本发明涉及β-兴奋剂沙丁胺醇、盐酸克伦特罗二元检测测试条及其制备方法，有效解决快速、简便同时检测出β-兴奋剂沙丁胺醇、盐酸克伦特罗的问题，方法是，基材PVC板上面自前向后依次设置有引水玻璃纤维、载体玻璃纤维、硝酸纤维膜和吸水棉浆板，引水玻璃纤维、载体玻璃纤维和吸水棉浆板上面覆盖有由前部覆盖膜和后部覆盖膜组成的覆膜，测试条前部载体玻璃纤维上吸附有抗沙丁胺醇蛋白质偶联物、抗盐酸克伦特罗蛋白质偶联物单克隆抗体胶体金标记物；中部硝酸纤维膜上自后向前分布有一条包被有兔抗鼠多抗的质控线，二条分别包被有沙丁胺醇蛋白质偶联物、盐酸克伦特罗蛋白质偶联物的检测线，本发明有效用于同时检测沙丁胺醇、盐酸克伦特罗，方便、快捷，结果准确。