本发明涉及一种抑菌生物保鲜膜的制备方法，适用于低温食品的保鲜包装领域，本发明利用的植物乳杆菌植物亚种(Lactobacillus plantarum subsp.plantarum)Zhang‑LL CGMCC No.6936，经活化、扩大培养、离心取上清、硫酸铵沉淀、透析制备得到将植物乳杆菌素Zhang‑LL溶液，然后将植物乳杆菌素Zhang‑LL溶液均匀喷洒在PE膜或PVDC膜上，经烘箱干燥，制备得到生物保鲜膜。本发明制作的抑菌保鲜膜具有良好的贮藏稳定性，常温贮藏抑菌活性至少保持六个月以上，仍可发挥抑菌的功效。本发明制作的抑菌保鲜膜，工艺简单，成本低廉，无毒副作用，且具有很好的抑菌效果，适于工业化生产。同时Zhang‑LL植物乳杆菌素还具有耐高温的特性，高温加热后不会影响其抑菌效果。