本发明涉及一种利用SUMO系统表达HMGB1 A‑box蛋白的方法，包括以下步骤：以包含HMGB1的质粒为模板，设计引物扩增A‑Box结构域，将扩增后的目的基因A‑Box亚克隆进pSumo‑Mut表达载体的Stu I和Hind III之间，获得pSumo‑Mut‑A‑Box质粒；使用重组质粒转化ArcticExpressTM(DE3)原核宿主菌，使用IPTG诱导表达目的蛋白；sumo蛋白酶酶解，获得高纯度的A‑Box蛋白。本发明优点在于：应用SUMO表达系统高效稳定、可溶性地表达了HMGB1 A‑box融合蛋白，经过SUMO蛋白酶I切割后可以获得纯度较高的成熟蛋白，且无氨基酸残基残留。