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公开(公告)号：CN111273036A
公开(公告)日：2020-06-12
申请号：CN202010149812.8
申请日：2020-03-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/577 , G01N21/76
Abstract: 本发明涉及检测口蹄疫非结构蛋白抗体的单抗竞争化学发光试剂盒，属于生物技术领域。所述试剂盒包括捕获3ABC抗原的化学发光板、酶标单抗（2G5-HRP+9E2-HRP）、血清稀释液、20×PBST洗涤液、阳性对照血清、阴性对照血清、化学发光液（A、B），其特征在于所述捕获3ABC抗原的化学发光板为白色可拆卸的聚苯乙烯96孔板，先包被3ABC多抗，并通过3ABC多抗捕获3ABC蛋白；所述酶标单抗为分别识别3A和3B蛋白的酶标单抗2G5-HRP和9E2-HRP的混合物。本发明所述的试剂盒敏感性高、特异性强、重复性好，仅需洗涤一次，所需检测时间短，不受动物种属限制，适用于检测猪、牛和羊等多种易感动物。
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公开(公告)号：CN110606875A
公开(公告)日：2019-12-24
申请号：CN201910891539.3
申请日：2019-09-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/35 , C07K19/00 , C12N15/31 , C12N15/62 , A61K39/295 , A61K39/135 , A61K39/39 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种用于制备口蹄疫疫苗的分子内佐剂及其应用和口蹄疫疫苗，属于基因工程疫苗技术领域，所述分子内佐剂的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明提供的分子内佐剂能够明显增强FMD的免疫应答，显著提高了多表位免疫原的抗原广谱性。
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公开(公告)号：CN110592138A
公开(公告)日：2019-12-20
申请号：CN201910886409.0
申请日：2019-09-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一种表达猪源唾液酸黏附素受体基因的重组载体、重组细胞及其构建方法和应用，属于分子生物学技术领域，所述重组载体包括初始载体和基因Sn；所述重组细胞的宿主细胞为Marc145细胞。所述重组细胞的制备方法如下：人工合成基因Sn，并在所述基因Sn两端连接酶切位点；用Hind III限制性酶和BamH I限制性酶分别对带酶切位点的基因Sn片段以及pEGFP-N1载体进行双酶切后，连接酶切产物获得重组载体；将所述重组载体转染所述Marc145细胞获得重组细胞。本发明所述重组细胞能够高效稳定表达基因Sn，能够应用于疫苗的制备。
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公开(公告)号：CN110564765A
公开(公告)日：2019-12-13
申请号：CN201910886881.4
申请日：2019-09-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一种表达eGFP的同源重组载体，属于基因组编辑技术领域，所述表达eGFP的同源重组载体包括载体骨架和插入片段，所述插入片段包括左同源臂、CMV启动子、eGFP表达框和右同源臂；所述左同源臂的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；所述右同源臂的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明中所述同源重组载体与CRISPR/Cas9打靶载体共转染非洲绿猴胚胎肾上皮细胞后，通过G418筛选，得到定点整合eGFP并稳定表达eGFP的非洲绿猴胚胎肾上皮细胞。本发明所述的细胞构建方法支持外源基因的定点整合和稳定表达。
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公开(公告)号：CN108508210B
公开(公告)日：2019-10-18
申请号：CN201810149238.9
申请日：2018-02-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种PRRSV N蛋白的原核可溶性表达方法及间接ELISA抗体检测方法，PRRSV N蛋白的原核可溶性表达方法包括(1)根据大肠杆菌密码子偏嗜性特征，人工优化并合成PRRSV N蛋白编码基因；(2)以MBP作为促溶标签，构建N蛋白原核表达载体；(3)MBP融合N蛋白表达与纯化；再通过间接ELISA抗体检测方法进行特异性试验。本发明以带有MBP标签的PMAL‑C4X作为表达载体，实现了PRRSV N蛋白在大肠杆菌中的高效可溶性表达，诱导培养在接近室温进行，无需加热或降温设备，目的蛋白洗脱采用10mmoL/L麦芽糖溶液，洗脱效果好，用量少，节约成本。本发明以融合N蛋白为包被抗原建立的间接ELISA抗体检测方法特异性强；本发明建立间接ELISA抗体检测方法与IDEXX同类试剂盒的总符合率为90％左右。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106435016B
公开(公告)日：2019-07-26
申请号：CN201610760228.X
申请日：2016-08-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种快速显色一步法检测猪圆环病毒2型的LAMP试剂盒，该试剂盒包含有6条LAMP引物的LAMP反应液构成的检测体系。本发明的试剂盒在不延长原有1小时反应时间的条件下，实现了将荧光染料直接加入反应管的一步操作，不仅简化了操作程序，解决了含有钙黄素的预混染料对Bst DNA扩增酶的抑制而导致在反应管直接加入荧光染料不显色的根本问题，还有效避免了由于反应结束后二次开盖导致的释放产物形成气溶胶的污染发生。应用本发明的试剂盒进行检测，能够肉眼直接直观判断，具有良好的特异性、敏感性和稳定性。
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公开(公告)号：CN110025620A
公开(公告)日：2019-07-19
申请号：CN201910178107.8
申请日：2019-03-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K31/5415 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种Inauhzin在制备口蹄疫病毒抑制剂中的应用，涉及兽用药物技术领域。本发明所述Inauhzin毒性低，对A型口蹄疫病毒和O型口蹄疫病毒均具有抑制作用，且能够显著延缓口蹄疫病毒对乳鼠的致死效应。
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公开(公告)号：CN109745334A
公开(公告)日：2019-05-14
申请号：CN201910181159.0
申请日：2019-03-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K31/7076 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及虫草素在制备预防口蹄疫病毒感染的药物中的应用，属于兽用药物技术领域。本发明所述应用能够为进一步控制口蹄疫的传播提供一类高效、安全且质量可控的抗口蹄疫病毒药物。
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公开(公告)号：CN108508210A
公开(公告)日：2018-09-07
申请号：CN201810149238.9
申请日：2018-02-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种PRRSV N蛋白的原核可溶性表达方法及间接ELISA抗体检测方法，PRRSV N蛋白的原核可溶性表达方法包括(1)根据大肠杆菌密码子偏嗜性特征，人工优化并合成PRRSV N蛋白编码基因；(2)以MBP作为促溶标签，构建N蛋白原核表达载体；(3)MBP融合N蛋白表达与纯化；再通过间接ELISA抗体检测方法进行特异性试验。本发明以带有MBP标签的PMAL-C4X作为表达载体，实现了PRRSV N蛋白在大肠杆菌中的高效可溶性表达，诱导培养在接近室温进行，无需加热或降温设备，目的蛋白洗脱采用10mmoL/L麦芽糖溶液，洗脱效果好，用量少，节约成本。本发明以融合N蛋白为包被抗原建立的间接ELISA抗体检测方法特异性强；本发明建立间接ELISA抗体检测方法与IDEXX同类试剂盒的总符合率为90％左右。
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公开(公告)号：CN108330134A
公开(公告)日：2018-07-27
申请号：CN201810074696.0
申请日：2018-01-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种猪口蹄疫病毒O型Fc多肽疫苗及其制备方法和应用。所述的猪口蹄疫病毒O型Fc多肽疫苗中含有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列经原核表达系统表达得到的可溶性猪口蹄疫病毒O型Fc多肽。本发明通过对已经公开的编码猪口蹄疫病毒O型广谱多表位重组抗原的核苷酸序列进行了密码子优化，然后通过重新构建重组质粒、优化诱导及培养条件，实现了靶标蛋白的可溶性表达及纯化。可溶性蛋白最大程度模拟了天然抗原的特性，免疫原性更强，抗体水平更高。此外，本发明制备得到的疫苗成份更为简单，不含3D蛋白成份，降低了疫苗总蛋白含量，在提高免疫效力的同时降低了疫苗成本。本发明的提出对我国猪O型口蹄疫防控提供了物质储备和技术支撑，具有重要的意义。
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