一种高产维生素C-2-磷酸酯的方法
摘要:
本发明公开了一种高产维生素C‑2‑磷酸酯的方法,属于生物工程技术领域。本发明通过分子生物学手段从铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)中克隆获得磷酸酶基因,将构建好的表达质粒导入E.coli BL21(DE3),通过卡那霉素抗性平板筛选获得表达载体高拷贝重组的含磷酸酶工程菌。通过组氨酸标签对酶进行纯化,并用于转化维生素C生产维生素C‑2‑磷酸酯。通过控制底物比例,实现维生素C‑2‑磷酸酯的高效生产。在40℃、pH4.5的条件下反应8h,维生素C‑2‑磷酸酯产量可达54.8g/L,转化率为42.9%,时空产率为6.9g/L/h。
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