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公开(公告)号:CN106071076A
公开(公告)日:2016-11-09
申请号:CN201610474777.0
申请日:2016-06-27
申请人: 崔玉宝
摘要: 本发明公开了一种利用粉尘螨饲养普通肉食螨的方法,首先将饲养容器灭菌烘干,加入质量比为5~20∶1~4∶0~3的面粉、鱼骨粉和酵母粉作为饲养食料,饲养食料占饲养容器高的1/5~3/5;然后将粉尘螨作为猎物螨接入到饲养容器中饲养,当猎物螨重口密度≥100头/克时,接入普通肉食螨,其中猎物螨与普通肉食螨的饲养比为20∶1~100∶1;饲养15~60天后获得完全无猎物螨的普通肉食螨或者饲养至普通肉食螨重口密度≥80头/g时分容器继续繁殖;以上步骤的饲养温度17℃~28℃,相对湿度65%~85%。本发明饲养方法简单、高效、成本低,适合规模化进行生产。
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公开(公告)号:CN106350522A
公开(公告)日:2017-01-25
申请号:CN201610945970.8
申请日:2016-11-02
申请人: 崔玉宝
IPC分类号: C12N15/12 , C12N15/70 , C07K14/435 , G01N33/68
CPC分类号: C07K14/43531 , C12N15/70 , C12N2800/101 , G01N33/68 , G01N2333/43582
摘要: 本发明公开了一种腐食酪螨新发现过敏原Try p 28、Try p 35和Try p 36基因克隆表达纯化方法及其应用,本申请通过采用特定的引物和特定的纯化方法来制备重组蛋白。本发明的方法所得到的纯化产物纯度高,阳性率高,能够作为临床诊断试剂使用,具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN103923894B
公开(公告)日:2016-06-08
申请号:CN201410148757.5
申请日:2014-04-14
摘要: 本发明提供了一种粉尘螨变应原Der f4基因编码的蛋白质及其应用,根据该基因分别构建原核表达质粒pET-28b-Der f4和真核表达质粒pGAPZα-A-Der f4,制备其重组蛋白。本发明具有以下优点:本发明得到了粉尘螨变应原Der f4全长基因序列,并根据该基因序列制备得到重组蛋白,编码的重组蛋白纯度高、特异性较好、产量丰富。本发明可以应用于诊断患者是否因为粉尘螨变应原第4组分引起的过敏性疾病。
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公开(公告)号:CN107043805A
公开(公告)日:2017-08-15
申请号:CN201611145577.7
申请日:2017-04-05
申请人: 崔玉宝
IPC分类号: C12Q1/68
摘要: 本发明公开了一种屋尘螨过敏原Der p 1的LAMP(环介导等温扩增可视化Loop mediated isothermal amplication)检测方法,包括以下步骤:活屋尘螨经研钵研碎、组织匀浆器制成匀浆后,提取总RNA保存备用;RT‑LAMP反应体系及其优化;进一步RT‑PCR扩增;RT‑LAMP可视化检测。本发明的屋尘螨过敏原Der p 1环介导等温扩增可视化检测方法,实现屋尘螨过敏原Der p 1环介导的可视化检测,检测结果肉眼可见。本发明的检测方法,简单易行,检测结果便于观察,且灵敏度高。
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公开(公告)号:CN105949298A
公开(公告)日:2016-09-21
申请号:CN201610397041.8
申请日:2016-06-06
申请人: 崔玉宝
发明人: 崔玉宝
IPC分类号: C07K14/435 , C12N15/12 , C12N15/10 , C12N15/70 , G01N33/68
CPC分类号: C07K14/43531 , G01N33/6893 , G01N2333/43582 , G01N2800/24
摘要: 本发明公开了尘螨变应原Der f9基因重组蛋白及其应用,所述的重组蛋白氨基酸序列如SEQ ID No:2所示。本发明还公开了重组蛋白质制备方法及其应用。本发明具有以下优点:本发明得到了粉尘螨变应原Der f9全长基因序列,并根据该基因序列制备得到重组蛋白,编码的重组蛋白纯度高、特异性较好、产量丰富。本发明可以应用于诊断患者是否因为粉尘螨变应原第9组分引起的过敏性疾病。
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公开(公告)号:CN103923894A
公开(公告)日:2014-07-16
申请号:CN201410148757.5
申请日:2014-04-14
CPC分类号: C12N9/2414 , C12Y302/01001 , G01N33/573 , G01N2333/928 , G01N2800/24
摘要: 本发明提供了一种粉尘螨变应原Der f4基因编码的蛋白质及其应用,根据该基因分别构建原核表达质粒pET-28b-Der f4和真核表达质粒pGAPZα-A-Der f4,制备其重组蛋白。本发明具有以下优点:本发明得到了粉尘螨变应原Der f4全长基因序列,并根据该基因序列制备得到重组蛋白,编码的重组蛋白纯度高、特异性较好、产量丰富。本发明可以应用于诊断患者是否因为粉尘螨变应原第4组分引起的过敏性疾病。
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公开(公告)号:CN102676568A
公开(公告)日:2012-09-19
申请号:CN201210139240.0
申请日:2012-05-08
摘要: 一种生产重组粉尘螨变应原Der f1和Der f2融合蛋白的方法,它涉及生物学技术构建粉尘螨变应基因技术领域。它通过提取粉尘螨总RNA,用PCR扩增获得其编码基因,切胶回收产物并命名为Der fm,克隆至pMD19-T载体、亚克隆至表达载体pET-28a(+)并转化至大肠杆菌并用IPTG诱导表达。它耗时短,过程简单,成本较低,可以彻底去除溶剂等成份,从根本上提高变应原的纯度,避免免疫治疗中副反应的发生,其纯度高,分类明确,可提高诊断的准确度,并有望为新型免疫治疗提供标准化制品。
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公开(公告)号:CN107056912A
公开(公告)日:2017-08-18
申请号:CN201611145747.1
申请日:2016-12-13
申请人: 崔玉宝
IPC分类号: C07K14/435 , C12N15/12 , C12N15/866 , C12N5/10 , G01N33/68 , G01N33/535
CPC分类号: C07K14/43531 , C12N15/86 , C12N2710/14043 , G01N33/535 , G01N33/68
摘要: 本发明公开了一种利用夜蛾细胞生产尘螨过敏原重组蛋白的方法,包括以下步骤:质粒pFastBacHT A‑Der f 1、pFastBacHT A‑Der f 2、pFastBacHT A‑Der f 4载体构建及鉴定:重组杆状病毒质粒转座及重组Bacmid鉴定;13)重组Bacmid转染及重组病毒扩增;重组蛋白纯化;重组蛋白复性;重组蛋白的免疫反应性。本发明的一种利用夜蛾细胞生产尘螨过敏原重组蛋白的方法,通过实现尘螨过敏原Der f 1、Der f 2和Der f 4在昆虫细胞中表达与纯化,通过ELISA验证重组蛋白的免疫反应性,该方法获得的重组蛋白纯度高,复性好,能够更精确地实现对环境中尘螨过敏原的检测,医疗和实用价值很高,为定量监测环境中尘螨过敏原含量提供了重要的方法途径。
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公开(公告)号:CN206570698U
公开(公告)日:2017-10-20
申请号:CN201720220343.8
申请日:2017-03-08
申请人: 崔玉宝
发明人: 崔玉宝
IPC分类号: E01D19/14 , E01D101/28
摘要: 本实用新型公开了一种公路桥梁施工用预应力锚具,包括波纹管、墙面和油缸,所述波纹管上连接有分线圈,所述分线圈内左侧固定有锚垫板,且锚垫板内设置有钢绞索,所述锚板外侧安装有连接圈,所述油缸上端设置有加油口,所述油缸内安装有挡油板,所述挡油板外侧包裹有活塞,所述限位槽内安装有伸缩杆,且伸缩杆外侧固定有限位块。该公路桥梁施工用预应力锚具设有挡油板,能够避免在拉动钢绞索时液压油与钢绞索接触,在拉紧后可将限位块拉出,确保在产生限位作用后限位块不会歪斜弹出,该预应力锚具结构简单,使用方便,能够在拉紧钢绞索后避免其回弹,最大程度保留预应力,适用面更广,延长混凝土建筑的使用寿命。
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