本发明公开了阿扑西林三水合物的制备方法：一、D-天冬氨酸和BTC在甲醇中反应，反应后，加入溶剂，析出天冬氨酸-β-甲酯盐酸盐；二、天冬氨酸-β-甲酯盐酸盐和甲胺溶液反应，生成D-天冬氨酸-β-甲酰胺；反应后，滴加溶剂，析出D-天冬氨酸-β-甲酰胺粗品；D-天冬氨酸-β-甲酰胺粗品经过重结晶后烘干，得D-天冬氨酸-β-甲酰胺；三、D-天冬氨酸-β-甲酰胺和BTC在溶剂中反应，生成D-天冬氨酸-N-环状酸酐；反应后，加入溶剂，析出D-天冬氨酸-N-环状酸酐；四、D-天冬氨酸-N-环状酸酐和阿莫西林在乙腈和氢氧化钠水溶液的溶剂中发生反应，脱去一分子二氧化碳，制得阿扑西林粗品；阿扑西林粗品经过脱色、重结晶、过滤、烘干、得到阿扑西林三水合物。