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公开(公告)号：CN117964779A
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202410066574.2
申请日：2024-01-16
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K19/00 , C12N15/81 , C07K1/22 , C07K1/34 , C07K1/36 , A61K39/215 , A61K39/385 , A61P31/14 , C12R1/84
Abstract: 本发明提供了一种猪流行性腹泻病毒S1蛋白三聚体纳米颗粒及其制备方法及应用，涉及病毒学和动物基因工程领域。所述S1蛋白三聚体纳米颗粒包括连接肽连接的猪流行性腹泻病毒的S1蛋白和天然蛋白质骨架蛋白，所述的天然蛋白质骨架蛋白为人I型(α)胶原蛋白C端前肽。本发明在制备所述S1蛋白三聚体纳米颗粒时，通过骨架蛋白连接肽连接猪流行性腹泻病毒结构蛋白S1，将其展示在纳米笼外部，由毕赤酵母表达系统表达，既有真核表达系统对蛋白的修饰作用，又兼顾了毕赤酵母表达系统表达效率高，成本低等优点。本发明的猪流行性腹泻病毒S1蛋白三聚体纳米颗粒极有潜力开发成为新的安全有效的猪流行性腹泻病毒疫苗。
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公开(公告)号：CN117866057A
公开(公告)日：2024-04-12
申请号：CN202311118643.1
申请日：2023-08-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/18 , C12N15/81 , A61K39/187 , A61K9/16 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种猪瘟病毒E2蛋白自组装纳米颗粒疫苗及其制备方法和应用，属于动物疫苗与兽用生物制品技术领域。本发明以完整的猪瘟病毒E2结构蛋白为抗原蛋白，以mi3为骨架蛋白，通过酵母表达系统融合表达，成功表达了一种猪瘟纳米颗粒融合蛋白，然后通过纳米组装，自发形成一种高度有序的含60个亚基的自组装纳米颗粒(正十二面体)，并将其命名为E2‑mi3NPs。本发明所制备的E2‑mi3NPs抗原具有安全性高、稳定性强、免疫效果良好、制备工艺简单、可展现抗原的构象表位等优势，能够从根本上净化猪瘟，具有较好的生产应用价值。
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公开(公告)号：CN117362401A
公开(公告)日：2024-01-09
申请号：CN202311255079.8
申请日：2023-09-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种牛病毒性腹泻病毒N蛋白及其作为自我切割蛋白在制备基因工程蛋白中的应用。本发明首先意外发现了一种具有自我切割蛋白活性的牛病毒性腹泻病毒N蛋白，所述牛病毒性腹泻病毒N蛋白在大肠杆菌中可高效自我切割，其编码基因可作为原核表达载体元件，在常用启动子载体中可高效表达，与目的蛋白融合可实现可溶性表达，且在表达过程中同时实现切割，产生具有真实N端氨基酸的活性目的蛋白；同时可利用凝胶过滤色谱或目的蛋下游的标签纯化上游标签去杂的策略，最终获得具有真实N端氨基酸的活性目的蛋白。
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公开(公告)号：CN116836298A
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202310530883.6
申请日：2023-05-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物医学领域，涉及一种可高效表达的重组单域抗体，所述重组单域抗体的氨基酸序列为在单域抗体的N端添加信号肽氨基酸序列，在单域抗体的C端设置终止密码子氨基酸序列所构成的氨基酸序列，所述单域抗体选自VHH1、VHH2、VHH3、VHH4、VHH5和VHH6中的一种或多种，所述信号太序列选自Azu、A2、HC、Secrecon、IFNα2和IL‑2中的一种或多种。本发明通过密码子优化和信号肽的添加，得到的单域抗体组合物不仅具有高生物活性，而且具有较高的蛋白质产量，可以满足单域抗体应用的前、中期要求。
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公开(公告)号：CN116676340A
公开(公告)日：2023-09-01
申请号：CN202310422901.9
申请日：2023-04-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/861 , C12N15/50 , C12N7/01 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供了一种包含猪流行性腹泻病毒(PEDV)免疫蛋白的重组腺病毒载体和毒株、疫苗和应用，属于生物制品技术领域。本发明提供了一种包含猪流行性腹泻病毒免疫蛋白的重组腺病毒载体，以人复制缺陷型腺病毒载体为骨架载体，包含S蛋白或S1蛋白的编码基因；所述S蛋白或S1蛋白来自PEDVGIIa毒株CH/HBXT/2018或GIIb毒株CH/HNPJ/2017。本发明构建了4种防控PEDV的疫苗，经BALB/c小鼠体内评价表明4种疫苗均能够引起强烈的细胞免疫和体液免疫，为预防当前流行的高毒力的PEDV毒株的感染提供了有效手段。
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公开(公告)号：CN115068601A
公开(公告)日：2022-09-20
申请号：CN202210520111.X
申请日：2022-05-12
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K39/39 , A61P37/04 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种含牛膝多糖的兽用疫苗递送系统及其制备方法。所述的递送系统由肉豆蔻酸异丙酯、角鲨烯、司盘80、吐温80、无水乙醇以及硫酸化与CpG ODN(CpG oligonucleotide,CpG寡脱氧核苷酸)共修饰的牛膝多糖组成。优选的，各物质的质量百分比分别为：60～63％肉豆蔻酸异丙酯、8～9.5％角鲨烯、6～7.5％司盘80、14～15％吐温80、7～8％无水乙醇以及1～2％硫酸化与CpG ODN共修饰的牛膝多糖。本发明的一种含牛膝多糖的兽用疫苗递送系统稳定性好，无明显毒副作用，能够提高抗原介导的免疫反应。本发明的兽用疫苗递送系统可采用磁悬磁悬搅拌制备疫苗，工艺简单，易于生产。
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公开(公告)号：CN114921495A
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN202210673666.8
申请日：2022-06-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 一种猪瘟病毒病毒样颗粒疫苗的制备方法，将编码完整的猪瘟病毒结构蛋白的基因通过重组载体分别转染哺乳动物细胞，或将编码完整的猪瘟病毒结构蛋白的基因构建到杆状病毒载体上，繁殖出重组载体杆状病毒P3代病毒，并分别感染昆虫细胞，在体外成功表达出重组猪瘟病毒样颗粒疫苗，将其命名为CSFVVLPs，以其作为抗原免疫动物，能够刺激机体产生抗猪瘟病毒的特异性抗体，所获得的重组猪瘟病毒样颗粒疫苗CSFVVLPs作为预防猪瘟的新型抗原。
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公开(公告)号：CN111979205B
公开(公告)日：2022-05-03
申请号：CN202010725839.7
申请日：2020-07-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/85 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种耐热型口蹄疫重组病毒株、由该病毒株制成的灭活疫苗及其应用。所述的一种耐热型口蹄疫重组病毒株，命名为rM3，其是由SEQ ID NO.1所示的感染性cDNA通过病毒拯救获得的。实验证明，该重组病毒株的衣壳完全裂解的温度比野生毒株病毒的高，表明该拯救获得的口蹄疫重组病毒株rM3比野生毒株更耐热。本发明的提出为进一步推进热稳定性疫苗的研究和应用，为重大疫病防控及彻底净化提供了技术支持。同时本发明的提出为制备稳定性口蹄疫疫苗奠定了基础。
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公开(公告)号：CN112190591B
公开(公告)日：2021-12-17
申请号：CN201910610793.1
申请日：2019-07-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K31/7088 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了核糖体蛋白RPL13抑制剂在制备抑制IRES‑依赖性翻译的病毒复制的药物中的应用。所述核糖体蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，或该SEQ ID No.1所示序列经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列。所述核糖体蛋白RPL13抑制剂优选为RPL13 siRNA。实验证明，敲降RPL13后的宿主细胞，攻口蹄疫病毒(FMDV)2‑8小时内，每两小时测量一次病毒产量，结果发现病毒产量分别下降了1.7倍、8倍、18倍和25倍，此外还证明其它小核糖核酸病毒科如塞内卡病毒(SVA)和黄病毒科如猪瘟病毒(CSFV)的复制也依赖于RPL13，而敲降RPL13对宿主细胞的大体翻译活性没有影响。本发明提供了一种能够抑制IRES‑依赖性翻译的病毒复制的新药物，在生物医学领域将具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN111303251A
公开(公告)日：2020-06-19
申请号：CN202010116531.2
申请日：2020-02-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/09 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种口蹄疫病毒样颗粒体外组装的方法及其应用，涉及畜牧兽医技术领域。本发明利用口蹄疫病毒自身基因片段促进口蹄疫病毒样颗粒的体外组装，选择口蹄疫自身基因片段5′UTR和具有特殊二级结构的IRES作为组装病毒样颗粒的支架，模拟口蹄疫病毒的体内组装，以提高口蹄疫病毒样颗粒的体外组装效率。本发明所述5′UTR有利于病毒样颗粒(75S)的形成，而IRES更有利于五聚体(12S)的形成；病毒样颗粒对口蹄疫自身的基因片段具有保护作用；而且经组装后形成的组装产物与天然结构的病毒粒子结构类似，可用于制备口蹄疫相关疫苗。
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