递酶耦合测定的缺点,通过tdm‑fadh‑fdh‑黄递酶多酶耦合,构建了荧光测定TMAO的体系,在该体系中,1个TMAO分子分解成两个荧光信号,灵敏度高,检测迅速稳定,重复性好,操作简便,成本较低。

    一种靶向PDL1的CAR嵌合受体的慢病毒载体及PDL1-CAR-T细胞

    公开(公告)号:CN110305906A

    公开(公告)日:2019-10-08

    申请号:CN201910650287.5

    申请日:2019-07-18

    发明人: 刘江 张文 唐东起

    摘要: 本发明公开了一种靶向PDL1的CAR嵌合受体的慢病毒载体质粒,包含以下编码序列:专门识别PDL1抗原的PD1蛋白的胞外域编码序列,人CD8铰链区编码序列、CD28跨膜区编码序列、人CD28胞内域编码序列和人CD3ζ编码序列;其编码序列为SEQ ID NO:1;本发明设计合成专门识别PD-L1抗原的PD1胞外域,连带其他CAR共有的铰链区、共刺激区域等得到靶向PD-L1的CAR嵌合受体的慢病毒,并将其感染T细胞,形成识别PD-L1的CAR-T细胞,而且PD-1/PD-L1结合后将会引起T细胞的激活和对肿瘤细胞的杀伤作用。

    一种含有不稳定结构域的CAR-T细胞及其制备方法和调节CAR-T细胞功能方法

    公开(公告)号:CN110079504A

    公开(公告)日:2019-08-02

    申请号:CN201910371296.0

    申请日:2019-05-06

    IPC分类号: C12N5/10 C12N15/62 C12N15/867

    摘要: 一种含有不稳定结构域的CAR-T细胞及其制备方法和调节CAR-T细胞功能方法,在CAR-T细胞中含有不稳定结构域的编码基因,并且去除终止密码子的CAR基因的3’端与不稳定结构域的编码基因直接连接,构成融合基因;在CAR-T细胞中表达上述融合基因编码的融合蛋白,该融合蛋白N端为CAR分子,C端为不稳定结构域,定位于细胞膜。本发明的含有不稳定结构域的CAR-T细胞的制备方法,流程少,步骤易于操作,便于实现产业化;本发明公开的调节含有不稳定结构域的CAR-T细胞功能的方法,只需加入不稳定结构域对应的小分子化合物即可调节CAR分子的数量,并且不稳定结构域的存在,不会影响CAR分子自身的功能。

    一种用于制备CAR-T的慢病毒载体及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN110055281A

    公开(公告)日:2019-07-26

    申请号:CN201910512556.1

    申请日:2019-06-13

    发明人: 张文 刘江 唐东起

    IPC分类号: C12N15/867 C12N7/01 C12N5/10

    摘要: 本发明公开了一种用于制备CAR-T的慢病毒载体质粒及其制备方法和用途,含有双启动子;酶切位点充足,易于插入基因;含有T2A序列,T2A序列能使连接的两个基因同时表达;本发明的用于制备CAR-T的慢病毒载体,酶切位点充足,组件丰富,易于改造,方便载体的构建;本发明的用于制备CAR-T的慢病毒载体应用广泛,可用于构建单CAR及多CAR、表达自杀基因或筛选基因等,也可用于构建表达细胞因子的第四代CAR,能满足CAR-T中慢病毒载体质粒同时表达多个基因的要求;利用该慢病毒载体包装的慢病毒滴度高,利用该慢病毒载体质粒制备的慢病毒感染T细胞的效率高,并且制备的CAR-T细胞具有较大的杀伤力。

    一种计及多种网络结构的配电网量测配置方法

    公开(公告)号:CN105958487B

    公开(公告)日:2018-05-01

    申请号:CN201610431772.X

    申请日:2016-06-15

    申请人: 山东大学

    发明人: 张文 王红

    IPC分类号: H02J3/00 G06Q10/04 G06Q50/06

    摘要: 本发明公开了一种计及多种网络结构的配电网量测配置方法,包括预估配电网的运行状态,确定量测量与状态量的关系;根据配电网实际的运行状态,在量测配置时构建多种不同状态下的网络结构;分析配电网系统在不同网络结构下的饱和量测特性,基于启发式算法确定饱和量测数量;在饱和量测数量为量测数量的安装数量上限的约束条件下,以多种网络结构估计误差的加权和最小为目标,构建量测配置模型;利用层次分析法求解量测配置模型的权重系数,遍历所有可选方案,求解最优解,输出最优量测配置方案。本发明以权重系数的方式分析了不同网络结构对量测配置的影响差异,量测配置结果更切实际。

    一种海洋裙式吸力式基础结构以及应用方法

    公开(公告)号:CN105804113B

    公开(公告)日:2018-02-09

    申请号:CN201610264494.3

    申请日:2016-04-26

    申请人: 山东大学

    IPC分类号: E02D27/52 E02D27/24 E02D15/08

    CPC分类号: E02B2017/0078

    摘要: 一种海洋裙式吸力式基础结构以及应用方法,所述新型海洋裙式吸力式基础结构包括下端开口的主桶和下端开口的桶裙,所述桶裙套设在主桶上,所述主桶上设置有排气孔Ⅰ,所述桶裙上设置有排气孔Ⅱ,所述主桶侧壁倾斜设置,所述桶裙侧壁垂直设置。本基础结构由外侧为桶壁垂直式吸力式基础和内侧为倾斜式吸力式基础组成的新型裙式吸力式基础结构,有效地增强了基础结构的稳定性。

    提高交直流系统静态电压稳定性的直流控制协调控制方法

    公开(公告)号:CN106655240A

    公开(公告)日:2017-05-10

    申请号:CN201710150410.8

    申请日:2017-03-14

    申请人: 山东大学

    发明人: 张文 谢季平 杨浩

    IPC分类号: H02J3/36

    CPC分类号: Y02E60/60 H02J3/36

    摘要: 本发明公开了提高交直流系统静态电压稳定性的直流控制协调控制方法,包括:当交直流系统逆变侧交流母线电压升高时,换流变压器的角度控制模块与逆变器定电压控制模块相配合,进而抑制直流系统无功吸收的增加;当交直流系统逆变侧交流母线电压降低时,逆变器定电压控制模块通过减小超前触发角γ来提高逆变器的功率因数;当定电压控制使得逆变器超前触发角γ低于设定值时,逆变器定电压控制将切换为定最小熄弧角γmin控制,使得逆变器功率因数能够保持在设定范围内。本发明逆变侧定电压控制下闭锁换流变压器的角度控制,充分发挥定电压控制在交流系统电压下降时通过调整触发角提高直流功率因数的能力。

    用于提高胀缩性土质大断面隧道钢拱架承载性能的装置

    公开(公告)号:CN104948207B

    公开(公告)日:2017-04-05

    申请号:CN201510279421.7

    申请日:2015-05-27

    申请人: 山东大学

    发明人: 武科 张文 吴昊天

    IPC分类号: E21D11/18

    摘要: 本发明专利公开了一种用于提高胀缩性土质大断面隧道钢拱架承载性能的装置,包括一个拱形支架,在所述的拱形支架的底部的大拱脚处布设有高强度圆形螺旋钢筋和刚性支座,所述的大拱脚结构包括上、下两层钢板,上、下两层钢板是由五根高强度圆形螺旋钢筋呈梅花桩型式相连接,且刚性支座穿过高强度螺旋钢筋;下层钢板布设五个支座插槽用于固定支座,以此保证钢拱架的整体稳定性。该装置不仅能够缓解胀缩性土质隧道开挖初期围岩沉降变形,而且能够有效地持久地提高隧道自稳能力,形成多功能围岩加固区域,保证隧道施工人员安全和设备的优点。