本发明涉及一种食品中百草枯和敌草快残留量的测定方法。本发明的样品前处理是用甲醇水溶液提取食品样品中的百草枯和敌草快，并选择C18和PSA分散固相萃取剂对提取液进行净化，最后结合高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱，通过化合物离子的精确质量数实现食品中残留百草枯和敌草快的定性和定量测定。百草枯的平均回收率80.6%～96.8%，相对标准偏差为3.9%～7.1%，定量限10μg/kg；敌草快的回收率80.8%～97.3%，相对标准偏差为3.5%～7.8%，定量限10μg/kg。本发明能有效降低食品中百草枯和敌草快残留检测中的基质干扰，具有操作简便、快速、准确、灵敏度高及重复性好的优点，是对已有QuEChERS方法的补充和改进。