一种利用DNA熔解温度分析水稻Pita基因的功能标记

    公开(公告)号:CN103333887A

    公开(公告)日:2013-10-02

    申请号:CN201310238711.8

    申请日:2013-06-17

    Abstract: 本发明为一种利用DNA熔解温度分析水稻Pita基因的功能标记开发,属生物技术领域。本发明针对传统的水稻Pita基因凝胶电泳的检测方法,提出一种利用DNA熔解温度分析水稻Pita基因的功能标记。本发明根据水稻等位基因Pita与pita在编码区第918氨基酸的G/T变异(Pita为G,pita为T),设计功能标记Pita-G/T。利用该标记进行两轮PCR扩增,第一轮PCR以基因组DNA为模板,利用Pita-G/T-out引物扩增;第二轮PCR以稀释的第一轮PCR扩增产物为模板,利用Pita-G/T-in引物扩增。利用仪器检测第二轮PCR扩增产物DNA熔解温度,通过熔解温度高低区分Pita和pita序列差异,从而判别水稻材料的稻瘟病抗性。

    一种提取净化土壤中八氯二丙醚的方法

    公开(公告)号:CN102662021A

    公开(公告)日:2012-09-12

    申请号:CN201210136110.1

    申请日:2012-05-04

    Abstract: 本发明公开了一种提取净化土壤中八氯二丙醚的方法,属于农药残留分析技术领域。本发明的提取净化方法是在土壤样品中加入正己烷-丙酮混合液,提取、离心,取上清浓缩,浓缩液过层析柱,用正己烷洗脱,收集洗脱液,浓缩,得到八氯二丙醚的提取液;所述层析柱由上至下依次填充3~4cm的无水硫酸钠,9~11cm的硅胶-浓硫酸混合物、3~4cm的无水硫酸钠、脱脂棉。本发明的提取方法步骤简单易操作,且提取液中的八氯二丙醚量最接近土样中的原始含量,为后续检测的准确性奠定了基础。

    一种水稻Wx基因突变的鉴定方法及其应用

    公开(公告)号:CN110343781B

    公开(公告)日:2021-03-30

    申请号:CN201910718870.5

    申请日:2019-08-05

    Abstract: 本发明公开了一种水稻Wx基因突变的鉴定方法,包括:提取待测水稻植株基因组构建DNA混合池,同时提取对照水稻植株的基因组DNA;针对Wx基因设计4对巢式PCR引物;以待测水稻植株基因组构建的DNA混合池和对照水稻植株的基因组DNA为模板分别进行巢式PCR;对PCR产物进行HRM分析,确定疑似突变混合池;分别提取疑似突变混合池对应的单株DNA,将单株DNA与对照植株DNA混合进行巢式PCR,扩增产物进行HRM分析获得疑似突变单株,以其DNA为模板进行PCR并进行琼脂糖凝胶电泳鉴定。本发明将TILLING技术与HRM检测手段相结合应用于水稻Wx基因的突变筛选,为水稻诱变后代高效定向筛选提供了新思路。

    白叶枯病抗性相关基因OsPRX30的应用

    公开(公告)号:CN109182348A

    公开(公告)日:2019-01-11

    申请号:CN201811061798.5

    申请日:2018-09-12

    Abstract: 本发明公开一种白叶枯病抗性相关基因OsPRX30的应用,属于植物基因工程技术领域。该OsPRX30基因受白叶枯病病菌诱导后表达量增加。该基因受水稻白叶枯菌的诱导后上调表达,敲除后能提高白叶枯病抗性。将OsPRX30编辑位点序列与U3启动子连接后共同克隆到基因编辑载体pYLCRISPR/Cas9Pubi-H上转化水稻,结果该基因可以负调控水稻白叶枯病抗性。可利用本发明构建的基因编辑载体,应用于水稻抗白叶枯病育种中。本发明有助于更好地了解OsPRX30的作用机制,OsPRX30的克隆为进一步了解水稻-白叶枯病菌互作,抗病信号传导通路奠定基础,在育种中有较大的应用价值。

    应用iTRAQ技术研究水稻响应稻瘟病菌侵染蛋白质组变化的方法

    公开(公告)号:CN104820103B

    公开(公告)日:2016-10-05

    申请号:CN201510228255.8

    申请日:2015-05-06

    Abstract: 本发明公开了一种应用iTRAQ技术研究水稻响应稻瘟病菌侵染蛋白质组变化的方法,属于植物生物技术领域。本发明的方法包含以下步骤:A.植物材料与叶片蛋白的提取;B.对步骤A所得的蛋白质样品进行进一步FASP酶解、肽段标记、SCX分级及LC‑MS质谱分析;C.对上步所得的质谱鉴定结果进行数据查库、定量分析,获取水稻‑稻瘟病菌互作过程中整个蛋白质组的变化情况。本发明能快速和有效地筛选到与水稻抗病相关联的候选基因;很好的利用iTRAQ这一高通量、准确的蛋白质组学研究手段来研究与水稻抗病相关的候选基因;可广泛应用于植物抗病等性状的研究和开发并且结合转基因技术来培育抗病性强的植物新品种。

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