本发明公开了一种V型口毛细管色谱填充柱柱塞及其制备方法，所述的制备方法，包括以下步骤：1）取备用毛细管，用高温火焰将其一端烧至熔融状态，且熔融部呈球状，冷却备用；2）用刀沿垂直于毛细管外壁方向切去球体末端，并不露出毛细管管路；3）用砂纸打磨切面，直至露出毛细管管路。本发明的另一目的在于提供一种通过上述方法制得的V型口毛细管色谱填充柱柱塞。本发明的操作简单，可控性强，成功率高，通过本发明提供的方法制得的V型口色谱填充柱柱塞的外径不但不会变窄，而且，被灼烧后的外径基本不发生改变，增强了强度。