本发明公开了一种嗜热糖化酶表达盒及其应用。本发明所提供的嗜热糖化酶表达盒，依次含有黑曲霉糖化酶基因5′侧翼区、嗜热糖化酶基因、黑曲霉糖化酶基因3′侧翼区、启动子、筛选标记基因、终止子和所述黑曲霉糖化酶基因3′侧翼区；所述黑曲霉糖化酶基因5′侧翼区选自黑曲霉糖化酶基因5’端至少1500的DNA片段；所述黑曲霉糖化酶基因3′侧翼区选自黑曲霉糖化酶基因3’端至少1500的DNA片段；所述黑曲霉糖化酶基因5′侧翼区含有黑曲霉糖化酶基因启动子。本发明的嗜热糖化酶表达载体导入黑曲霉中可生产嗜热糖化酶。