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公开(公告)号：CN113373135A
公开(公告)日：2021-09-10
申请号：CN202010114415.7
申请日：2020-02-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提及了一种D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶的突变体及其应用。将来源于Clostridium cellulolyticum的野生型DPEase通过定向进化获得一系列发酵酶活提高的突变体，本发明得到DPEase突变体H56Q的发酵酶活是野生型的1.61倍；并且突变体H56Q在55℃的半衰期较野生型的半衰期延长了87.5％，热稳定性得到提高，具有良好的工业应用潜力。
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公开(公告)号：CN113025603A
公开(公告)日：2021-06-25
申请号：CN202110239348.6
申请日：2021-03-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶储存稳定性的方法，属于食品工业领域。本发明提供了一种低成本、操作便捷的提高酶液储存稳定性的方法，通过向DPE酶液中加入甘油等小分子醇，Co2+等金属离子，可显著延长酶在低温或常温环境下的半衰期，且不会对后续酶转化反应造成负面影响。本发明通过20％甘油与0.5mM的Co2+的组合可将25℃下粗酶半衰期延长至80d，为DPE的工业化应用提供了技术支撑。
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公开(公告)号：CN118291495A
公开(公告)日：2024-07-05
申请号：CN202410240301.5
申请日：2024-03-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种原核细菌基因组连续随机转座整合系统的构建，属于生物工程技术领域。该系统利用Mariner家族转座子，由单质粒或双质粒实现转座功能，通过诱导型启动子控制转座酶的表达，使得该系统的转座过程受到诱导剂调控，可将特定DNA序列随机整合至宿主的基因组中，并通过随机引物PCR鉴定插入位点。该系统可用于实现外源蛋白在原核细菌基因组中的整合表达，结合高通量筛选技术，在原核细菌功能基因的挖掘以及基因随机敲除文库构建等方面有着应用前景。
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公开(公告)号：CN115011622B
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202110254391.X
申请日：2021-03-05
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/65 , C12N15/61 , C12N15/10 , C12N1/21 , C12N9/90 , C12P19/24 , C12P19/02 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体的筛选方法及其应用，属于酶工程技术领域。本发明筛选方法的筛选通量可以达到108/天，有效提高了DPEase突变体的筛选效率。通过定向进化Clostridium cellulolyticum来源的DPEase获得比活提高的突变体，当第206位甘氨酸或第207位组氨酸发生突变时，其比活是野生型的1.03‑1.83倍，具有极高的工业应用潜力。
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公开(公告)号：CN113025603B
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202110239348.6
申请日：2021-03-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶储存稳定性的方法，属于食品工业领域。本发明提供了一种低成本、操作便捷的提高酶液储存稳定性的方法，通过向DPE酶液中加入甘油等小分子醇，Co2+等金属离子，可显著延长酶在低温或常温环境下的半衰期，且不会对后续酶转化反应造成负面影响。本发明通过20％甘油与0.5mM的Co2+的组合可将25℃下粗酶半衰期延长至80d，为DPE的工业化应用提供了技术支撑。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112159478B
公开(公告)日：2023-02-24
申请号：CN202011040885.X
申请日：2020-09-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种融合蛋白及其在降解聚合物中的应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种降解效果好的可降解聚对苯二甲酸乙二醇酯等聚合物的融合蛋白，此融合蛋白由角质酶、连接肽和碳水化合物结合组件依次相连而得，使用此融合蛋白降解PET膜，降解4d，即可使PET降解产物中苯二甲酸(TPA)的含量高达116.83mg/L，而使用等酶活的未融合角质酶在同等条件下降解PET膜，降解产物中未检测到苯二甲酸(TPA)，并且，使用此融合蛋白降解聚丙烯酸酯的降解率较未融合角质酶提高了36％。
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公开(公告)号：CN115029363B
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202110254263.5
申请日：2021-03-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种体内连续定向进化系统及其应用，属于基因工程和酶工程领域。该系统包括携带随机突变模块MP、程序化死亡模块TAS以及目的基因表达模块TP的大肠杆菌宿主菌。模块间通过相互偶联，最终实现对宿主菌中目的基因的高效进化以及筛选。该系统具有较好的实用价值，可应用于多种不同功能型蛋白质的定向进化。
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公开(公告)号：CN116536391A
公开(公告)日：2023-08-04
申请号：CN202310605916.9
申请日：2023-05-26
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种D‑果糖及稀少糖的高通量检测方法，属于生物技术领域。本专利聚焦于D‑果糖到D‑阿洛酮糖或D‑塔格糖生物合成过程中产生的混合糖体系，通过活性干酵母特异性的代谢消耗D‑果糖，进而通过间苯二酚法测定反应体系中的D‑阿洛酮糖或D‑塔格糖。本专利的检测方法便捷高效，并且成本低。将上述方法应用于高通量筛选稀少糖制备关键酶，筛选出热稳定性和比活力提高的D‑塔格糖4‑差向异构酶突变体，与野生型相比，突变体I430P的热稳定性提高了1.83倍，G90S/T272A/I430P突变体比活力提高了21.4％。
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公开(公告)号：CN112725302A
公开(公告)日：2021-04-30
申请号：CN202110054918.4
申请日：2021-01-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种融合蛋白的构建及其降解聚合物的方法和应用，属于酶工程技术领域。本发明将角质酶和锚定肽通过连接肽融合得到融合角质酶，提高了角质酶对聚合物模式底物的处理效果；利用本发明的方法，用融合蛋白酶液处理模式底物PEA和PVAc，和等量的角质酶相比降解效率分别提高了24％～210.7％和83.8～503.8％，具备良好的工业前景。
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公开(公告)号：CN112159478A
公开(公告)日：2021-01-01
申请号：CN202011040885.X
申请日：2020-09-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种融合蛋白及其在降解聚合物中的应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种降解效果好的可降解聚对苯二甲酸乙二醇酯等聚合物的融合蛋白，此融合蛋白由角质酶、连接肽和碳水化合物结合组件依次相连而得，使用此融合蛋白降解PET膜，降解4d，即可使PET降解产物中苯二甲酸(TPA)的含量高达116.83mg/L，而使用等酶活的未融合角质酶在同等条件下降解PET膜，降解产物中未检测到苯二甲酸(TPA)，并且，使用此融合蛋白降解聚丙烯酸酯的降解率较未融合角质酶提高了36％。
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