表达木质素过氧化物酶的大肠杆菌工程菌、制备方法及其应用
摘要:
本发明涉及一种大肠杆菌工程菌,本发明还提供一种大肠杆菌工程菌的制备方法,步骤是克隆黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶的基因的cDNA,双酶切上述cDNA,将酶切片段连接pCold-TF载体,鉴定得到的质粒pCold-TF-LiP是否阳性表达,将阳性质粒pCold-TF-LiP导入至大肠杆菌BL21感受态细胞中,获得表达木质素过氧化物酶的大肠杆菌工程菌,本发明还提供大肠杆菌工程菌的应用,方法是将大肠杆菌工程菌接种于液体培养基,液体培养基中加入氨苄青霉素,培养至OD600为0.58~0.62,加入蛋白诱导剂IPTG,诱导重组蛋白表达,本发明的大肠杆菌工程菌表达量高,活性极强,酶活为3528U/L。
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