本发明属于生物技术领域，具体涉及一种副猪嗜血杆菌特异性血清的制备方法。所述制备方法包括：用进口完全弗氏佐剂注射家兔足下诱导腘淋巴结肿大；用1免免疫原对家兔分别进行腘淋巴结注射和皮下注射；再用2免免疫原对家兔进行皮下注射；最后进行超强化免疫，采集兔血，收获血清。本发明制备方法改变了免疫途径，通过诱导腘淋巴结肿大，更好地激发了外周免疫器官及中枢免疫系统，本发明制备所得副猪嗜血杆菌血清具有高效价(IHA抗体效价可达到210)、特异性强、成本低等优点。