本发明涉及一种植物甾醇有机二元酸糖酯的制备方法。本发明采用的技术方案为：使用二环己基碳酰亚胺(DCC)、4?二甲氨基吡啶(DMAP)和对甲基苯磺酸(p?TsOH)复合催化剂催化植物甾醇有机二元酸单酯与功能性糖发生酯化，首先在室温条件下使用DCC和DMAP活化植物甾醇有机二元酸单酯1小时，再加入功能性糖和p?TsOH，在室温下于超声仪中超声反应至总反应时间为10小时，反应结束后经硅胶柱层析分离得到植物甾醇有机二元酸糖酯。本方法制得的植物甾醇有机二元酸糖酯兼具植物甾醇和功能糖两者的生物活性并且操作简单、反应条件温和、能耗低、产率高，植物甾醇有机二元酸糖酯性质稳定，易于保存。