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公开(公告)号：CN118146391A
公开(公告)日：2024-06-07
申请号：CN202410286140.3
申请日：2024-03-13
Applicant: 安徽工程大学
Abstract: 本发明涉及生物合成技术领域，具体涉及一种分泌表达人乳铁蛋白的毕赤酵母及其构建方法和应用。本发明首先筛选源自亚洲人种的乳铁蛋白氨基酸序列，基于已报道的不同人种的乳铁蛋白晶体结构，截断乳铁蛋白氨基酸端的信号肽序列。然后，筛选酵母表达分泌蛋白所用信号肽替换乳铁蛋白氨基端的信号肽，形成一条新的分泌型人乳铁蛋白氨基酸序列，并将该序列编码的基因通过CRISPR‑Cas9整合到毕赤酵母基因组位点。最后，通过优化人乳铁蛋白表达框的拷贝数，获得一株高效分泌表达人乳铁蛋白的毕赤酵母。本发明建立了一种高分泌表达人乳铁蛋白的毕赤酵母构建方法，为工业化制备人乳铁蛋白提供了一种非常有前景的工程菌株。
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公开(公告)号：CN117843740A
公开(公告)日：2024-04-09
申请号：CN202311612177.2
申请日：2023-11-29
Applicant: 安徽工程大学 , 新宇药业股份有限公司
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种游动放线菌来源的转录因子AcaR、基因、重组菌及其制备方法和应用，所述AcaR的氨基酸序列如SEQ IDNo.1所示，所述AcaR的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明基于比较转录组学分析，挖掘得到了转录因子AcaR，有着调控阿卡波糖合成的能力。构建的重组游动放线菌ZFAC/AcaR发酵7天后能够生产阿卡波糖4.86g/L，相对于出发菌株ZFAC提高了20.8％。本发明发现并验证了转录因子AcaR对于游动放线菌合成阿卡波糖具有明显的正调控作用，对于基于转录水平调控阿卡波糖的生物合成具有一定的借鉴意义。
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公开(公告)号：CN118010686A
公开(公告)日：2024-05-10
申请号：CN202311835218.4
申请日：2023-12-28
Applicant: 安徽工程大学
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种定向进化衣康酸生物传感器识别赖氨酸的方法及应用，所述方法是先从识别衣康酸的转录因子YpItcR及其调控的启动子Pccl出发，构建衣康酸生物传感器模型质粒YpItcR/Pccl‑mrfp1；之后采用易错PCR扩增YpItcR基因，并以YpItcR/Pccl‑mrfp1为模板扩增带有启动子Pccl和mrfp1报告蛋白基因的线性化质粒骨架，通过组装环化以构建YpItcR基因突变子质粒文库；然后建立高通量筛选方法，获得敏感性识别赖氨酸的突变子LYS‑5。本发明为氨基酸生物传感器定制提供新方法，也为赖氨酸工业菌株进化及高通量筛选提供生物传感器元器件。
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公开(公告)号：CN117802141A
公开(公告)日：2024-04-02
申请号：CN202311561776.6
申请日：2023-11-22
Applicant: 安徽工程大学 , 新宇药业股份有限公司
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种提高弗氏链霉菌合成新霉素的方法，包括如下步骤：步骤一、通过比较转录组学分析并挖掘得到调控新霉素转录因子NecR；步骤二、利用引物对扩增得到编码所述转录因子NecR的基因的核苷酸序列，并将编码所述转录因子NecR的基因的核苷酸序列连接至表达载体构建得到重组质粒；步骤三、通过接合转移方法构建弗氏链霉菌接合转移体系，以得到重组弗氏链霉菌；步骤四、将重组弗氏链霉菌经平板划线培育、培养基培养发酵合成新霉素。本发明基于比较转录组学分析，挖掘得到了转录因子NecR，可能有着调控新霉素合成的能力。
