本发明涉及一种通过基因工程方法制备的全血INF-γ的特异性抗原蛋白、其制备方法及用途，以及涉及编码该蛋白的核苷酸序列、重组载体和重组子。本发明的抗原蛋白为通过连接肽将ESAT-6、CFP-10和MPB64以任意顺序连接后获得的融合蛋白，其中所述的连接肽为不影响ESAT-6、CFP-10和MPB64免疫原性的短肽。本发明提供的结核病特异抗原在诊断结核病时诊断需时短、快速，且敏感性强、特异性高，对结核病的早期诊断有重要意义。