本发明涉及一种新麦草属植物细胞染色体中期分裂相标本制备方法，包括以下步骤：⑴取材：在一天中任意时间取生长旺盛的盆栽新麦草的新生根并将其放入离心管中；⑵装有根尖的离心管置于高压容器装置内，通N2O进行预处理，得预处理后的新根；⑶预处理后的新根吸干水分，用卡诺氏液固定，得固定后的新根；⑷固定后的新根漂洗、吸干后用冰乙酸解离，得解离后的新根；⑸将解离后的新根中的水分吸干后置于载玻片上，制作压片；⑹将压片置于光学显微镜下观察，选择染色体分散、清晰的细胞进行照相，以便进行荧光原位杂交，最后用玻璃刀做好盖玻片位置的标记，将做好的片子放入-80℃的冰箱保存即可。本发明高效、稳定。