本发明公开了一种延长糙皮侧耳菌种贮藏寿命的方法，发明人通过在液体培养基中添加海藻糖延长了糙皮侧耳菌种贮藏寿命。该方法包括液体培养基的配制→接种→菌丝培养→离心→再悬浮→短期培养→再离心→常温贮藏→使用前常温下活化菌种→接种于原种或栽培养种等步骤。本发明涉及到三种培养基，培养基A用于菌丝培养，培养基B用于菌丝贮藏，培养基C用于菌种使用前的活化。本发明实现了常温贮藏糙皮侧耳，具有占用空间小、节约电能、节约了续代接种的材料与劳动力、货架寿命长和运输方便等优点。