本发明一种米曲霉分泌制备锰过氧化物酶的方法，涉及生物工程领域。涉及利用秸秆为主要原料，通过米曲霉（Aspergillus oryzae）发酵，生产锰过氧化物酶的方法，其生产工艺流程是秸秆经过粉碎、预湿等预处理工艺，米曲霉经过液体摇瓶培养、一级种子培养、与秸秆混合进行固态发酵，得到含有锰过氧化物酶的秸秆发酵物，酶活性3～1000U/g干发酵物，发酵物经过水提取、分子截留、冷冻干燥可以获得酶制剂粗品,酶活性达到1000～10000U/g干粗品。此发酵工艺简便，不会对环境造成污染，也不会对资源造成浪费。采用此方法制得的锰过氧化物酶可以用于降解木质素大分子结构、释放小分子物质，提高含有木质素秸秆的消化利用率，从而有助于提高秸秆的饲用价值。