本发明属于生物技术领域，具体公开了一种黄鳝精子超低温冷冻保存液及其冷冻复苏方法，首次建立了适用于黄鳝的精子超低温冷冻保存方法，冷冻复苏后的精子能够用于人工授精，每次复苏后精子的活力都能够达到40%‑50%；用复苏后的精子进行人工授精的受精率和孵化率分别都能达到90%以上和80%以上，本发明提供的冷冻保存液及冷冻复苏方法为黄鳝人工繁殖和遗传育种奠定基础；本发明对仪器要求低，成本也很低，可用于规模化生产，具有重大的推广意义，为今后黄鳝工厂化育苗和良种的选育提供帮助，在黄鳝种质资源的保存和生物多样性的保护研究方面意义重大。