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公开(公告)号：CN108220319A
公开(公告)日：2018-06-29
申请号：CN201810093583.5
申请日：2018-01-31
Applicant: 北京工业大学
Abstract: 大肠杆菌中具有产氢功能基因的载体pET32a‑fdhF‑1及其构建和应用，涉及基因工程技术领域。pET32a‑fdhF‑1基因载体为包含有大肠杆菌BL21甲酸脱氢酶fdhF基因的pET32a质粒。其构建是通过设计引物扩增大肠杆菌BL21的甲酸脱氢酶(formate dehydrogenase H)的fdhF基因片段，并通过T4 DNA连接酶将其连接到酶切后的pET32a载体中，命名为pET32a‑fdhF‑1，进行基因测序，验证基因的完整性。将pET32a‑fdhF‑1质粒转化到大肠杆菌中，在产氢培养基中进行培养产氢。转入载体pET32a‑fdhF‑1能提高大肠杆菌产氢效率。
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公开(公告)号：CN106755044A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201710163682.1
申请日：2017-03-19
Applicant: 北京工业大学
CPC classification number: C12N15/70 , C12N9/0008 , C12N15/66 , C12N2800/101 , C12P3/00 , C12Y102/01002
Abstract: 高效产氢功能基因载体pET32a‑fdhF及其构建和应用涉及基因工程技术领域。pET32a‑fdhF基因载体为包含有蜡状芽孢杆菌甲酸脱氢酶fdhF基因的pET32a质粒。其构建是通过设计引物扩增蜡状芽孢杆菌中甲酸脱氢酶fdhF基因片段，并用重组酶将其连接到含有对应连接末端的pET32a片段中，进行基因测序，验证基因的完整性。将pET32a‑fdhF质粒转化到细菌中，在产氢培养基中培养此细菌生产氢气。pET32a‑fdhF能够应用于不同细菌中，既能使不产氢的细菌产氢，也能使产氢的细菌的产氢效率明显提高，消耗同样的底物浓度能产生更快更多的氢气。也能够改良现有工业产氢的大肠杆菌。
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公开(公告)号：CN106755044B
公开(公告)日：2020-10-16
申请号：CN201710163682.1
申请日：2017-03-19
Applicant: 北京工业大学
Abstract: 高效产氢功能基因载体pET32a‑fdhF及其构建和应用涉及基因工程技术领域。pET32a‑fdhF基因载体为包含有蜡状芽孢杆菌甲酸脱氢酶fdhF基因的pET32a质粒。其构建是通过设计引物扩增蜡状芽孢杆菌中甲酸脱氢酶fdhF基因片段，并用重组酶将其连接到含有对应连接末端的pET32a片段中，进行基因测序，验证基因的完整性。将pET32a‑fdhF质粒转化到细菌中，在产氢培养基中培养此细菌生产氢气。pET32a‑fdhF能够应用于不同细菌中，既能使不产氢的细菌产氢，也能使产氢的细菌的产氢效率明显提高，消耗同样的底物浓度能产生更快更多的氢气。也能够改良现有工业产氢的大肠杆菌。
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公开(公告)号：CN107354167A
公开(公告)日：2017-11-17
申请号：CN201710562278.1
申请日：2017-07-11
Applicant: 北京工业大学
CPC classification number: C12N9/20 , C12N15/70 , C12Y301/01003
Abstract: 高效降解油脂功能基因载体及其构建和应用涉及基因工程技术领域。基因载体pMAL-p5X-lipase为包含有蜡状芽孢杆菌脂肪酶基因lipase的pMAL质粒。其构建过程是通过设计引物扩增蜡状芽孢杆菌中脂肪酶基因lipase片段，并用重组酶将其连接到malE基因下游，进行基因测序，验证基因的完整性。将pMAL-p5X-lipase质粒转化到细菌中，在加入油的试管中测定此细菌降解脂肪能力。pMAL载体用于pMAL蛋白融合表达和纯化系统，含有Ptac强启动子、MBP起始翻译信号及多克隆位点，能够将目的基因与malE基因(编码MBP蛋白)融合表达。pMAL-p5X载体含有malE信号肽序列，它将引导融合蛋白穿越质膜，能够以大肠杆菌为宿主菌进行基因表达。
