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公开(公告)号：CN116479045A
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202310232502.6
申请日：2023-03-13
摘要： 本发明属于基因工程及生物检测技术领域，公开了一种禽白血病病毒重组p27蛋白基因工程细胞系的构建与应用。所述构建方法为：根据禽白血病病毒p27蛋白基因序列信息，在起始密码子ATG之前添加Kozac序列，在序列N端连接小鼠IgGκ链信号肽序列，在序列C端设计组氨酸标签与Flag标签，得到改造后的p27序列；然后将改造后的p27序列克隆至pCMV‑EGFP载体，构建得到重组表达质粒pCMV‑EGFP‑p27；将重组表达质粒经转化后转染CHO‑K1细胞，然后通过G418加压筛选，得到单克隆细胞，扩大培养，得到禽白血病病毒重组p27蛋白基因工程细胞系。该基因工程细胞系可用于禽白血病病毒的检测。
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公开(公告)号：CN116286885A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202210900601.2
申请日：2022-07-28
IPC分类号： C12N15/50 , C12N15/11 , C12N15/85 , C12N15/64 , C12N7/00 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种鸡传染性支气管炎KC疫苗毒株及其制备方法、疫苗，涉及生物工程技术领域。具体的，本发明基于特定的引物，以Beaudette‑p65为骨架，将Beaudette(S1)编码区的第297‑532位氨基酸替换成QX型流行毒KC毒株的S1，其他序列保持不变。成功拯救出重组病毒rIBV‑Beau‑KC(S1)。通过连续在SPF鸡胚和Vero细胞上传代，获得1株具有Vero细胞适应性的重组毒株rIBV‑Beau‑KC(S1)‑p10V9，EID50和TCID50分别为106.78/mL和105.23/mL，与母本毒相似增殖能力。
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公开(公告)号：CN110128545B
公开(公告)日：2022-10-25
申请号：CN201910321941.8
申请日：2019-04-22
申请人： 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
IPC分类号： C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/81 , A61K39/295 , A61K39/235 , A61K39/145 , A61P31/16 , A61P31/20
摘要： 本发明属于兽用生物制品技术领域，公开了一种融合基因，碱基序列如序列表SEQ ID NO：1所示；该融合基因采用禽流感H9亚型HA基因、腺病毒4型fiber2基因、特异性连接肽片段基因进行融合，该基因对应的表达蛋白抗原能够诱导家禽产生高水平的特异性抗体，保护家禽免受禽流感和禽腺病毒的感染，同时，本发明还公开了一种重组表达载体、抗原及其制备方法和应用。
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公开(公告)号：CN110124025B
公开(公告)日：2022-10-25
申请号：CN201910321818.6
申请日：2019-04-22
申请人： 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
IPC分类号： A61K39/235 , A61K39/145 , A61P31/16 , A61P31/20 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/81 , C12N15/66
摘要： 本发明属于兽用生物制品技术领域，公开了一种禽流感与禽腺病毒4型二联基因工程亚单位疫苗，所述的疫苗中的抗原为融合抗原；所述的融合抗原具有：a)禽流感病毒HA蛋白；b)禽腺病毒fiber2蛋白；c)位于所述的禽流感病毒HA蛋白和禽腺病毒fiber2蛋白之间的特异性连接肽；所述的特异性连接肽的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO：2所示。本疫苗中含有融合抗原，该融合能够诱导家禽产生高水平的特异性抗体，保护家禽免受禽流感和禽腺病毒的感染，同时本发明还公开了该疫苗的制备方法。
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公开(公告)号：CN115074389A
公开(公告)日：2022-09-20
申请号：CN202210661981.9
申请日：2022-06-13
申请人： 华南农业大学 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
IPC分类号： C12N15/867 , C12N15/11 , C12N15/66 , C12N15/40 , C12N5/10 , C12Q1/70 , G01N33/569 , G01N33/58 , C12R1/91 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种稳定表达鸭坦布苏病毒NS1蛋白的细胞系的构建方法及其应用，涉及分子生物学技术领域。该构建方法包括：(1)采用构建重组质粒；(2)采用所述重组质粒转染细胞，得到重组细胞；(3)将重组细胞和慢病毒包装质粒共同培养，得到慢病毒样颗粒的培养液；(4)将慢病毒样颗粒的培养液感染宿主细胞，筛选得到稳定株，培养后获得细胞系。实施本发明，可稳定提升NS1mRNA和蛋白的表达水平。
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公开(公告)号：CN115011562A
公开(公告)日：2022-09-06
申请号：CN202210451385.8
申请日：2022-04-24
申请人： 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学
摘要： 本发明公开一种鸡新城疫禽流感二联疫苗的制备方法，其包括：(1)提供MDCK悬浮细胞，并培养传代；(2)在培养传代后的MDCK细胞中加入1～5mg/L的地塞米松和2～8mg/L依达拉奉，得到鸡新城疫培养基；将鸡新城疫病毒接种至所述鸡新城疫培养基，培养得到新城疫病毒液；(3)在培养传代后的MDCK细胞中加入1～6g/L的超滤过的酶消化产物，得到禽流感培养基；将禽流感病毒接种至所述禽流感培养基，培养得到禽流感病毒液；(4)将所述新城疫病毒液、禽流感病毒液灭活，并与辅料混合，得到鸡新城疫禽流感二联疫苗。本发明的制备方法简化了病毒繁殖培养工艺，提高了病毒滴度，进而得到的抗体效价高，攻毒保护效果好。
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公开(公告)号：CN111714463B
公开(公告)日：2022-06-17
申请号：CN202010815918.7
申请日：2020-08-14
申请人： 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
摘要： 本发明涉及一种米氮平口服剂及其制备方法。所述的米氮平口服剂的制备原料包括如下质量百分含量的各组分：米氮平2‑6％、稀释剂75‑85％、崩解剂3‑10％、粘合剂3‑8％，以及助流剂0.3‑2％。本发明的有益效果包括：本发明通过对稀释剂、崩解剂粘合剂以及助流剂这些辅料用量的综合调整，形成特定的米氮平口服剂原料配方，用该配方制备的口服剂，具有适口性好的效果，宠物能积极采食。同时，发明人还意外地发现，本发明原料配方适用于干压法制片，成型效果好，并且所得片剂中米氮平分布均匀。另外，本发明原料配方制备的口服剂，崩解度以及溶出度也较好。
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公开(公告)号：CN114196683A
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN202111517150.6
申请日：2021-12-13
摘要： 本发明属于兽用制品领域，公开了一种鸭坦布苏病毒感染性cDNA的制备方法，包括如下步骤：步骤1：构建亚基因组质粒，所述亚基因组质粒为质粒pF1、pF2、pF3、pF4，质粒pF1、pF2、pF3、pF4分别含目标片段F1、F2、F3、F4；步骤2：获取目标片段：从质粒pF1、pF2、pF3、pF4上获取用于体外连接的目标片段f1、f2、f3、f4；步骤3：体外连接目标片段f1、f2、f3、f4，获得鸭坦布苏病毒感染性cDNA。该方法可以成功的克隆出与原病毒株完全相同、无突变的重组病毒。
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公开(公告)号：CN114107303A
公开(公告)日：2022-03-01
申请号：CN202111494484.6
申请日：2021-12-08
摘要： 本发明属于生物技术领域，提供了一种用于特异性靶向IRF7基因的sgRNA，所述sgRNA序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。该sgRNA引物可与合适的载体结构构成质粒，用于敲除相应的基因实现IRF7功能的缺失。同时，本发明还提供了一种质粒、IRF7功能缺失的细胞系及其构建方法和应用。本发明的细胞系的优势在于：IFN‑βmRNA水平、IRF1mRNA水平、VIPERIN mRNA水平、CMPK2mRNA水平可以达到显著的抑制。相比于CN201910352557.4仅抑制干扰素β表达水平，其其他方面的抑制更为显著。
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公开(公告)号：CN113699119A
公开(公告)日：2021-11-26
申请号：CN202011451142.1
申请日：2020-12-10
申请人： 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
摘要： 本发明属于兽用生物制品技术领域，公开了一种新城疫病毒及疫苗的无血清全悬浮培养制备方法。取MDCK细胞经复苏后加入到无血清培养基中进行悬浮培养，当细胞长至8.0×106～16×106cells/mL，活率在90％以上时，得到接种培养基质；将新城疫病毒接种至上述培养基质中，悬浮培养进行病毒吸附；然后补加无血清培养基的病毒生产液继续进行悬浮培养，得到新城疫病毒。本发明方法生产工艺稳定、易操作，病毒含量高、批间差异小，质量易控，可显著提高疫苗产量和质量，生产出的新城疫疫苗安全性好、免疫效力高，对新城疫强毒的攻击具有完全的免疫保护作用。
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