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公开(公告)号：CN118222560A
公开(公告)日：2024-06-21
申请号：CN202410438603.3
申请日：2024-04-12
申请人： 南京工业大学
摘要： 本发明提供了一种红法夫酵母菌的诱变方法，属于菌种选育技术领域。本发明以红法夫酵母(Xanthophyllomyces dendrorhous)DW6菌株作为原始菌株，经过X射线诱变、EMS诱变、ARTP诱变、NTG诱变，每轮诱变后，分选出虾青素产量提高的菌株，高产菌株在23～27℃适应性进化后，将菌株涂布于含有二苯胺的平板进行筛选，最终得到中温高产菌株。利用本发明的方法诱变得到的红法夫酵母菌具有耐高温、高产虾青素的特性，适用于工业生产。
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公开(公告)号：CN118028204A
公开(公告)日：2024-05-14
申请号：CN202410225318.3
申请日：2024-02-28
申请人： 南京工业大学
摘要： 本发明公开了依克多因合成菌株及其构建方法和应用，该菌株通过在敲除基因crr的宿主菌中过表达ectABC基因簇和lysC基因获得；所述宿主菌为大肠杆菌（Escherichia coli）MG1655；所述crr基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1；所述ectABC基因簇的核苷酸序列如SEQ ID NO：2；所述lysC基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：3。本发明的菌株通过优化代谢通路，能够高效合成依克多因，从根本上降低依克多因生产成本，可以达到115g/L的产量和0.45g/g葡萄糖的产率，在与现有技术报道的最高产量接近的同时，大幅提高了产率。
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公开(公告)号：CN117343976A
公开(公告)日：2024-01-05
申请号：CN202310956545.9
申请日：2023-08-01
申请人： 南京工业大学
摘要： 本发明公开一种双酶级联联产甘油葡萄糖苷和D‑阿洛酮糖的方法，以蔗糖、甘油作为共底物，同时加入蔗糖磷酸化酶、D阿洛酮糖‑3‑差向异构酶共同催化反应，获得甘油葡萄糖苷和D‑阿洛酮糖。本发明首次实现从蔗糖到D‑阿洛酮糖的多酶级联反应，催化更为经济的蔗糖和甘油为底物生产D‑阿洛酮糖，原料利用率高，D‑阿洛酮糖转化率高，步骤简捷，生产成本低，污染小，对环境影响小，可实现D‑阿洛酮糖的规模化生产。经重组大肠杆菌生产的蔗糖磷酸化酶和D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶，以蔗糖与甘油为底物，超声破碎后双酶级联催化反应的甘油葡萄糖苷产量289.8g/L，D‑阿洛酮糖产量93.4g/L，甘油转化率高达75.6%。
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公开(公告)号：CN116836826A
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202310615104.2
申请日：2023-05-29
申请人： 南京工业大学 , 山东亚华生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了高效合成2‑苯乙醇的基因工程菌及其构建方法和应用，所述基因工程菌通过在宿主菌中表达内源抗逆元件ampk，gdh，strap和tcyc及外源抗逆元件gsh和slc得到；所述内源抗逆元件来源于季也蒙毕赤酵母；所述外源抗逆元件gsh来源于解脂耶氏酵母；所述外源抗逆元件slc来源于季也蒙毕赤酵母；所述宿主菌为季也蒙毕赤酵母菌。本发明结合内源抗逆元件和外部抗逆元件对宿主菌进行基因工程改造，获得了对2‑苯乙醇具有高耐受性且合成效率高的基因工程菌，提高了2‑苯乙醇的产量，为2‑苯乙醇合成提供了新的生产菌株。
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公开(公告)号：CN116769864A
公开(公告)日：2023-09-19
申请号：CN202310836769.6
申请日：2023-07-07
申请人： 南京工业大学 , 山东亚华生物科技有限公司
摘要： 本发明公开一种制备高稳定性类胡萝卜素的方法，包括菌种活化、种子培养和发酵培养，其特征在于，菌种为食醚红球菌(Rhodococcusaetherivorans)N1，保藏编号为CCTCCNO：M20221270；所述发酵培养的发酵培养基的配方为碳源10～60g/L，尿素0.2～4g/L，蛋白胨10～20g/L，酵母粉或玉米浆干粉5～10g/L，微量元素1ml/L，其余为水；所述微量元素的配方为FeCl2·4H2O1.5g/L、CoCl2·6H2O0.19g/L、MnCl2·4H2O0.1g/L、ZnCl20.07g/L、NiCl2·6H2O0.024g/L、Na2MO4·2H2O0.036g/L、CuCl2·2H2O0.002g/L。本发明利用食醚性红球菌N1，优化发酵条件，筛选合适的碳源氮源及其浓度、培养温度、pH和发酵培养时间。在摇瓶发酵培养基中，红球菌细胞干重可达13g/L，生产类胡萝卜素产量可达45.9mg/L，其粗类胡萝卜素提取物在酸、铁离子或亚铁离子胁迫环境下有更高的稳定性。
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公开(公告)号：CN114574374B
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202210270780.6
申请日：2022-03-18
申请人： 南京工业大学
摘要： 本发明涉及一株产2‑苯乙醇菌株及其应用，所述菌株分类命名为季也蒙毕赤酵母（Meyerozyma guilliermondii）EA20，保藏号为CCTCC NO：M 2022053。该菌株抗逆性强、产物产量高、重复性好，是一种适合利用L‑苯丙氨酸发酵产2‑苯乙醇的优良菌种。经过发酵产量能达到4.75g/L，比出发菌株提高了113%。
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公开(公告)号：CN115029257A
公开(公告)日：2022-09-09
申请号：CN202210480414.3
申请日：2022-05-05
申请人： 南京工业大学
IPC分类号： C12N1/19 , C12N15/81 , C12N15/65 , C12N15/53 , C12N15/52 , C12N15/54 , C12N15/61 , C12P23/00 , C12R1/645
摘要： 本发明提供产β‑胡萝卜素的重组解脂耶氏酵母及其构建方法和应用，向解脂耶氏酵母（Yarrowia lipolytica）中导入香叶基香叶基二磷酸合酶CrtE、八氢番茄红素合成酶/番茄红素环化酶CrtYB、八氢番茄红素去饱和酶CrtI、3‑羟基‑3‑甲基戊二酰CoA还原酶tHMGR以及乙酰辅酶A羧化酶ACC的表达盒得到所述重组解脂耶氏酵母菌株。本发明重组解脂耶氏酵母的构建方法，操作简单、高效，能够高效合成β‑胡萝卜素。本发明对高价值萜类产物的工业化以及商业化应用具有重大的现实意义和经济价值。
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公开(公告)号：CN114934081A
公开(公告)日：2022-08-23
申请号：CN202210543325.9
申请日：2022-05-19
申请人： 南京工业大学
IPC分类号： C12P7/6427 , C12P7/6463 , C12R1/645 , C12R1/89
摘要： 本发明涉及一种微生物混菌发酵提高油脂收率的方法，分别活化圆红冬孢酵母和小球藻；先将活化小球藻接种至发酵培养基中培养，之后接种活化圆红冬孢酵母，进行混菌发酵。本发明通过运用混菌发酵的手段，微藻为酵母生长提供O2，并且吸收利用酵母生产的CO2和有机酸，缓解了发酵后期pH较低对于油脂生产的抑制。
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公开(公告)号：CN114921504A
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN202210128191.4
申请日：2022-02-11
申请人： 南京工业大学
IPC分类号： C12P7/6463 , C12P23/00 , C12R1/645
摘要： 本发明公开了变温发酵生产微生物油脂和类胡萝卜素的方法，包括制备斜面单菌落、种子活化、发酵培养，发酵培养过程中分阶段进行温度调控，具体为：第一阶段：时长36‑60h，发酵温度30℃；第二阶段：时长6h，发酵温度25℃；第三阶段：时长54‑78h，发酵温度22℃；发酵的总时长为120h。本发明所述变温发酵圆红冬孢酵母菌生产微生物油脂和类胡萝卜素的方法，可同时实现高菌株生长量、高微生物油脂含量、高类胡萝卜素含量，降低了发酵成本、提高了发酵效率，降低了生产成本，能够为工业化生产带来巨大的经济效益。
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公开(公告)号：CN114806914A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202210559567.7
申请日：2022-05-20
申请人： 南京工业大学
摘要： 本发明公开了一种高产β‑胡萝卜素的解脂耶氏酵母菌及其应用。所述重组菌株是在初始菌株po1f基因组插入香叶基香叶基二磷酸合酶、八氢番茄红素脱氢酶、八氢番茄红素合成酶/八氢番茄红素环化酶、3‑羟基‑3‑甲基戊二酰辅酶A还原酶、乙酰辅酶A羧化酶构建得到菌株解脂耶氏酵母Yli‑CAH后，再次插入crtE、crtI、crtYB、柠檬酸裂解酶（ACL）或者tHMGR中至少一种表达盒后得到的。本发明重组解脂耶氏酵母的构建方法，操作简单、高效，可以解除MVA途径的限速步骤，使更多的乙酰CoA转通量流向β‑胡萝卜素的合成，通过过表达柠檬酸裂解酶编码基因，能够提高细胞生长，有利于工业化利用。
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