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公开(公告)号:CN118130808A
公开(公告)日:2024-06-04
申请号:CN202410181881.5
申请日:2024-02-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 兰州兽研生物科技有限公司
Inventor: 刘新生 , 林密 , 包艳芳 , 张莉萍 , 潘丽 , 何莉 , 王永录 , 李善涛 , 方玉珍 , 潘晓乐 , 周鹏 , 蒋涛 , 张中旺 , 李昕 , 吕建亮 , 孙燕燕 , 杨光 , 郭慧琛 , 张永光
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N21/76
Abstract: 本发明提供了一种基于N蛋白的检测猪流行性腹泻病毒抗体管式磁微粒化学发光试剂盒,属于体外诊断产品技术领域。所述试剂盒包括偶联有猪流行性腹泻病毒N蛋白的磁微粒悬浊液和酶标抗体溶液。与商品ELISA检测试剂盒相比,本发明提供的基于N蛋白检测猪流行性腹泻病毒抗体试剂盒不仅能高特异性、高准确性的定量检测猪血清中猪流行性腹泻病毒的抗体,并且具有自动化、高敏感性、高重复性检测特点,具有较高的市场竞争力。
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公开(公告)号:CN118112255A
公开(公告)日:2024-05-31
申请号:CN202410181877.9
申请日:2024-02-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 兰州兽研生物科技有限公司
Inventor: 刘新生 , 林密 , 包艳芳 , 张莉萍 , 潘丽 , 何莉 , 王永录 , 李善涛 , 方玉珍 , 潘晓乐 , 周鹏 , 蒋涛 , 张中旺 , 李昕 , 吕建亮 , 孙燕燕 , 杨光 , 郭慧琛 , 张永光
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N21/76
Abstract: 本发明提供了一种检测猪德尔塔冠状病毒抗体管式磁微粒化学发光试剂盒及其应用,属于体外诊断产品技术领域。所述试剂盒包括偶联猪德尔塔冠状病毒N蛋白的磁微粒悬浊液和酶标抗体溶液。与商品ELISA检测试剂盒相比,本发明提供的基于N蛋白检测猪德尔塔冠状病毒抗体试剂盒不仅能高特异性、高准确性的检测猪血清中猪德尔塔冠状病毒的抗体,并且具有自动化、高敏感性、高重复性检测特点,具有较高的市场竞争力。
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公开(公告)号:CN119667152A
公开(公告)日:2025-03-21
申请号:CN202411846827.4
申请日:2024-12-16
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N33/58 , C07K16/10
Abstract: 本发明公开了一种基于S蛋白单克隆抗体的猪δ‑冠状病毒双抗夹心ELISA检测试剂盒、其使用方法及应用。采用ExpiCHO表达系统表达PDCoV S蛋白,然后将纯化的S蛋白作为免疫原免疫小鼠,获得单克隆抗体。然后,分别使用单克隆抗体3D7和HRP标记的MAb 9G4作为捕获和检测抗体,建立了双抗体夹心ELISA试剂盒。该试剂盒具有良好的灵敏度,对纯化的S蛋白的检测限为0.12ng/mL,对PDCoV的检测限为1.96×103copies/μL。特异性分析表明,所述试剂盒与其他在临床症状上与PDCoV相似的猪肠道冠状病毒PEDV、TGEV和PoRV无交叉反应性,且与RT‑PCR方法的一致性达到91.03%,Kappa值为0.814,表明该试剂盒用于临床样品检测的可靠性。此外,该试剂盒还可以定量评价PDCoV灭活疫苗和亚单位疫苗中S蛋白的含量,为评价这些疫苗提供了有力的工具。
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公开(公告)号:CN104894045B
公开(公告)日:2018-08-10
申请号:CN201510258195.4
申请日:2015-05-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N1/21 , C12N15/74 , C12N15/62 , C12N15/42 , C12N15/24 , A61K48/00 , A61K39/39 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种共表达口蹄疫病毒VP1基因与免疫佐剂牛IL‑6基因的重组乳酸杆菌及其制备方法和应用,属于生物技术领域。本发明对乳酸杆菌信号肽的结构进行改造,将改造的乳酸杆菌信号肽基因借一连接短肽GSGGSGG与口蹄疫病毒VP1基因进行连接,连接后的基因序列再与免疫佐剂牛IL‑6基因序列进行融合,融合后的基因序列插入大肠杆菌‑乳酸菌穿梭表达载体中,构建重组质粒pSIP/Asia1/VP1/IL‑6,将pSIP/Asia1/VP1/IL‑6重组质粒转化至乳酸杆菌。本发明针对重组乳酸杆菌表达系统,适当改造信号肽结构以提高乳酸杆菌中外源蛋白的分泌效率,通过黏膜免疫途径免疫实验动物,研究该疫苗的黏膜免疫情况,为研发新型口蹄疫黏膜免疫疫苗提供实验基础。
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公开(公告)号:CN106435022A
公开(公告)日:2017-02-22
申请号:CN201610842567.2
申请日:2016-09-23
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2537/143
Abstract: 本发明提供A型和O型口蹄疫病毒特异性引物,具体序列为序列表中SEQ ID No.1-6。本发明还提供A型和O型口蹄疫病毒检测的试剂盒。本发明较经典的病毒分离、单RT-PCR和血清型分型方法快捷。本发明可以相当方便地一次性利用3D基因序列鉴定出是否存在口蹄疫感染,而特异性的A型和O型引物可以特异性的鉴定是否是A型或O型口蹄疫病毒感染,可以及时快捷的对疫病情况及区域、环境做出及时快捷的反应,这对及时扑灭或阻断传染病的传播具有积极的意义。另外,本发明具有快速、简单、成本低和所需试剂少的特点,特别适于小样品的提取。因此,本发明具有广泛的市场应用前景。
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公开(公告)号:CN105400782A
公开(公告)日:2016-03-16
申请号:CN201510901924.3
申请日:2015-12-09
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了同时鉴定三种猪流行性腹泻病毒毒株的引物组合,所述引物组合由4个特异性引物组成,分别为:上游引物F1、上游引物F2、上游引物F3、下游引物UR;并提供了使用上述引物组合的同时鉴定三种猪流行性腹泻病毒的通用型半套式RT-PCR方法。本发明的有益效果为:本发明提供的同时鉴定三种猪流行性腹泻病毒毒株的引物组合和通用型半套式RT-PCR方法,可以通过一种方法,在一次试验中同时鉴定并区别目前已报道出现的全部三种猪流行性腹泻病毒毒株,是世界上首次建立的一种能够同时检测三种不同基因型猪流行性腹泻病毒流行毒株的检测方法,为今后该病毒的鉴别及临床诊断提供新的、有效的检测方法。
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公开(公告)号:CN103193869A
公开(公告)日:2013-07-10
申请号:CN201310109630.8
申请日:2013-03-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/09 , C07K1/04 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种牛口蹄疫病毒A型合成肽,它具有以下氨基酸序列:acetyl-YDLDFEALKPHFKSLGQTITPADKSPPSVYNGTCKYSAPATRRGDLGSLAARLAACLPASFNYGAIRAT–amide。本发明合成的牛口蹄疫病毒A型合成肽,能够做为生产实践中有效的A型口蹄疫新型疫苗使用;同时,本实验的完成为进一步完善口蹄疫A型合成肽疫苗的构建以及口蹄疫其他亚型合成肽疫苗的构建奠定了一定的基础,在合成肽疫苗研究过程中所提出的新思路及其新方法的建立都将为今后进一步完善多抗原肽、多价肽以及联合肽疫苗的开发研究提供理论依据和技术支持。
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公开(公告)号:CN119019549B
公开(公告)日:2025-04-15
申请号:CN202411439904.4
申请日:2024-10-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种抗猪δ冠状病毒中和活性纳米抗体及其应用。本发明利用噬菌体展示技术构建了PDCoV S蛋白的纳米文库,并筛选获得了可与PDCoV以及S蛋白具有高度亲和力的特异性纳米抗体Nb1、Nb3或Nb8。进一步地以Nb3为基础,建立了一种用于临床快速、高效地检测PDCoV抗体的竞争ELISA方法。此外,体内外中和活性评价结果显示,Nb3抗PDCoV的中和效价可达到1:128,在攻毒前后分别随牛奶口服给药仔猪5mg/ml Nb3能够显著降低仔猪腹泻发病率,保护3/5的仔猪免受PDCoV强毒株的攻击。因此,本发明所筛选的抗PDCoV特异性纳米抗体Nb3,将为PDCoV的临床防控提供一种技术和材料支撑。
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公开(公告)号:CN119019549A
公开(公告)日:2024-11-26
申请号:CN202411439904.4
申请日:2024-10-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种抗猪δ冠状病毒中和活性纳米抗体及其应用。本发明利用噬菌体展示技术构建了PDCoV S蛋白的纳米文库,并筛选获得了可与PDCoV以及S蛋白具有高度亲和力的特异性纳米抗体Nb1、Nb3或Nb8。进一步地以Nb3为基础,建立了一种用于临床快速、高效地检测PDCoV抗体的竞争ELISA方法。此外,体内外中和活性评价结果显示,Nb3抗PDCoV的中和效价可达到1:128,在攻毒前后分别随牛奶口服给药仔猪5mg/ml Nb3能够显著降低仔猪腹泻发病率,保护3/5的仔猪免受PDCoV强毒株的攻击。因此,本发明所筛选的抗PDCoV特异性纳米抗体Nb3,将为PDCoV的临床防控提供一种技术和材料支撑。
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公开(公告)号:CN109232720B
公开(公告)日:2021-11-23
申请号:CN201811068030.0
申请日:2018-09-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/09 , C12N15/42 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种口蹄疫O型病毒sIgA抗体的ELISA检测试剂盒及其应用。所述的试剂盒包括口蹄疫O型病毒广谱多表位重组抗原包被的酶标反应板,100×浓缩酶标抗体、酶标抗体稀释液、样品稀释液、浓缩洗涤液、显色液、终止液、阳性对照样品和阴性对照样品。所述的口蹄疫O型病毒广谱多表位重组抗原由中国型(Cathay)、泛亚型(PanAsia)、缅甸98三个谱系口蹄疫O型病毒代表毒株的主要中和性抗原表位组成,因此提高了试剂盒检测的灵敏性和特异性,并且适用于不同的口蹄疫O型病毒感染的检测。本发明提供的试剂盒适于检测猪、牛、羊三种易感动物黏膜分泌物中的sIgA抗体,对于防治口蹄疫O型病毒的传播和感染具有重要的意义。
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