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公开(公告)号：CN103131723B
公开(公告)日：2015-04-08
申请号：CN201310037264.X
申请日：2013-01-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于牛基因组位点特异性重组的RNA干扰载体及其构建方法和应用，属于生物技术领域。本发明的干扰载体依次包括以下相连的各部分：HSV-TK表达元件、用于载体线性化的酶切位点、与牛的scaffold序列上游进行同源重组的同源重组臂1、人U6启动子序列、多克隆酶切位点、人U6终止子序列、含有PCMV启动子的新霉素抗性基因、与牛的scaffold基因下游进行同源重组的同源重组臂2、复制起始位点基因及氨苄青霉素抗性筛选基因。本发明的干扰载体实现了对牛源细胞基因组的精确打靶，并为筛选提供了方便，插入位点以及插入片段不影响染色体整体结构，不对基因组造成非研究性基因表达的影响，为研究提供了便利。
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公开(公告)号：CN102675471B
公开(公告)日：2013-11-27
申请号：CN201210130997.3
申请日：2012-04-28
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/63 , C12N1/15 , C12N1/19 , C12N1/21 , C12N5/10 , A61K39/135 , A61K48/00 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种猪口蹄疫病毒O型广谱多表位重组抗原及其应用，属于生物疫苗领域。本发明采用“抗原化抗体”策略，将猪口蹄疫病毒O型的多个毒株的主要抗原表位进行合理串联后，与猪IgG重链恒定区偶联构建得到一种猪口蹄疫病毒O型广谱多表位重组抗原，经Bio-Rad蛋白定量试剂盒定量后与重组口蹄疫病毒3D蛋白配伍制备疫苗，动物免疫试验结果显示，该疫苗单独使用或与重组口蹄疫病毒3D蛋白配伍后都能够刺激机体产生高效价的保护性抗体，抗体水平高于国家标准，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN103131723A
公开(公告)日：2013-06-05
申请号：CN201310037264.X
申请日：2013-01-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于牛基因组位点特异性重组的RNA干扰载体及其构建方法和应用，属于生物技术领域。本发明的干扰载体依次包括以下相连的各部分：HSV-TK表达元件、用于载体线性化的酶切位点、与牛的scaffold序列上游进行同源重组的同源重组臂1、人U6启动子序列、多克隆酶切位点、人U6终止子序列、含有PCMV启动子的新霉素抗性基因、与牛的scaffold基因下游进行同源重组的同源重组臂2、复制起始位点基因及氨苄青霉素抗性筛选基因。本发明的干扰载体实现了对牛源细胞基因组的精确打靶，并为筛选提供了方便，插入位点以及插入片段不影响染色体整体结构，不对基因组造成非研究性基因表达的影响，为研究提供了便利。
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公开(公告)号：CN119574864A
公开(公告)日：2025-03-07
申请号：CN202411562498.0
申请日：2024-11-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N21/76 , G01N33/577 , C07K19/00 , C12N15/85
Abstract: 本发明公开了一种基于化学发光法定量检测非洲猪瘟病毒的试剂盒及其应用。本发明属于病毒检测技术领域。所述的试剂盒包括包被抗非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体2‑1B3G3的化学发光板、融合蛋白16‑5E7E8‑HiBiT、LgBiT和furimazine化合物；其中，所述的融合蛋白16‑5E7E8‑HiBiT是将抗非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体16‑5E7E8的轻链、linker、HiBiT、P2A和16‑5E7E8的重链依次连接后得到，所述的融合蛋白16‑5E7E8‑HiBiT的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明所述的试剂盒具有高灵敏度和宽的线性范围，p30蛋白的检测限为15pg/mL，ASFV的检测限为12.2HAD50。此外，该试剂盒能够定量检测ASFV感染猪的组织、血液以及鼻拭子中ASFVp30含量，在ASFV病原检测中具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN117761315A
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202311775983.1
申请日：2023-12-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/577 , G01N21/76 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及单克隆抗体技术领域，尤其涉及化学发光相加法在制备识别不同表位单克隆抗体中的应用。基于化学发光免疫分析(CLIA)的高灵敏度、宽的线性范围，本发明将化学发光应用于单克隆抗体分类中，建立化学发光相加法。化学发光相加法是一种简便快速将抗体进行分类的方法，为制备识别不同表位的单抗提供了一种新方法，该方法能够避免制备同一种单抗，从而大大降低了制备识别不同表位单抗的成本，节省了科研人员的时间和精力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116840475A
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202310784386.9
申请日：2023-06-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/535
Abstract: 本发明涉及夹心阻断ELISA试剂在制备口蹄疫病毒抗体检测试剂盒中的应用，属于生物技术领域，本发明将阴阳性血清及被检血清直接在已包被捕获抗体的ELISA板上稀释后紧接着加入酶标抗体，最后加入病毒抗原，同时设置病毒抗原对照，被检血清及阴阳性血清中口蹄疫型特异抗体阻断病毒抗原参与酶标单抗与ELISA板上的捕获抗体的双抗夹心ELISA反应的进行，判定参照液相阻断ELISA，以病毒抗原对照孔OD值平均值的50%作为病毒抗原被50%阻断的临界值，成功建立阻断夹心ELISA方法，也称为液相阻断ELISA一步法，可用于定性、定量检测口蹄疫抗体，为口蹄疫疫苗免疫抗体监测、疫苗免疫效果评估等方面提供新的技术支持。
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公开(公告)号：CN114437236B
公开(公告)日：2023-06-27
申请号：CN202210024635.X
申请日：2022-01-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K19/00 , C07K14/01 , C12N15/70 , C12N1/21 , A61K39/12 , A61K39/39 , A61K47/65 , A61P31/20 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一种重组非洲猪瘟病毒多表位融合蛋白、制备及其应用，属于生物技术制药领域，该重组蛋白是将编码非洲猪瘟病毒p72的4个抗原表位和pE248R的N段氨基酸序列的重组表达质粒转入大肠杆菌，经诱导表达和纯化后获得。所述重组非洲猪瘟病毒多抗原表位融合蛋白具有通式：p72抗原表位1‑(Linker)n‑p72抗原表位2‑(Linker)n‑p72抗原表位3‑(Linker)n‑p72抗原表位4‑(Linker)n‑pE248R的N段氨基酸序列。该重组蛋白表达量高且能够被非洲猪瘟病毒阳性血清识别。利用该重组蛋白制备的疫苗免疫动物可激发机体产生高水平的特异性抗体以及细胞免疫应答，可用于非洲猪瘟亚单位疫苗的制备。
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公开(公告)号：CN116199789A
公开(公告)日：2023-06-02
申请号：CN202211735147.6
申请日：2022-12-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种O型、A型口蹄疫多表位二价病毒样颗粒抗原及其制备方法和应用。所述的病毒样颗粒(VLP)抗原是将A型、O型口蹄疫多表位抗原序列分别融合至噬菌体AP205的N端和C端后得到的。用该VLP抗原与ISA206VG佐剂配伍试制的疫苗免疫动物后能够诱导高水平的保护性抗体，免疫动物能够抵抗O型和A型口蹄疫病毒攻击，均100％(5/5)保护。本发明通过只生产一种抗原即可预防O型、A型口蹄疫两个血清型，实现了“一针防两病”的目的，解决企业最为关心的生产工艺和成本问题。因此，该疫苗可以说是一种具有广阔前景的新型疫苗，将对我国净化和根除O型、A型口蹄疫，实现免疫无口蹄疫地位具有十分重要的意义。
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公开(公告)号：CN113150171B
公开(公告)日：2023-05-16
申请号：CN202110446849.1
申请日：2021-04-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及含分子内佐剂的非洲猪瘟病毒重组蛋白、表达载体及应用，属于生物技术制药领域，所述重组蛋白由非洲猪瘟病毒p30和mp54(修饰的p54)与铜绿假单胞菌的外膜蛋白I融合而成。所述的重组蛋白具有通式：OprI‑(Linker)n‑p30‑(Linker)n‑mp54。其中，所述连接肽Linker序列选自GGGGS或GGSGG，优选为GGGGS；n为1、2、3或4，优选为3。实验证明，该重组蛋白能够显著促进树突状细胞的成熟与分化及细胞因子的分泌。利用本发明重组蛋白制备的疫苗免疫动物可激发机体产生产生高水平的中和抗体以及细胞免疫应答，可用于非洲猪瘟病毒诊断试剂、预防或治疗性药物的制备。
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公开(公告)号：CN116041547A
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202211739856.1
申请日：2022-12-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种O型口蹄疫病毒多表位病毒样颗粒抗原及其制备方法和应用。所述的O型口蹄疫病毒多表位病毒样颗粒抗原是选取O型口蹄疫病毒5个拓扑型的代表毒株O/Tibet/CHA/99，O/Mya98/BY/2010，O/HN/CHA/93、O/XJPS/CHA/2017和Cathay的抗原表位依次顺序串联后与SpyCather和噬菌体AP205基因串联，然后再与前4个毒株的表位串联，形成的重组抗原蛋白，该重组蛋白能够自组装成VLP抗原。免疫学试验结果显示，该VLP抗原具有良好的抗原性，其与O型口蹄疫病毒的抗原反应性没有明显的差异，可替代口蹄疫病毒灭活抗原建立检测方法。利用该VLP抗原制成的疫苗不仅能诱导产生高水平的保护性抗体，而且能保护免疫动物抵抗病毒攻击。且不受动物种属限制，对猪牛羊O型口蹄疫均有免疫保护作用。
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