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公开(公告)号:CN114934053B
公开(公告)日:2024-02-06
申请号:CN202210757360.0
申请日:2022-06-30
申请人: 澳斯康生物(南通)股份有限公司 , 上海健士拜生物科技有限公司 , 健顺生物科技(南通)有限公司 , 上海澳斯康生物制药有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
发明人: 牛庆田 , 刘兵 , 施赛赛 , 林健芬 , 马燕 , 周亲亲 , 殷翔宇 , 孙超 , 何家玲 , 郑海峰 , 卜纪斌 , 郜诗炯 , 顾如林 , 胡加慧 , 刘峰 , 仇金树 , 阚子义 , 罗顺
IPC分类号: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/54 , C12N5/10 , C12R1/91
摘要: 本发明公开了一种岩藻糖基转移酶8缺陷型CHO细胞系的制备方法,包括:采用三种sgRNA与FUT8基因编码SH3结构域的外显子区域片段重组敲除CHO细胞的FUT8基因,以获得岩藻糖基转移酶8缺陷型CHO细胞系;其中,外显子区域片段包含如SEQ ID NO.1所示的序列;三种sgRNA的序列分别如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。本发明创造性地采用三种sgRNA与FUT8基因编码SH3结构域的外显子区域片段重组以敲除CHO细胞的FUT8基因,显著提高sgRNA的打靶效率,进而显著提高了FUT8基因的敲除效率,更容易获得岩藻糖基转移酶8缺陷型CHO细胞系。
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公开(公告)号:CN114774369B
公开(公告)日:2023-07-25
申请号:CN202210324380.9
申请日:2022-03-30
申请人: 上海健士拜生物科技有限公司 , 澳斯康生物(南通)股份有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司 , 健顺生物科技(南通)有限公司 , 上海澳斯康生物制药有限公司
摘要: 本发明涉及一种腺病毒生产用无血清培养基及腺病毒生产方法,所述培养基包含氨基酸、维生素、无机盐、葡萄糖、PF68、透明质酸钠和水;其中,所述维生素包含氯化胆碱、泛酸钙、烟酰胺、盐酸吡哆醇、核黄素、盐酸硫胺素和肌醇。本发明采用盐酸吡哆醇代替叶酸和盐酸吡哆辛,与氯化胆碱、泛酸钙、烟酰胺、核黄素、盐酸硫胺素和肌醇构成维生素源,并配合PF68和透明质酸钠,与氨基酸、无机盐和葡萄糖一起构成特定培养基配方,采用该培养基配方生产腺病毒的过程中,接入的腺病毒能高效转染宿主细胞。
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公开(公告)号:CN115807040A
公开(公告)日:2023-03-17
申请号:CN202210856914.2
申请日:2022-07-20
申请人: 上海澳斯康生物制药有限公司 , 澳斯康生物(南通)股份有限公司 , 上海健士拜生物科技有限公司 , 健顺生物科技(南通)有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
IPC分类号: C12N15/864 , C12N15/12 , C12N5/10 , A61K48/00 , A61P35/00
摘要: 本发明公开了一种PD‑1蛋白表达载体及其应用,其中,PD‑1蛋白表达载体包括AAV载体,AAV载体的多克隆位点的酶切位点间插入有PD‑1基因片段。本发明的PD‑1蛋白表达载体,能够在人体内长期表达PD‑1蛋白,PD‑1蛋白和肿瘤细胞的PD‑L1特异性结合,从而降低肿瘤细胞对T细胞的负调节作用,提高T淋巴细胞对肿瘤细胞生长的抑制作用。
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公开(公告)号:CN114539351B
公开(公告)日:2023-03-03
申请号:CN202210094984.9
申请日:2022-01-26
申请人: 上海健士拜生物科技有限公司 , 澳斯康生物(南通)股份有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司 , 健顺生物科技(南通)有限公司
摘要: 本发明涉及一种纳米抗体的纯化方法,包括如下步骤:将纳米抗体收获液依次进行阳离子层析和阴离子层析,收集阴离子层析洗脱液;其中,所述阴离子层析采用的洗脱液的pH为7±0.5,所述洗脱液包含:10±2mM的Na2HPO4、10±2mM的NaH2PO4、0.01M~0.03M的精氨酸以及2mM~8mM的(NH4)2SO4。上述纳米抗体的纯化方法能够有效提高纳滤过程中的纳滤膜可滤过载量,同时还能够有效去除纳米抗体制品中的宿主细胞蛋白(HCP),并在层析过程中维持纳米抗体的稳定性,减少聚集体的形成。
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公开(公告)号:CN114934053A
公开(公告)日:2022-08-23
申请号:CN202210757360.0
申请日:2022-06-30
申请人: 澳斯康生物(南通)股份有限公司 , 上海健士拜生物科技有限公司 , 健顺生物科技(南通)有限公司 , 上海澳斯康生物制药有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
发明人: 牛庆田 , 刘兵 , 施赛赛 , 林健芬 , 马燕 , 周亲亲 , 殷翔宇 , 孙超 , 何家玲 , 郑海峰 , 卜纪斌 , 郜诗炯 , 顾如林 , 胡加慧 , 刘峰 , 仇金树 , 阚子义 , 罗顺
IPC分类号: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/54 , C12N5/10 , C12R1/91
摘要: 本发明公开了一种岩藻糖基转移酶8缺陷型CHO细胞系的制备方法,包括:采用三种sgRNA与FUT8基因编码SH3结构域的外显子区域片段重组敲除CHO细胞的FUT8基因,以获得岩藻糖基转移酶8缺陷型CHO细胞系;其中,外显子区域片段包含如SEQ ID NO.1所示的序列;三种sgRNA的序列分别如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。本发明创造性地采用三种sgRNA与FUT8基因编码SH3结构域的外显子区域片段重组以敲除CHO细胞的FUT8基因,显著提高sgRNA的打靶效率,进而显著提高了FUT8基因的敲除效率,更容易获得岩藻糖基转移酶8缺陷型CHO细胞系。
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公开(公告)号:CN108300704A
公开(公告)日:2018-07-20
申请号:CN201810129825.1
申请日:2018-02-08
申请人: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
摘要: 本发明提供了一种用传代细胞系悬浮培养传染性支气管炎病毒的方法,包括:步骤1:取EB66细胞进行复苏与传代培养;步骤2:对步骤1所得EB66细胞进行鸡传染性支气管炎病毒的接种培养;步骤3:接毒后的EB66细胞每隔6-12h进行取样,测定病毒的EID50,在病毒EID50达到最高时收获病毒并保存,得到培养后的鸡传染性支气管炎病毒。本发明采用EB66细胞作为鸡传染性支气管炎病毒的培养基质,利用提供用全悬浮传代细胞系EB66细胞进行高效的病毒生产,有效提高支气管炎病毒的培育滴度,从而为实现鸡传染性支气管炎病毒疫苗的大规模培养,降低病毒的培育成本。
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公开(公告)号:CN108239619A
公开(公告)日:2018-07-03
申请号:CN201611207062.5
申请日:2016-12-23
申请人: 甘肃健顺生物科技有限公司
CPC分类号: C12N5/0686 , C12N7/00 , C12N2710/10051 , C12N2720/12251 , C12N2750/14051 , C12N2760/16151
摘要: 本发明涉及悬浮MDCK细胞相关疫苗生产的二阶培养工艺技术。本发明以悬浮MDCK细胞作为宿主细胞,采用二阶培养接毒方式生产能在MDCK悬浮细胞上病变的病毒,即,在细胞密度生长到2×106/mL-20×106/mL时,用生产培养基稀释1-5倍,稀释后细胞密度在1×106/mL-10×106/mL之间,然后接毒,或在稀释之前接毒。本发明的生产工艺简单;不浪费培养基;不换液;生产培养基和生长培养基为相同或不同培养基,二者按比例混合,即可以达到细胞生长和病毒生长的作用。
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公开(公告)号:CN108220227A
公开(公告)日:2018-06-29
申请号:CN201711439182.2
申请日:2017-12-27
申请人: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
摘要: 一种通过全悬浮传代细胞系悬浮培养新城疫病毒的方法,所述方法如下:取生长密度为8×106细胞/mL‑16×106细胞/mL的全悬浮EB66细胞系通过二阶培养法进行新城疫病毒的接种,接毒后继续培养,并每隔12h取样,以测定病毒的EID50,在病毒的滴度最高时收获病毒并保存,完成新城疫病毒的培养。本发明通过采用鸭胚胎干细胞EB66传代细胞系进行鸡新城疫病毒培养,有效提高所得到病毒的滴度及纯度,进而使生产出的疫苗具有较高品质,并降低生产成本。
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公开(公告)号:CN110241090B
公开(公告)日:2023-10-13
申请号:CN201910376694.1
申请日:2019-05-07
申请人: 江苏南农高科技股份有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
摘要: 本发明提供了一种全悬浮细胞培养生产猪伪狂犬病毒抗原的方法,该方法可以大量降低生产成本,无需载体和血清,生产过程更为简便,无需细胞驯化或换液操作,且该工艺占地小,可迅速进行规模化生产,对环境要求较低,自动化程度高,人工成本少,生产批间差异小,质量稳定易于控制,可明显提高产品的产量及质量。一种全悬浮细胞培养生产猪伪狂犬病毒抗原的方法,包括如下步骤:(1)种子细胞的培养及传代;(2)种子细胞的接毒;(3)病毒的收获和含量测定;其中,步骤(1)中,种子细胞为PK‑15B1,步骤(2)中,种毒为PRV ZJ011G,各步骤培养采用无血清细胞培养基CD PK15 259。
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公开(公告)号:CN115369069A
公开(公告)日:2022-11-22
申请号:CN202211006805.8
申请日:2022-08-22
申请人: 上海健士拜生物科技有限公司 , 澳斯康生物(南通)股份有限公司 , 上海澳斯康生物制药有限公司 , 健顺生物科技(南通)有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
摘要: 本发明涉及一种293细胞补料培养基及其制备和应用,所述293细胞补料培养基包含氨基酸、维生素无机盐、葡萄糖、丙酮酸钠、次黄嘌呤、胸腺嘧啶核苷和水。相对于传统技术,本发明具备如下有益效果:本发明通过氨基酸、维生素和无机盐种类的选择,并搭配葡萄糖、丙酮酸钠、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷,形成特定配方的培养基配方,在采用生长培养基培养293细胞的过程中补加该培养基配方,能够很好地维持细胞密度增长并保持较高的细胞活率,同时维持细胞蛋白抗体浓度持续升高,同时该补料对于病毒的表达滴度亦有帮助作用。
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