一种定位船及其辅助钢沉井下沉定位的施工方法，涉及桥梁施工中钢沉井下沉着床定位领域，包括船体，船体中部的甲板上并排设置多个固定座；船体的两端设置转向马口，转向马口和固定座之间分别装有多个滑车组；每个滑车组包括两组滑轮，并通过一根钢丝绳缠绕连接，缠绕的钢丝绳一端固定，一端为活动端，每个滑车组一端连接固定座，另一端连接定位船的拉缆或锚绳；甲板上还设有一台卷扬机，工作时，至少一个滑车组中的钢丝绳的活动端与卷扬机连接。本发明利用定位船的拉揽对钢沉井下沉过程中产生的倾斜及偏位进行调整，同时减少了定位桩的受力，保证沉井定位精度与施工安全。