表达木质素过氧化物酶的大肠杆菌工程菌、制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN103540606B

    公开(公告)日:2015-09-23

    申请号:CN201310544399.5

    申请日:2013-11-06

    申请人: 湖南大学

    摘要: 本发明涉及一种大肠杆菌工程菌,本发明还提供一种大肠杆菌工程菌的制备方法,步骤是克隆黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶的基因的cDNA,双酶切上述cDNA,将酶切片段连接pCold-TF载体,鉴定得到的质粒pCold-TF-LiP是否阳性表达,将阳性质粒pCold-TF-LiP导入至大肠杆菌BL21感受态细胞中,获得表达木质素过氧化物酶的大肠杆菌工程菌,本发明还提供大肠杆菌工程菌的应用,方法是将大肠杆菌工程菌接种于液体培养基,液体培养基中加入氨苄青霉素,培养至OD600为0.58~0.62,加入蛋白诱导剂IPTG,诱导重组蛋白表达,本发明的大肠杆菌工程菌表达量高,活性极强,酶活为3528 U/L。

    具有潮汐特性的多级自由跌水湿地单元及污水处理系统

    公开(公告)号:CN103408144B

    公开(公告)日:2014-11-26

    申请号:CN201310318678.X

    申请日:2013-07-26

    申请人: 湖南大学

    IPC分类号: C02F3/32

    CPC分类号: Y02W10/18

    摘要: 一种具有潮汐特性的多级自由跌水湿地单元及污水处理系统,多级自由跌水湿地单元包括多级自由跌水湿地,相邻自由跌水湿地设有自由跌水高度落差,各自由跌水湿地均设有溢水口和排水孔,各自由跌水湿地的排水孔位于溢水口下方,上级自由跌水湿地的蓄水量高于溢水口时水流自溢水口和排水孔流向下级自由跌水湿地,上级自由跌水湿地的蓄水量低于溢水口时水流自排水孔流向下级自由跌水湿地;污水处理系统包括分流控制装置和两个以上多级自由跌水湿地单元,由分流控制装置控制向各个多级自由跌水湿地单元间歇供应污水。该多级自由跌水湿地单元及污水处理系统同时具备跌水水体充氧和潮汐湿地基质充氧两种功能,污水处理效率高、经济环保。

    具有潮汐特性的多级自由跌水湿地单元及污水处理系统

    公开(公告)号:CN103408144A

    公开(公告)日:2013-11-27

    申请号:CN201310318678.X

    申请日:2013-07-26

    申请人: 湖南大学

    IPC分类号: C02F3/32

    CPC分类号: Y02W10/18

    摘要: 一种具有潮汐特性的多级自由跌水湿地单元及污水处理系统,多级自由跌水湿地单元包括多级自由跌水湿地,相邻自由跌水湿地设有自由跌水高度落差,各自由跌水湿地均设有溢水口和排水孔,各自由跌水湿地的排水孔位于溢水口下方,上级自由跌水湿地的蓄水量高于溢水口时水流自溢水口和排水孔流向下级自由跌水湿地,上级自由跌水湿地的蓄水量低于溢水口时水流自排水孔流向下级自由跌水湿地;污水处理系统包括分流控制装置和两个以上多级自由跌水湿地单元,由分流控制装置控制向各个多级自由跌水湿地单元间歇供应污水。该多级自由跌水湿地单元及污水处理系统同时具备跌水水体充氧和潮汐湿地基质充氧两种功能,污水处理效率高、经济环保。

    用于检测链霉菌two-domain漆酶基因的简并引物及其检测方法

    公开(公告)号:CN102660651A

    公开(公告)日:2012-09-12

    申请号:CN201210181804.7

    申请日:2012-06-05

    申请人: 湖南大学

    IPC分类号: C12Q1/68 C12N15/11 C12R1/465

    摘要: 本发明用于一种用于检测链霉菌two-domain漆酶基因的简并引物及检测方法,简并引物包括以下上、下游引物:Cu2SF:5’-TACTGGYACTACCACGACCAY-3’;Cu4SR:5’-RTGVSWCTGSACRTGRCAGTG-3’。本发明的检测方法包括以下步骤:以待测样品中的DNA为模板,利用简并引物进行PCR扩增,反应后进行琼脂糖凝胶电泳检测,根据电泳图谱中是否含有380~430bp的单一条带进行初筛;再将初筛回收后的DNA片段克隆测序,将该DNA序列置入核酸数据库中比对,确定待测样品中是否含有链霉菌two-domain漆酶基因。本发明能够快速、准确、特异性地检测链霉菌two-domain漆酶基因。

    表达木质素过氧化物酶的大肠杆菌工程菌、制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN103540606A

    公开(公告)日:2014-01-29

    申请号:CN201310544399.5

    申请日:2013-11-06

    申请人: 湖南大学

    摘要: 本发明涉及一种大肠杆菌工程菌,本发明还提供一种大肠杆菌工程菌的制备方法,步骤是克隆黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶的基因的cDNA,双酶切上述cDNA,将酶切片段连接pCold-TF载体,鉴定得到的质粒pCold-TF-LiP是否阳性表达,将阳性质粒pCold-TF-LiP导入至大肠杆菌BL21感受态细胞中,获得表达木质素过氧化物酶的大肠杆菌工程菌,本发明还提供大肠杆菌工程菌的应用,方法是将大肠杆菌工程菌接种于液体培养基,液体培养基中加入氨苄青霉素,培养至OD600为0.58~0.62,加入蛋白诱导剂IPTG,诱导重组蛋白表达,本发明的大肠杆菌工程菌表达量高,活性极强,酶活为3528U/L。