细胞表面展示PET分解酶的重组毕赤酵母及构建与应用
摘要:
本发明公开了细胞表面展示PET分解酶的重组毕赤酵母及构建与应用,其构建为:(1)化学合成SEQ ID No.1所示的改良过的PET分解酶的核苷酸序列;从毕赤酵母GS115基因组中克隆出锚定蛋白基因的核苷酸序列;(2)利用OverlapPCR将锚定蛋白基因的核苷酸序列和改良过的PET分解酶基因的核苷酸序列连接得到融合序列;(3)将融合序列连接到毕赤酵母表达载体上,得到重组表达载体;(4)将重组表达载体转入宿主毕赤酵母中,得到细胞表面展示PET分解酶的重组毕赤酵母。本发明可以将PET分解酶锚定到细胞表面,固定化后的酶可做全细胞催化剂,相比于野生型稳定性高、回收方便、易控制、可反复利用。
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