公开(公告)号：CN102199597B

公开(公告)日：2013-06-26

申请号：CN201110063597.0

申请日：2011-03-09

申请人： 中国海洋大学

发明人： 陈军 ,  李琪 ,  孔令锋

IPC分类号： C12N15/11

摘要： 一种双壳贝类线粒体COI基因序列扩增引物的筛选方法，其特征是a、登陆美国国立生物技术信息中心，下载双壳贝类的线粒体全序列；b、将下载的序列用BioEdit比对分析，确定其保守区域；c、在保守区域内用Primer Premier 5设计多对引物并合成；d、提取双壳贝类DNA，将合成的引物在相应反应体系下进行PCR扩增；e、进行电泳检测，筛选出扩增效率高的一组步移鸡尾引物，此组步移鸡尾引物由三条正向引物和三条反向引物组成。采用本发明的双壳贝类线粒体COI引物，可以有效的扩增出双壳贝类不同物种的目的片段，对基于COI序列的双壳贝类物种分类鉴定和质资源保护、养殖业发展及渔业资源管理等都具有极其重要的意义。

公开(公告)号：CN103070111A

公开(公告)日：2013-05-01

申请号：CN201210596447.0

申请日：2012-12-28

申请人： 中国海洋大学

发明人： 于瑞海 ,  李琪 ,  孔静 ,  张玮

IPC分类号： A01K61/00

CPC分类号： Y02A40/81

摘要： 一种刺参池塘养殖方法，其特征是首先是平整养参池塘底部，然后在养参池布设聚乙烯筛网附着基，该附着基是有一由80-100目的聚乙烯筛网做成宽为0.4-0.5米，筛网长度可根据刺参池塘的长度或宽度而定，每隔1.2-1.5米，用直径为20-30毫米，长度为0.5-0.8米的竹竿把筛网支撑成波浪形，峰底用装有2.0-3.0kg砂的砂袋固定于池底上，筛网之间的间隔为0.3-0.4米，再加入海水，进行15-20天的底栖硅藻培养后；放入大小30-50头/kg参苗，这样刺参就可以在筛网参礁上生长发育。本发明能大幅度降低刺参养殖成本，其成本仅为现有石头参礁的6-8％，扩大了可养殖刺参的范围。同时，也便于收参和定期清底除污。

公开(公告)号：CN102388825B

公开(公告)日：2013-04-10

申请号：CN201110258863.5

申请日：2011-08-26

申请人： 中国海洋大学

发明人： 于瑞海 ,  李琪 ,  王昌勃 ,  刘剑

IPC分类号： A01K61/00

CPC分类号： Y02A40/81

摘要： 一种脉红螺人工育苗中稚螺的培育方法，其特征是先将全部附着变态成的脉红螺稚螺按10-15万个/m2的密度布池培育，然后选择成熟和即将成熟的牡蛎，将该牡蛎人工解剖、镜检辨别雌、雄，分别获得精子、卵子，人工授精获得受精卵，再将所得受精卵均匀地投入附着稚螺的培育池中，受精卵密度为5-6个/ml，定期充气和搅动，使受精卵均匀地沉于聚乙烯波纹板上，附着的稚螺摄食沉于附着板上的受精卵，10-12小时后再把附有稚螺的附着板及框进行颠倒1次，1-2天后移入新池再投入受精卵，长到3-4mm后，改投鲜活的小型低值贝类。本发明的培育方法能克服脉红螺室内人工育苗因饵料转化困难、投喂肉食性鱼糜污染水质引起的成活率低，出苗量低的问题。

公开(公告)号：CN102827839A

公开(公告)日：2012-12-19

申请号：CN201210332088.8

申请日：2012-09-04

申请人： 中国海洋大学

发明人： 于贞贞 ,  李琪 ,  孔令锋

IPC分类号： C12N15/11

摘要： 本发明利用通用引物扩增得到的66条鸟蛤科mtCOI序列，通过CLUSTALW软件比对分析，在确定的保守区域用引物设计软件Primer Premier5设计5对引物，用216个鸟蛤科个体在10μl体系下重复进行PCR反应试验，最后经琼脂糖凝胶电泳检测，筛选出一种鸟蛤科贝类线粒体COI基因序列高效扩增引物，其特征是：NGF5’-ACAAATCATAAAGATATTGG-3’NGR5’-TTCAGGGTGTCCGAAGAATCA-3’采用本发明的鸟蛤科贝类线粒体COI引物，可以有效地扩增出鸟蛤科贝类不同物种的目的片段，能够满足鸟蛤遗传多样性研究的需要，同时也能为种质资源保护、养殖业发展提供可靠的分子技术指导。

公开(公告)号：CN102669021A

公开(公告)日：2012-09-19

申请号：CN201210132491.6

申请日：2012-05-01

申请人： 中国海洋大学

发明人： 郑小东 ,  刘畅 ,  刘兆胜 ,  王培春 ,  钱耀森 ,  李琪

IPC分类号： A01K61/00 ,  A01K63/00 ,  A23K1/18

CPC分类号： Y02A40/81

摘要： 本发明公开了一种长蛸暂养、产卵和护卵的方法及所用装置，所述的方法包括有1)亲体的选择、2)亲体暂养促熟和3)亲体护卵步骤；且采用特殊设计的蛸巢。本发明的方法操作简单，所用装置陈本低、利用率高，能有效提高长蛸亲体的成活率、产卵量及受精卵的孵化率和幼苗的健康程度。并且本发明的蛸巢模拟长蛸自然巢穴结构，更适合亲蛸的隐蔽、拒敌及产卵、护卵等行为，而且蛸巢制作简单，使用方便，利用率高，是一种投资少、效果好的长蛸蛸巢。

公开(公告)号：CN102124970B

公开(公告)日：2012-09-19

申请号：CN201110023332.8

申请日：2011-01-21

申请人： 中国海洋大学

发明人： 郑小东 ,  刘兆胜 ,  刘永胜 ,  林祥志 ,  于瑞海 ,  李琪

IPC分类号： A01K61/00 ,  A01K63/02

CPC分类号： Y02A40/81

摘要： 本发明涉及一种真蛸采捕运输方法及所用装置，其特征在于首先用鹑螺网捕捞真蛸，然后将真蛸单独放置在容器中运输，运输用的海水水温为10～16℃，盐度为25～28‰，并添加0.015～0.02g/ml的MgCl2麻醉。所用到的运输容器包括前端开口和底部，以及连接中间筒体的前端侧壁和后端侧壁，且设有用于水体交换用的通孔。本发明的运输容器避免了个体间相互争斗，降低死亡率和损伤率；容器上的通孔有效提高了水流交换；并且前端和底部的螺纹结构实现了装置的组合拆分，充分利用运输空间，大大提高了运输密度。运输时采用低温麻醉处理，有效降低了真蛸的活动能力和喷墨现象。本发明的方法能够实现真蛸长时间、远距离和高密度运输，为苗种繁育和大规模增殖放流修复资源提供条件。

公开(公告)号：CN102578009A

公开(公告)日：2012-07-18

申请号：CN201210041545.8

申请日：2012-02-23

申请人： 中国海洋大学 ,  山东省海洋水产研究所

发明人： 李琪 ,  王卫军 ,  杨建敏 ,  丛日浩 ,  葛建龙 ,  孙国华

IPC分类号： A01K61/00

CPC分类号： A01K61/54 ,  A01K61/90 ,  Y02A40/822

摘要： 本发明公开了一种长牡蛎无损伤取样方法，包括如下步骤：a.首先采用浓度为3～5％的MgCl2海水溶液，对长牡蛎浸泡处理10～15h；b.然后用70％的酒精消毒处理解剖刀或解剖剪，剪取长牡蛎的外套膜或腮丝；c.用海水将经过上述取样步骤的长牡蛎冲洗3～4次，放回养殖箱中养殖即可。本发明在长牡蛎良种选育过程中建立了长牡蛎无损伤取样的方法，为长牡蛎质量性状家系选育获得理想的亲本成为可能，该方法也可用于多倍体育种，对多倍体进行无损伤倍性检测。通过良种选育来培育肉质好、生长快、抗逆性强的优质品种，或者通过多倍体育种技术来获得三倍体，来提高我国长牡蛎的产品质量。

公开(公告)号：CN101731168B

公开(公告)日：2012-04-18

申请号：CN200910256522.7

申请日：2009-12-14

申请人： 中国海洋大学

发明人： 李琪 ,  王庆志 ,  陈璐 ,  孔令峰 ,  郑小东

IPC分类号： A01K61/00

CPC分类号： Y02A40/81

摘要： 本发明涉及一种密鳞牡蛎的人工繁育方法，其特征是从自然海区采捕亲本；于室内水体中将亲本促熟；待亲本排放D形幼虫完毕后，获得D形幼虫；将D形幼虫移至10～20m3水池中进行幼虫培养；投放扇贝壳附着基进行采苗；培养附着的稚贝至壳长500～600μm时，移至自然海区进行稚贝培养。本发明根据密鳞牡蛎的繁殖特性，适时采捕野生亲本，通过亲本促熟、幼虫培养、人工采苗、稚贝培育等步骤，建立了密鳞牡蛎的人工苗种繁育方法。采用本发明的密鳞牡蛎人工繁育方法，可以大规模培育出密鳞牡蛎人工苗种。本发明对于开展密鳞牡蛎的人工养殖、保护自然资源具有重要意义。

公开(公告)号：CN102124970A

公开(公告)日：2011-07-20

申请号：CN201110023332.8

申请日：2011-01-21

申请人： 中国海洋大学

发明人： 郑小东 ,  刘兆胜 ,  刘永胜 ,  林祥志 ,  于瑞海 ,  李琪

IPC分类号： A01K61/00 ,  A01K63/02

CPC分类号： Y02A40/81

摘要： 本发明涉及一种真蛸采捕运输方法及所用装置，其特征在于首先用鹑螺网捕捞真蛸，然后将真蛸单独放置在容器中运输，运输用的海水水温为10～16℃，盐度为25～28‰，并添加0.015～0.02g/ml的MgCl2麻醉。所用到的运输容器包括前端开口和底部，以及连接中间筒体的前端侧壁和后端侧壁，且设有用于水体交换用的通孔。本发明的运输容器避免了个体间相互争斗，降低死亡率和损伤率；容器上的通孔有效提高了水流交换；并且前端和底部的螺纹结构实现了装置的组合拆分，充分利用运输空间，大大提高了运输密度。运输时采用低温麻醉处理，有效降低了真蛸的活动能力和喷墨现象。本发明的方法能够实现真蛸长时间、远距离和高密度运输，为苗种繁育和大规模增殖放流修复资源提供条件。

公开(公告)号：CN101703034B

公开(公告)日：2011-07-20

申请号：CN200910229810.3

申请日：2009-10-30

申请人： 中国海洋大学

发明人： 郑小东 ,  钱耀森 ,  王培亮 ,  李琪 ,  林祥志 ,  杨建敏

IPC分类号： A01K67/033

摘要： 本发明公开了一种长蛸立体式苗种培育的方法，包括在室内育苗池内构建多层人工产卵场对亲体进行遮蔽、长蛸立体式暂养促熟和产卵、亲体护卵孵化、幼体立体式培育。开口饵料为底栖甲壳类幼体、枝角类等。所述的人工产卵场分为瓦式、管式或壳式，在室内育苗池中按照一定方式多层交错摆放而成，使蛸亲体有独自充足的产卵孵化空间，有效避免蛸争斗和蚕食现象。本发明的方法使亲体暂养密度达10-20只/m3，幼体孵化率达75％，幼体培育密度300-500只/m3，亲体和幼体均未发现蚕食现象，苗种生长迅速。本方法适合于长蛸的大规模化苗种繁育。