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公开(公告)号:CN103969435A
公开(公告)日:2014-08-06
申请号:CN201410244271.1
申请日:2014-06-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/535
CPC classification number: G01N33/56983 , G01N33/54393 , G01N2333/185
Abstract: 本发明涉及一种检测牛流行热病毒(bovineephemeralfevervirus,BEFV)血清抗体的间接ELISA试剂盒,以及试剂盒中所用的BEFV重组抗原的制备方法和这种重组抗原。这种重组蛋白仅与BEFV抗体发生反应,而不与其它同属或同科病毒的抗体发生交叉反应,具有极高的特异性;重组蛋白还具有良好的反应敏感性。另外,试剂盒重复性良好,与病毒中和试验具有较高的符合率,保存期长。试剂盒操作时技术要求比较宽松,可在生产中广泛推广使用,应用于BEFV流行病学调查和免疫水平监测。
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公开(公告)号:CN102657864B
公开(公告)日:2014-01-01
申请号:CN201210131845.5
申请日:2012-04-28
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K39/39 , A61K39/135 , A61P31/14 , C07K14/00 , C12N15/11 , C12N15/63 , C12N1/15 , C12N1/19 , C12N1/21
Abstract: 本发明公开了一种口蹄疫疫苗的免疫佐剂及其应用,属于生物疫苗领域。本发明的一种免疫佐剂为口蹄疫病毒3D蛋白片段。实验证明,表达的3D蛋白片段与抗原配伍后免疫动物,能够加强多表位抗原的免疫原性,产生高水平的保护性中和抗体。体外刺激实验显示,口蹄疫病毒3D蛋白片段单独或与多表位抗原配伍后能够发生淋巴细胞增殖反应,说明本发明的免疫佐剂不仅能够增强免疫反应,并且可用于区分感染和免疫动物,是一种很好的免疫刺激剂和疫苗分子标记。
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公开(公告)号:CN101775399B
公开(公告)日:2012-09-05
申请号:CN201010122010.4
申请日:2010-03-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了牛口蹄疫病毒Asia1型多表位重组疫苗及其制备方法。该重组疫苗包括以下组分:口蹄疫病毒多表位基因和载体蛋白的融合基因所编码的蛋白以及口蹄疫病毒3D蛋白;其制备方法包括:分别将口蹄疫病毒多表位基因和载体蛋白的融合基因所表达蛋白和口蹄疫病毒3D蛋白稀释后,混和均匀,加入佐剂,乳化,即得。动物模型和动物免疫效力实验表明,本发明牛Asia1表位重组疫苗能产生全面的免疫保护反应,注射免疫牛和豚鼠均能诱导产生高水平的中和抗体,同时也能诱导细胞免疫应答,说明本发明重组疫苗能有效保护动物抵抗口蹄疫病毒强毒攻击。
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公开(公告)号:CN119320436A
公开(公告)日:2025-01-17
申请号:CN202411474710.8
申请日:2024-10-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K14/18 , C07K19/00 , C12N15/40 , C12N15/62 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种牛病毒性腹泻病毒NS2截短蛋白及在BVDV抗体检测中的应用。本发明首先提供了一种BVDV NS2蛋白的截短蛋白,所述截短蛋白分别与谷胱甘肽S移换酶(GST)和辣根过氧化物酶(HRP)融合后可溶性表达,且与BVDV抗体阳性血清具有较好的反应原性,与BVDV抗体阴性血清不发生反应,可用于BVDV抗体检测;其次,本发明以GST与所述截短蛋白的融合蛋白为包被抗原,以HRP与所述截短蛋白的融合蛋白为检测抗原,构建了BVDV抗体检测的双抗原夹心ELISA方法,所述方法具有敏感性高、特异性好、操作简便、易于推广、成本低等技术优点,可适用用于牛群中BVDV抗体的筛查。
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公开(公告)号:CN118147026A
公开(公告)日:2024-06-07
申请号:CN202410171537.8
申请日:2024-02-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明公开了一种用于原核表达系统的自诱导培养基及其应用。所述的自诱导培养基中含有胰蛋白胨5g~20g,酵母粉5g~20g,甘油3g~9g,葡萄糖0.3g~0.9g,乳糖1~4g,KH2PO43.4g/L,Na2HPO4‑7H2O 3.35g/L,NH4Cl 2.68g/L,Na2SO40.71g/L,MgSO40.493g/L以及微量元素,所述的微量元素含有50mM FeCl3,20mM CaCl2,10mM MnCl2,10mM ZnSO4,2mM CoCl2,2mM CuCl2,2mM NiCl2,2mM Na2MoO4,2mM Na2SeO3以及2mM H3BO3。研究结果显示,所述的自诱导培养基,通过阶梯温度调控策略,能够显著提高抗原的可溶性量,同等条件下抗原产量是普通LB培养基的6倍多,生产每毫克抗原所需成本仅为普通LB培养基的20%左右,大大实现了降本增效的目的。
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公开(公告)号:CN117534734A
公开(公告)日:2024-02-09
申请号:CN202311779320.7
申请日:2023-12-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/01 , C07K19/00 , C12N15/34 , C12N15/70 , C12N1/21 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/12 , A61P31/20 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种非洲猪瘟病毒p30蛋白优势抗原表位区及其应用。本发明以大肠杆菌表达的非洲猪瘟病毒p30蛋白为免疫原,免疫小鼠,利用传统的杂交瘤技术制备了20株针对p30蛋白的单克隆抗体;通过使用一系列重叠肽和丙氨酸突变的重组蛋白鉴定出这20株单抗识别的表位,获得了一种非洲猪瘟病毒p30蛋白抗原表位区;相较于目前已经报道的p30蛋白表位肽,本申请所述的非洲猪瘟病毒p30蛋白抗原表位区与非洲猪瘟阳性血清具有较强的反应性,为p30蛋白优势抗原表位区,为非洲猪瘟检测试剂盒、非洲猪瘟新型疫苗的研发提供物质基础和技术支撑。
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公开(公告)号:CN117281894A
公开(公告)日:2023-12-26
申请号:CN202311271332.9
申请日:2023-09-28
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒活载体疫苗及其制备方法和应用。所述的非洲猪瘟病毒活载体疫苗中包含表达非洲猪瘟病毒p72基因的重组水泡性口炎病毒或表达p30与p54融合基因的重组水泡性口炎病毒中的至少一种或二者的组合。本发明构建的非洲猪瘟病毒活载体疫苗不仅能在BHK‑21细胞中稳定遗传、具有与病毒载体同样的生长特异性,能在BHK‑21细胞内表达靶标蛋白。更为重要的是,免疫后特异性抗体持续升高,几乎无“免疫窗口期”关键问题,而且免疫血清能够诱导产生中和抗体,疫苗也能够诱导强烈的细胞免疫应答反应,两种疫苗免疫效果更为显著。因此,本发明构建的非洲猪瘟病毒活载体疫苗是一种非常具有应用前景的疫苗。
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公开(公告)号:CN109913569B
公开(公告)日:2022-05-27
申请号:CN201910296143.4
申请日:2019-04-12
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 王锦明 , 关贵全 , 牛庆丽 , 刘军龙 , 任巧云 , 李有全 , 刘爱红 , 刘志杰 , 殷宏 , 罗建勋 , 刘光远 , 杨吉飞 , 陈泽 , 田占成 , 独军政 , 高闪电
IPC: C12Q1/6893 , C12Q1/6804 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种检测羊泰勒虫病的扩增引物组、试剂盒及使用方法。本发明的羊泰勒虫病的检测试剂盒包括用于恒温扩增的一对置换引物SEQ ID No.1和SEQ ID No.2、一条交叉引物SEQ ID No.3、分别用FITC和生物素标记的探针引物SEQ ID No.4和SEQ ID No.5,以扩增所需常规试剂和层析试纸条。本发明引物、试剂盒及所建立的检测方法具有操作简便、结果直观可见、无需特殊仪器、特异性好、灵敏度高,适合基层临床样品的现场快速检测和流行病学调查,易于大规模推广使用。
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公开(公告)号:CN111454989B
公开(公告)日:2022-03-08
申请号:CN202010261589.6
申请日:2020-04-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种嵌合型基因I型乙型脑炎病毒病毒样颗粒疫苗及其制备方法和应用,属于生物技术领域。本发明的嵌合型病毒样颗粒为基于基因I型乙型脑炎病毒病毒样颗粒的重组猪瘟病毒中和表位嵌合抗原蛋白,编码该病毒样颗粒的DNA片段的核苷酸序列如SEQ#ID#NO.1所示,其氨基酸序列如SEQ#ID#NO.2所示;将SEQ#ID#NO.1所示DNA片段克隆到真核表达载体pVAX1中构建重组表达质粒;将重组表达质粒转染BHK‑21细胞,收集转染细胞的细胞培养上清,浓缩纯化后获得递呈猪瘟病毒中和抗原表位的嵌合型基因I型乙型脑炎病毒病毒样颗粒。本发明的病毒样颗粒能诱导机体产生特异性体液和细胞免疫应答,可用于猪场猪瘟病毒和流行性乙型脑炎病毒感染的免疫预防,用于制备猪瘟病毒和流行性乙型脑炎病毒疫苗。
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公开(公告)号:CN110016514A
公开(公告)日:2019-07-16
申请号:CN201910295761.7
申请日:2019-04-12
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 王锦明 , 关贵全 , 高闪电 , 刘军龙 , 李有全 , 刘爱红 , 刘志杰 , 殷宏 , 罗建勋 , 刘光远 , 杨吉飞 , 牛庆丽 , 任巧云 , 陈泽 , 田占成 , 独军政
IPC: C12Q1/6893 , C12N15/11 , C12Q1/6844 , C12Q1/6804
Abstract: 本发明公开一种马梨形虫检测的试剂盒及使用方法。本发明的检测马梨形虫的外围置换引物基因序列为:SEQ ID No.1和SEQ ID No.2,还包含有交叉引物SEQ ID No.3、用FITC标记的探针引物SEQ ID No.4和生物素标记的探针引物SEQ ID No.5,以及用于扩增产物检测的免疫层析试纸条。本发明具有检测耗时间短、仪器要求低、操作方法简便的优点。
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