过表达碳分解代谢物阻遏效应转录抑制因子基因的工程菌及其构建方法

    公开(公告)号:CN110029081B

    公开(公告)日:2020-12-01

    申请号:CN201910301370.1

    申请日:2019-04-15

    Applicant: 厦门大学

    Inventor: 何宁 王玲伟

    Abstract: 过表达碳分解代谢物阻遏效应转录抑制因子基因的工程菌及其构建方法。过表达碳分解代谢物阻遏效应转录抑制因子基因ccpN利用PCR扩增克隆多糖絮凝剂合成途径获得,核苷酸序列如SEQ ID No1。利用PCR扩增克隆碳分解代谢物阻遏效应转录抑制因子基因ccpN,将基因ccpN片段连接到表达载体上,导入地衣芽孢杆菌中,通过四环素抗性筛选获得目的基因的工程菌。构建方法:设计PCR引物;将目的基因插入到PHY300PLK‑PamyL‑TTamyL组成型启动子PamyL下游多克隆位点,得过表达质粒,导入到E.coli DH5α中扩增;将过表达质粒电转化地衣芽孢杆菌,筛选转化子,验证得地衣芽孢杆菌重组菌。

    一种基于超高压改性的生物基大豆蛋白胶黏剂的制备方法

    公开(公告)号:CN110205090B

    公开(公告)日:2020-09-04

    申请号:CN201910522077.8

    申请日:2019-06-17

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明提供一种大豆蛋白胶黏剂及其制备方法,首先用尿素对大豆蛋白进行化学改性,然后将微改性后的大豆蛋白做超高压处理,之后再加入交联剂六次甲基四胺,制备无醛耐水性优良的大豆蛋白胶。实验证明,尿素能和大豆蛋白质中羧基等活性基团反应,破坏大豆蛋白分子间氢键和疏水相互作用,疏水基团暴露,从而增加交联结构,并增强力学和耐水性能。再经超高压处理后的大豆蛋白天然结构解折叠,更多疏水区域暴露于蛋白质分子的外部;进一步改善胶黏剂的耐水性。制备的胶黏剂粘度适中,能够在被黏结物表面形成良好润湿,胶黏剂固化后在黏接面能形成良好的机械铆合结构,能够提高胶黏剂干态和湿态胶合强度。

    一种酮基合成酶基因敲除的裂殖壶菌工程菌的构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN106676127B

    公开(公告)日:2020-01-17

    申请号:CN201710078025.7

    申请日:2017-02-14

    Applicant: 厦门大学

    Inventor: 何宁 李志朋

    Abstract: 本发明公开了一种酮基合成酶基因敲除的裂殖壶菌工程菌的构建方法及应用,包括如下步骤:(1)以裂殖壶菌的基因组为DNA模板,用上游引物对和下游引物对分别PCR扩增KS基因的上游片段UKS和下游片段DKS;(2)将上游片段UKS和下游片段DKS与敲除载体连接,构建重组敲除质粒;(3)将上述重组敲除质粒电转化裂殖壶菌,用抗性平板筛选,并经PCR抗性基因序列验证,得转化子,即所述酮基合成酶基因敲除的裂殖壶菌工程菌。本发明提供了裂殖壶菌敲除基因的工程菌的构建方法构,建了敲除FabA基因裂殖壶菌重组菌,该工程菌产多不饱和脂肪酸的能力比出发菌株中所占总油脂的比例减少了43%,而16碳和18碳饱和脂肪酸的生产量增加29%。

    一株过表达分解代谢物控制蛋白A编码基因的工程菌及其构建方法

    公开(公告)号:CN109929854A

    公开(公告)日:2019-06-25

    申请号:CN201910300784.2

    申请日:2019-04-15

    Applicant: 厦门大学

    Inventor: 何宁 王玲伟

    Abstract: 一株过表达分解代谢物控制蛋白A编码基因的工程菌及其构建方法。过表达分解代谢物控制蛋白A编码基因ccpA利用PCR扩增克隆多糖絮凝剂合成途径获得,核苷酸序列如SEQ ID No1。将ccpA基因片段连接到表达载体上,导入地衣芽孢杆菌中,通过四环素抗性筛选获得目的基因的一株过表达分解代谢物控制蛋白A编码基因ccpA的地衣芽孢杆菌基因工程菌。构建方法:设计PCR引物;将扩增得到的目的基因插入到PHY300PLK-PamyL-TTamyL组成型启动子PamyL下游多克隆位点得过表达质粒,导入E.coli DH5α中扩增;将过表达质粒电转化地衣芽孢杆菌,筛选转化子,经验证得地衣芽孢杆菌重组菌。

    一种促进裂殖壶菌产油脂的方法

    公开(公告)号:CN107177640A

    公开(公告)日:2017-09-19

    申请号:CN201710548502.1

    申请日:2017-07-06

    Applicant: 厦门大学

    Inventor: 何宁 孟彤 李志朋

    CPC classification number: C12P7/6427

    Abstract: 本发明公开了一种促进裂殖壶菌产油脂的方法,在裂殖壶菌的发酵培养基中一次添加终浓度为100mg/L~3g/L的苯甲酸对位衍生物,添加苯甲酸对位衍生物的时机为发酵培养开始至发酵培养结束前1~2d中的任意时间。本发明的通过在发酵培养基中添加适量苯甲酸对位衍生物中的苯甲酸钠相较于裂殖壶菌在原始培养基中油脂产量提高了32.12%,添加对甲基苯甲酸油脂产量提高了38.21%,叶酸的添加使油脂产量提高了56.84%,对氨基苯甲酸使油脂产量提高了66.51%,但这类物质的添加对ω‑3PUFA并无抑制作用。

    一种利用沼液耦合微藻积累碳水化合物的方法

    公开(公告)号:CN105603019A

    公开(公告)日:2016-05-25

    申请号:CN201610064470.3

    申请日:2016-01-29

    Applicant: 厦门大学

    CPC classification number: Y02E50/17 Y02E50/343 C12P19/00 C12N1/12 C12P7/06

    Abstract: 一种利用沼液耦合微藻积累碳水化合物的方法,涉及碳水化合物。利用平板划线法于固体培养基上保存微藻;从微藻平板上划取微藻,接入到Modified 3N medium培养液中培养,得微藻种子培养液;利用生物量与OD685之间存在正比关系,建立OD685与生物量之间的标准曲线;从厌氧发酵罐中取沼液,离心后取上清液;将上清液稀释,并转移到间歇式光反应器中,接种培养,定期测定微藻生物量和营养物质变化,评价实验效果;收集微藻,再经冷冻干燥、破碎、水浴、水解后,测定微藻中的碳水化合物含量。沼液耦合微藻培养,不仅降低微藻培养的成本,同时净化沼液废水;碳水化合物发酵可产生生物乙醇,实现沼液的资源化利用与能源再生。

    增塑剂二甘醇二苯甲酸酯的制备方法

    公开(公告)号:CN103086891B

    公开(公告)日:2015-12-23

    申请号:CN201310058116.6

    申请日:2013-02-22

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 增塑剂二甘醇二苯甲酸酯的制备方法,涉及一种增塑剂制备方法。将苯甲酸和二甘醇加热至苯甲酸溶解后,再加入催化剂回流反应,开启真空泵,升温至200~220℃时减压保温反应,待无水分蒸出后停止反应,得到二甘醇二苯甲酸酯粗品;将得到的二甘醇二苯甲酸酯粗品冷却后用Na2CO3水溶液中和除去过量的苯甲酸,洗涤后分出酯层,再减压蒸馏脱水,得到无色透明油状液体,即为增塑剂二甘醇二苯甲酸酯产品。工艺简单,不使用带水剂,在负压下反应将水不断蒸出,打破了酯化反应化学平衡,缩短了反应时间,大大提高了苯甲酸转化率,酯化率达98%以上,催化剂选择性好,副反应少,产品色泽浅,无需用活性炭脱色,既能适应工业化生产要求又环保。

Patent Agency Ranking