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公开(公告)号：CN117229392B
公开(公告)日：2024-11-15
申请号：CN202311124297.8
申请日：2023-09-01
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , A61K39/42 , A61P31/20 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种抗非洲猪瘟病毒（ASFV）P72蛋白中和活性抗体及其应用。本发明利用杂交瘤细胞融合技术，成功获得一株特异性针对ASFV P72蛋白的中和活性单克隆抗体5A8，在体外具有阻止ASFV感染敏感细胞的中和功能，对抗原亲和力强，可应用于抗病毒药物的研究。
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公开(公告)号：CN117209596A
公开(公告)日：2023-12-12
申请号：CN202311124301.0
申请日：2023-09-01
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , A61K39/42 , A61P31/20 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种抗非洲猪瘟病毒（ASFV）P72蛋白中和活性抗体2C9及其应用。本发明利用杂交瘤细胞融合技术，成功获得一株特异性针对ASFV P72蛋白的中和活性单克隆抗体2C9，2C9是一株构象依赖性单克隆抗体，在体外具有阻止ASFV感染敏感细胞的中和功能，对抗原亲和力强，可应用于抗病毒药物的研究。
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公开(公告)号：CN117209595A
公开(公告)日：2023-12-12
申请号：CN202311124298.2
申请日：2023-09-01
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , A61K39/42 , A61P31/20 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种抗非洲猪瘟病毒（ASFV）P72蛋白中和活性抗体4F10及其应用。本发明利用杂交瘤细胞融合技术，成功获得一株特异性针对ASFV P72蛋白的中和活性单克隆抗体（4F10），在体外具有阻止ASFV感染敏感细胞的中和功能，对抗原亲和力强，可应用于抗病毒药物的研究。
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公开(公告)号：CN113956353B
公开(公告)日：2022-06-24
申请号：CN202111182911.7
申请日：2021-10-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 中国农业科学院都市农业研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种抗猪急性腹泻综合征冠状病毒（SADS‑CoV）N蛋白单克隆抗体。本发明将全长N蛋白基因克隆至pET32a载体中，构建出原核表达重组质粒pET32a‑N，通过诱导表达、蛋白纯化获得纯化的N蛋白。将纯化的N蛋白免疫Balb/c小鼠，随后取免疫鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤SP2/0细胞融合，筛选获得两个抗N蛋白的单克隆抗体，分别命名为4B10和6E8。通过截短表达，发现该抗体能特异性识别并结合N蛋白的N端区域，4B10和6E8识别区域是64～84aa。本发明提供的上述单克隆抗体，可利用基因工程或蛋白质工程方法获得。该抗体能特异性识别SADS‑CoV，对病毒还具有中和活性，为探究SADS‑CoV致病机制的研究、早期检测试剂盒和治疗性抗体的开发提供了新的原材料。
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公开(公告)号：CN114236128A
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN202111449947.7
申请日：2021-11-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 中国农业科学院都市农业研究所
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/535 , C07K14/165 , C07K16/10 , C12N15/70 , C12N15/50
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种检测猪急性腹泻综合征冠状病毒N蛋白抗体的阻断ELISA试剂盒。该试剂盒包括：包被有猪急性腹泻综合征冠状病毒N蛋白的酶标板、HRP标记的鼠抗猪急性腹泻综合征冠状病毒N蛋白单克隆抗体、阳性血清对照、阴性血清对照。该试剂盒最低能检出1:512稀释的阳性血清，并且与PEDV、TGEV和PDCoV等阳性血清无交叉反应，批内和批间重复变异系数小于10%。与间接免疫荧光试验的对比结果显示，本发明阻断ELISA试剂盒检测的符合率为99.6%，Kappa值为0.91，本发明建立的阻断ELISA方法与IFA高度一致。该方法操作简便、快速，可用于检测猪急性腹泻综合征冠状病毒抗体临床样本。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119638826A
公开(公告)日：2025-03-18
申请号：CN202411510897.2
申请日：2024-10-28
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , A61K39/42 , A61P31/14 , G01N33/543 , G01N33/531 , G01N33/569 , G01N33/577 , C12N15/13
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及快速检测猪流行性腹泻病毒（PEDV）的乳胶免疫层析试纸条及其制备方法。该试纸条包括PVC底板、样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫；硝酸纤维素膜上设有质控线C和检测线T。结合垫上喷涂乳胶微球标记的PEDV N蛋白单克隆捕获抗体，检测线T线处包被PEDV N蛋白单克隆检测抗体1E1，质控线C线处包被羊抗鼠IgG。本试纸条能特异性识别PEDV，且与临床症状相似的其他猪源肠道冠状病毒不发生反应。该试纸条特异性好、灵敏性较高、操作简单、10min内判读结果，相较于传统的胶体金检测技术，稳定性和显色效果得到了明显的提升。
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公开(公告)号：CN119510750A
公开(公告)日：2025-02-25
申请号：CN202411510920.8
申请日：2024-10-28
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: G01N33/543 , G01N33/569 , G01N33/577 , C07K16/10 , G01N33/531 , G01N33/58 , G01N33/533
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种快速鉴别猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）与猪流行性腹泻病毒（PEDV）的乳胶双联免疫层析试纸条及其制备方法。本发明利用原核表达系统分别获得具有免疫源性及反应性的可溶性TGEV N蛋白和PEDV N蛋白，以此为免疫源免疫小鼠，利用细胞融合和亚克隆筛选技术分别获得特异性TGEV N蛋白和PEDV N蛋白单克隆抗体。利用套式PCR扩增技术获得抗体可变区基因序列，后续可利用基因工程或蛋白质工程方法获得。然后再基于TGEV N蛋白和PEDV N蛋白特异性单克隆抗体研发出一种方便、快速且灵敏度高的检测TGEV和PEDV的乳胶双联免疫层析试纸条和制备方法。
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公开(公告)号：CN117209596B
公开(公告)日：2024-11-26
申请号：CN202311124301.0
申请日：2023-09-01
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , A61K39/42 , A61P31/20 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种抗非洲猪瘟病毒（ASFV）P72蛋白中和活性抗体2C9及其应用。本发明利用杂交瘤细胞融合技术，成功获得一株特异性针对ASFV P72蛋白的中和活性单克隆抗体2C9，2C9是一株构象依赖性单克隆抗体，在体外具有阻止ASFV感染敏感细胞的中和功能，对抗原亲和力强，可应用于抗病毒药物的研究。
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公开(公告)号：CN117683124A
公开(公告)日：2024-03-12
申请号：CN202311407892.2
申请日：2023-10-27
Applicant: 中国农业科学院都市农业研究所 , 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , A61K39/42 , A61P31/14 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及一种检测猪流行性腹泻病毒（PEDV）N蛋白抗体的阻断ELISA试剂盒。该试剂盒包括：包被有PEDV N蛋白的酶标板、HRP标记的PEDV N蛋白单克隆抗体、阳性血清对照、阴性血清对照。PEDV N蛋白单克隆抗体为1F10，单克隆抗体1F10重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示、轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。本发明试剂盒与常见猪腹泻相关病毒阳性血清无交叉反应，批内和批间重复变异系数小于10%。本发明阻断ELISA试剂盒与国外商品化试剂盒检测的符合率为98.79%，Kappa值为0.95，二者高度一致。
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公开(公告)号：CN114287389B
公开(公告)日：2022-09-02
申请号：CN202111534568.8
申请日：2021-12-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 中国农业科学院都市农业研究所
IPC: A01K67/027 , A61K49/00
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及一种猪急性腹泻综合征病毒感染小鼠模型构建方法及其应用。该方法采用颅内注射方式将猪急性腹泻综合征病毒感染7日龄以内小鼠，得到猪急性腹泻综合征病毒感染小鼠模型。采用本发明方法建立的SADS‑CoV感染小鼠模型，攻毒后实验小鼠临床症状清晰、典型、可重复性高，与新生猪感染的临床症状一致，可用于SADS‑CoV相关疾病的致病机制和免疫机理研究，以及抗病毒药物和疫苗的研发，有助于防控SADS‑CoV引起的疾病。
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