本发明涉及分析化学领域，具体涉及一种快速测定葡萄糖氧化酶活力的方法。所述方法包括以下步骤：(1)绘制过氧化氢浓度-邻联茴香胺显色剂吸光值标准曲线；(2)对待测葡萄糖氧化酶样品进行预处理；(3)利用过氧化氢浓度-吸光值标准曲线计算试验样品中葡萄糖氧化酶活力。该方法快速可靠，操作简单，灵敏准确。该检测方法原理是在葡萄糖氧化酶的作用下，葡萄糖和氧反应，生成葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢和无色的还原型邻联茴香胺在过氧化物酶的作用下，生成水和棕色的氧化型邻联茴香胺，棕色的氧化型邻联茴香胺与硫酸溶液反应变为粉红色，可于最大吸收波长540nm处快速比色测定。