本发明公开了一种荧光探针及其制备方法与在检测G?四链体核酸构象中的应用，具体结构式为式中R1为F或N?甲基哌嗪基，R2为N?甲基哌嗪基。该类探针制备简单、易得，并且结构稳定，可用于特异性检测正平行构象的G?四链体核酸二级结构，通过荧光分光光度计可以快速检测出溶液中的DNA样品的二级结构。该类探针对正平行构象的G?四链体核酸二级结构的检测方法具有操作简便，选择性好的优点，并且克服了其他检测方法难以区分G?四链体核酸的多种不同构象，价格昂贵，设备要求高，技术操作相对复杂等缺点。