公开(公告)号：CN104543404A

公开(公告)日：2015-04-29

申请号：CN201510030943.3

申请日：2015-01-17

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 张志刚 ,  吕占军 ,  葛俊伟 ,  谭敩 ,  姜惠洁 ,  姜婧 ,  陈雁 ,  张海莉 ,  于洪祥 ,  杨大千 ,  黄洁

IPC: A23K1/16

Abstract: 本发明公开了一种去除兽药残留的天然化合物饲料添加剂，按重量份配比如下：原花青素、虾青素、白藜芦醇、姜黄素、大蒜素、紫菜多糖、紫菜多酚、藻胆蛋白、茶多酚、槲皮素、壳聚糖和橘皮素各取1份，使用时，饲料添加剂与饲料的比例为1∶100-1∶500。本发明可有效的降低畜或禽体内的替米考星、氟苯尼考、头孢噻呋钠、苯丙咪唑、恩诺沙星、硫酸庆大霉素、土霉素、磺胺二甲氧嘧啶和氢溴酸常山酮的残留，且具有无污染、无公害的特点，可用于经兽药使用和环境污染等因素所致兽药残留超标的食品动物去除兽药残留，进而保障动物性食品卫生安全。

公开(公告)号：CN102732502A

公开(公告)日：2012-10-17

申请号：CN201210180721.6

申请日：2012-06-04

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 李一经 ,  崔红玉 ,  葛俊伟

IPC: C12N15/09 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  C12R1/225

Abstract: 本发明公开了一种无选择标记残留的乳酸菌基因组修饰操作系统及其应用，属于生物技术领域。具体地，本发明提供的载体系统包括：一个温度敏感型、大肠杆菌-革兰氏阳性细菌宽宿主范围穿梭型辅助质粒；一个用于构建温度敏感型、大肠杆菌-革兰氏阳性细菌宽宿主范围穿梭型基因打靶主质粒的中间质粒；一个经过以上二者所构建的用于任意位点基因修饰操作的基础乳酸菌菌株。本发明所提供的无选择标记残留的快速双质粒基因打靶载体系统可以获取任意位点基因缺失或插入的转基因重组乳酸菌，所产生的转基因乳酸菌或重组基因工程乳酸菌在益生菌开发和基因工程益生菌制剂的研究和应用中具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN100567477C

公开(公告)日：2009-12-09

申请号：CN200710089251.1

申请日：2007-03-16

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 唐丽杰 ,  李一经 ,  葛俊伟 ,  欧笛

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/33 ,  C12N15/09 ,  C07H21/04 ,  C12N15/74 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明提供的是一种表达猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteristisvirus，TGEV)纤突S蛋白的重组乳酸乳球菌的方法。根据猪传染性胃肠炎病毒S蛋白的全基因序列及表达载体质粒的基因融合特点，设计一对引物，进行PCR，获得含有TGEV S基因4个主要抗原位点的2007bp目的片段，将其与分泌表达的载体质粒pNZ8112进行连接，通过电转化进入宿主菌乳酸乳球菌NZ9000细胞内，在乳链菌肽的诱导下进行表达。本发明中构建了冠状病毒TGEV S蛋白乳酸乳球菌表达载体系统，表达了含有TGEV S蛋白A、B、C、D四个主要抗原位点的约66KDa的目的蛋白，免疫印迹实验和间接免疫荧光试验均表明，所表达的外源蛋白能够与TGEV免疫血清发生反应，表明重组S蛋白与TGEV天然抗原一样具有相同的抗原性。

公开(公告)号：CN101368167A

公开(公告)日：2009-02-18

申请号：CN200810137276.9

申请日：2008-10-09

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 李一经 ,  唐丽杰 ,  徐义刚 ,  葛俊伟

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/62 ,  C12N15/74 ,  A61K39/295 ,  A61K39/187 ,  A61K39/12 ,  A61P31/14 ,  A61P31/20 ,  C12R1/245

Abstract: 共表达猪瘟病毒T细胞表位与猪细小病毒VP2蛋白的重组干酪乳杆菌及其制备方法，它涉及一种共表达猪瘟病毒T细胞表位与猪细小病毒VP2蛋白的重组菌及其制备方法。共表达猪瘟病毒T细胞表位与猪细小病毒VP2蛋白的重组干酪乳杆菌为重组载体质粒pPG－2－VP2－E290转化的干酪乳杆菌。制备方法：一、PCR扩增VP2－E290基因；二、得到重组载体质粒；三、电转化干酪乳杆菌；四、诱导。本发明共表达猪瘟病毒T细胞表位与猪细小病毒VP2蛋白的重组干酪乳杆菌可作为多价、多联，同时防治猪细小病毒和猪瘟的口服疫苗。本发明针对病毒经黏膜感染的特点，能有效的刺激黏膜免疫系统产生局部免疫应答，进而引起全身性系统免疫反应的疫苗。

公开(公告)号：CN101058798A

公开(公告)日：2007-10-24

申请号：CN200710089251.1

申请日：2007-03-16

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 唐丽杰 ,  李一经 ,  葛俊伟 ,  欧笛

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/33 ,  C12N15/09 ,  C07H21/04 ,  C12N15/74 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明提供的是一种表达猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteristisvirus，TGEV)纤突S蛋白的重组乳酸乳球菌的方法。根据猪传染性胃肠炎病毒S蛋白的全基因序列及表达载体质粒的基因融合特点，设计一对引物，进行PCR，获得含有TGEV S基因4个主要抗原位点的2007bp目的片段，将其与分泌表达的载体质粒pNZ8112进行连接，通过电转化进入宿主菌乳酸乳球菌NZ9000细胞内，在乳链菌肽的诱导下进行表达。本发明中构建了冠状病毒TGEV S蛋白乳酸乳球菌表达载体系统，表达了含有TGEV S蛋白A、B、C、D四个主要抗原位点的约66KDa的目的蛋白，免疫印迹实验和间接免疫荧光试验均表明，所表达的外源蛋白能够与TGEV免疫血清发生反应，表明重组S蛋白与TGEV天然抗原一样具有相同的抗原性。