发明公开
CN104894071A 一种对GT1-7细胞进行基因编辑的方法
无效 - 驳回
- 专利标题: 一种对GT1-7细胞进行基因编辑的方法
- 专利标题(英): Method for carrying out gene edition on GT1-7 cells
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申请号: CN201510311719.1申请日: 2015-06-08
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公开(公告)号: CN104894071A公开(公告)日: 2015-09-09
- 发明人: 王斯佳 , 周宇荀 , 邓倩云 , 李晓宁 , 李文文 , 肖君华 , 李凯
- 申请人: 东华大学
- 申请人地址: 上海市松江区松江新城人民北路2999号
- 专利权人: 东华大学
- 当前专利权人: 东华大学
- 当前专利权人地址: 上海市松江区松江新城人民北路2999号
- 代理机构: 上海泰能知识产权代理事务所
- 代理商 黄志达
- 主分类号: C12N5/10
- IPC分类号: C12N5/10 ; C12N15/63
摘要:
本发明涉及一种对GT1-7细胞进行基因编辑的方法,包括:将GT1-7细胞铺于24孔板中;待细胞贴壁生长,将含有Cas9基因和嘌呤霉素抗性基因的42229质粒转染进入GT1-7细胞系;待细胞表达嘌呤霉素基因,用嘌呤霉素筛选42229转染GT1-7细胞;筛选后,去除含有嘌呤霉素的培养基,更换成正常高糖培养基,并进行扩大培养,待培养板中的GT1-7细胞长满,消化转移到培养瓶中继续扩大培养,即得Cas9稳转GT1-7细胞。本发明在实际应用中只需要转染特定的sgRNA质粒就能对GT1-7细胞靶基因进行精确的基因编辑,避免了Cas9质粒较大对于转染效率的影响,具有良好的应用前景。