本发明涉及一种平菇母种培养基的制备方法及平菇母种培养基，属于培养基制备技术领域。本发明制得的平菇母种培养基在常规的PDA培养基的基础上加入棉籽壳与玉米芯煮的滤汁，添加了适于平菇菌丝生长的纤维素天然培养基，降‑低了原料中马铃薯、葡萄糖、琼脂粉的含量，有利于降低平菇菌丝新陈代谢活动，从而降低平菇母种的变异速度，防止平菇优良性状的退化。使用该培养基转接的平菇母种，其菌丝生长速度、长势均明显优于利用常规PDA培养基培养的平菇菌丝。